雷戈非尼通过EGFR-TNF/NF-κB信号轴诱导肝细胞癌铁死亡

《Apoptosis》：Regorafenib induces ferroptosis in hepatocellular carcinoma via the EGFR-TNF/NF-κB signaling axis

　　**摘要**瑞戈非尼是索拉非尼耐药肝细胞癌（HCC）的标准二线多靶点酪氨酸激酶抑制剂。铁死亡是一种有前景的治疗性细胞死亡方式，但调控瑞戈非尼诱导铁死亡的上游信号事件仍不清楚。我们利用铁死亡相关检测手段——包括活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、不稳定Fe2?、脂质过氧化以及线粒体超微结构——在未经治疗的SNU-449和HuH-7 HCC细胞及小鼠肿瘤模型中考察了瑞戈非尼的活性。研究将转录组分析与EGFR和p65的遗传学及药理学调控相结合。在HuH-7异种移植瘤和Hepa1-6同基因瘤模型中评估了抗肿瘤效果。瑞戈非尼抑制了细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长，并降低了Ki-67的表达。该药下调了SLC7A11/xCT和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4），同时增加了ROS、不稳定Fe2?、脂质过氧化和MDA水平；铁死亡抑制剂ferrostatin-1可部分恢复细胞活力并减轻脂质过氧化。转录组分析发现TNF信号通路显著富集。瑞戈非尼降低了总EGFR和磷酸化EGFR以及p65的水平，减少了p-EGFR/EGFR和p-p65/p65比值，并抑制了p65的核转位。p65敲低可降低SLC7A11/xCT和GPX4表达并加剧铁死亡，而p65过表达则减弱了上述效应。*EGFR*敲低减少了TNF-α并增强了铁死亡；EGFR激动剂NSC228155恢复了NF-κB活性以及SLC7A11/xCT-GPX4的表达。联合*EGFR*敲低和来那度胺治疗在体外进一步增强了铁死亡相关表型。对24对配对样本的探索性分析显示，EGFR、p65和GPX4均上调且呈正相关。上述发现表明EGFR-TNF/NF-κB信号通路是未经治疗HCC模型中发挥功能的上游模块，并为在耐药模型中验证联合*EGFR*敲低与来那度胺治疗提供了依据。