热振荡器辅助的抖动诱导转化平台优化，用于快速检测人体样本中的朊蛋白种子活性

《European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases》：Optimization of a thermal shaker-aided quaking-induced conversion platform for the rapid detection of prion seeding activity in human samples

　　**背景**克雅氏病是一种快速进展的致命性神经退行性疾病，由正常朊蛋白错误折叠为致病形式所致。因此，有效的临床管理和感染防控需要兼具亚阿摩尔灵敏度且周转时间与常规实践相适应的诊断方法。虽然实时摇动诱导转化检测具有良好的分析性能，但其漫长的反应时间以及对需要集成高速摇动与连续荧光检测的酶标仪的依赖限制了其广泛应用。**方法**终点QuIC检测是一种成熟的替代方法，该方法利用ThermoMixer? C进行剧烈摇动，并依赖单次终点荧光读数。在本研究中，我们对检测条件进行了小幅调整，以提高EP-QuIC的速度、稳健性和可重复性。**结果**优化后的检测方法可在6小时内检测到散发性克雅氏病脑组织样本中的朊蛋白种子活性，在某些情况下甚至可在2小时时即检测到。与RT-QuIC不同，在RT-QuIC中影响检测可靠性的问题重组PrP批次——表现为动力学延迟和无种子反应中自发ThT荧光——在EP-QuIC中并未产生类似效应。相反，这些批次产生了强而特异的荧光信号，能够明确识别散发性克雅氏病样本，展示了该方法在批次耐受性和诊断效率方面的优势。当应用于脑脊液检测时，EP-QuIC检测表现出100%的灵敏度和特异性。**结论**EP-QuIC检测有望成为人类朊蛋白疾病的快速、可靠诊断工具。