FTO通过m6A-IGF2BP1-TRIB3轴调控肝星状细胞激活与肝纤维化的机制研究

《Scientific Reports》：FTO-mediated m6A regulation modulates hepatic stellate cell activation through the IGF2BP1–TRIB3 axis and mitochondrial homeostasis

　　

摘要

肝纤维化是慢性肝病的一个重要病理阶段，但其发病机制尚未完全阐明——特别是N6-甲基腺苷（m6A）甲基化的作用。本研究探讨了m6A去甲基化酶脂肪量和肥胖相关蛋白（FTO）调控肝星状细胞（HSC）激活和肝纤维化的机制。采用胆管结扎（BDL）建立小鼠肝纤维化模型，并通过转染特异性shRNA或过表达质粒调节人肝星状细胞LX-2中FTO和IGF2BP1的表达。所用技术包括组织学检查（H&E染色、Sirius Red染色、Masson三色染色）、免疫组织化学（IHC）、免疫荧光、Western blot、qRT-PCR、RNA点杂交、MeRIP-qPCR以及线粒体功能检测，以评估胶原沉积、HSC激活、m6A甲基化水平和线粒体自噬情况。BDL小鼠表现出明显的炎症浸润和胶原沉积，表明HSC发生激活。Western blot和qPCR显示HSC中FTO表达下调。FTO缺失通过升高m6A水平促进HSC激活，增加α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I型胶原（Collagen I）和转化生长因子-β（TGF-β）的表达。在机制层面，FTO耗竭与TRIB3表达增加相关，该过程通过m6A–胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1（IGF2BP1）依赖的调控机制实现，并伴随线粒体功能障碍、线粒体自噬相关改变及HSC激活。这些发现提示FTO–m6A–IGF2BP1–TRIB3轴的失调参与了肝星状细胞激活和肝纤维化的发生发展，突出了该通路作为表观遗传干预靶点的潜力，并为肝纤维化的基于机制的治疗策略开发提供了新思路。