基于EXPAR触发的滚环扩增与二聚体/串联G-四链体–硫黄素T报告体系耦合的miRNA-21无标记荧光检测 可供购买

《Analytical Methods》:Label-free fluorescent detection of miRNA-21 via EXPAR-triggered rolling circle amplification coupled with a dimeric/tandem G-quadruplex–thioflavin T reporterAvailable to Purchase

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年10月27日 来源:Analytical Methods 3

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   打开图形查看器 MicroRNA-21 是一种公认的原癌性 microRNA,参与多种癌症的发生与发展,使其成为诊断的重要候选标志

MicroRNA-21 是一种公认的原癌性 microRNA,参与多种癌症的发生与发展,使其成为诊断的重要候选标志物。在本工作中,我们通过耦合指数扩增反应(EXPAR)、滚环扩增(RCA)和 G-四链体二聚体/硫黄素 T(ThT)信号报告,设计了一种用于高灵敏检测 miRNA-21 的无标记荧光检测方法。所设计的不对称发夹探针特异性识别靶标并启动 EXPAR,产生大量触发链,随后激活 RCA。RCA 产物含有重复的富含 G 片段,编码串联/二聚体 G4 形成基序,在 K+ 存在下形成多个 G-四链体单元。ThT 与这些结构结合后,产生清晰的荧光输出。得益于发夹设计有效抑制的背景泄漏以及 EXPAR–RCA 级联实现的信号显著增强,该检测方法表现出优异的解析性能。荧光响应在 10 fM 至 10 nM 范围内表现出良好的线性相关性,检测限(LOD)为 1.58 fM。该方法对 miRNA-21 还显示出高选择性,能够区分单碱基错配序列。此外,对稀释血清和细胞 RNA 样本的分析证明了所提策略在生物基质中的初步适用性。该方法为 miRNA 检测和生物分析研究提供了一个便捷、低成本且高灵敏度的分析平台。

视觉摘要

顺序 EXPAR–RCA 级联将 miRNA-21 识别转化为串联富含 G 产物,而序列工程化的串联 G4 报告子增强了 ThT 荧光,实现低飞摩尔级检测。

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