氟唑菌酰胺与肟菌酯在辣椒中的消解、终残留及慢性膳食风险评估：基于中国12地田间试验的QuEChERS-UPLC-MS/MS研究

《Foods》：Dissipation, Residues and Dietary Risk Assessment of Fluxapyroxad and Trifloxystrobin in Chilli Peppers

　　

对辣椒（Capsicum annuum L.）中氟唑菌酰胺（fluxapyroxad）和肟菌酯（trifloxystrobin）残留的研究对食品安全至关重要。按照良好农业规范（Good Agricultural Practice, GAP），研究人员开展了监督田间试验，系统评价这两种杀菌剂在辣椒中的残留行为与膳食暴露风险。开发并验证了一种将QuEChERS样品前处理与超高效液相色谱–串联质谱（UPLC–MS/MS）结合的方法，用于同时定量辣椒中的氟唑菌酰胺、肟菌酯及其代谢物。该方法回收率为92–101%，相对标准偏差（RSDs）低于6%，两种分析物的定量限（LOQ）均为0.01 mg/kg。田间试验结果显示，两种杀菌剂在辣椒中均快速消解，符合一级动力学，氟唑菌酰胺和肟菌酯的半衰期分别为2.4–5.2 d和1.8–4.6 d。氟唑菌酰胺和肟菌酯的终残留分别为<0.010–0.23 mg/kg和0.014–0.49 mg/kg。氟唑菌酰胺和肟菌酯的慢性风险商分别为其各自每日允许摄入量（ADI）的92.57–92.61%和13.27–13.30%，表明膳食风险可接受。该研究提供残留数据和科学证据，支持建立和修订辣椒中氟唑菌酰胺和肟菌酯的最大残留限量（MRLs），以及这两种杀菌剂在中国的安全使用。

辣椒（Capsicum annuum L.）具有重要经济价值，并因营养丰富、风味独特和烹饪用途广泛而在世界范围内广泛种植；中国是全球最大的辣椒生产国和消费国。然而，集约化种植结合温暖湿润的生长条件，使辣椒易受炭疽病、白粉病和灰霉病等真菌病害影响，造成产量损失和果实品质下降。杀菌剂仍是综合病害管理中的重要措施。氟唑菌酰胺（fluxapyroxad；一种琥珀酸脱氢酶抑制剂（SDHI）类杀菌剂）和肟菌酯（trifloxystrobin；一种QoI类甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂）因作用机制互补和广谱抗真菌活性受到关注。尽管农业收益明显，但其广泛施用引发食品农药残留及人体健康风险担忧。已有研究多针对单剂、单作物或单地点，缺乏对两种杀菌剂及其代谢物的同时监测、多地点田间验证和全面膳食风险评估；此前尚无已发表方法可同时测定氟唑菌酰胺、其两个主要代谢物、肟菌酯及其酸代谢物跨多个农业生态区。为此，研究人员建立同时测定上述化合物的方法，评估田间终残留并开展中国一般人群膳食风险评估。研究结论表明，两种杀菌剂在辣椒中快速消解，推荐良好农业规范（GAP）条件下终残留总体可控，慢性膳食风险低于100%的安全阈值，为最大残留限量（MRL）制定修订和安全使用提供科学依据。

关键技术方法概述（不超过250字）：研究人员采用改良QuEChERS（quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe；一种样品前处理技术）结合UPLC–MS/MS（超高效液相色谱–串联质谱），建立同时测定辣椒中氟唑菌酰胺、肟菌酯及其代谢物M700F008、M700F048和CGA 321113的方法；于2024和2025年在中国12个代表性辣椒产地开展监督田间试验，样本覆盖温室和露地生产系统；在4个代表点开展消解试验，并于施药后2 h及3、5、7、10 d采样；终残留在末次施药后5和7 d采样；采用国家估计日摄入量（NEDI）模型和慢性风险商（RQ_c）结合中国一般人群消费数据进行膳食风险评估。

研究结果如下。3.1 方法验证（Method Validation）：通过建立并验证改良QuEChERS结合UPLC–MS/MS方法，结论为该方法可同时定量辣椒中两种杀菌剂及其代谢物。3.1.1 线性和基质效应（Linearity and Matrix Effects）：通过基质匹配校准曲线评价，氟唑菌酰胺和肟菌酯在0.002–0.07 mg/L、M700F008、M700F048和CGA 321113在0.002–0.2 mg/L范围内线性良好，相关系数（r）为0.9940–0.9996；辣椒基质中所有目标物均存在显著基质效应，范围为?73.4%至?32.2%，故全程采用基质匹配校准以保障定量准确性。3.1.2 回收率和精密度（Recovery and Precision）：通过0.01、0.1、0.5和1.0 mg/kg四个加标水平、每个水平5个重复的回收率试验，得出所有分析物平均回收率为92%–101%，相对标准偏差（RSD）为2%–6%，符合NY/T 788-2018和SANTE/11312/2021接受标准，方法可靠且重现性良好。3.2 消解动力学（Dissipation Kinetics）：通过4个代表点田间消解试验，发现两种杀菌剂残留均下降；M700F008、M700F048和CGA 321113在山西、山东和湖南点未检出；广西点第0天检出M700F008与肟菌酯残留（分别为0.010和0.012 mg/kg），至第10天均降至定量限（LOQ）以下；广西初始浓度最高（氟唑菌酰胺0.44 mg/kg、肟菌酯0.88 mg/kg），山西最低（0.058和0.15 mg/kg）；两种化合物符合一级动力学，消解半衰期（DT₅₀）分别为氟唑菌酰胺2.4–5.2 d、肟菌酯1.8–4.6 d；湖南点氟唑菌酰胺施药后5 d低于LOQ，因有效数据少于5个未能可靠拟合；湖南肟菌酯消解最快（DT₅₀=1.8 d），7 d内低于LOQ，主要归因于较高温度和频繁降雨导致表面沉积农药被雨水物理冲刷；地点间残留差异主要由初始沉积效率而非固有降解潜力驱动。3.3 辣椒中氟唑菌酰胺和肟菌酯的终残留（Terminal Residues of Fluxapyroxad and Trifloxystrobin in Chilli Pepper）：通过12个试验点末次施药后5和7 d采样分析，5 d时氟唑菌酰胺残留为<0.010–0.23 mg/kg，监督试验中位残留（STMR）为0.032 mg/kg，最高残留（HR）为0.23 mg/kg；M700F008痕量检出（<0.010–0.012 mg/kg），M700F048均低于LOQ；氟唑菌酰胺总残留（母体与代谢物之和，以氟唑菌酰胺当量计）为0.010–0.24 mg/kg；肟菌酯母体残留为0.014–0.49 mg/kg（STMR：0.082 mg/kg；HR：0.49 mg/kg），CGA 321113为<0.010–0.015 mg/kg，肟菌酯总残留为0.014–0.51 mg/kg；7 d时残留总体下降，氟唑菌酰胺为<0.010–0.21 mg/kg（STMR：0.026 mg/kg；HR：0.21 mg/kg），肟菌酯为<0.010–0.45 mg/kg（STMR：0.059 mg/kg；HR：0.45 mg/kg），代谢物仍处低浓度，且7 d时两种母体残留均低于5 d时各自HR，表明7 d收获前间隔期（PHI）可有效降低采收前残留负荷。区域差异方面，北京点两种杀菌剂残留最高，可能与温室条件、皱皮螺旋辣椒品种及试验期平均温度仅1.06 °C有关；肟菌酯残留在各地区均高于氟唑菌酰胺（约1.7–2.9倍），与其较高亲脂性和极低水溶性、易结合植物表皮蜡质有关；北方地区5和7 d平均残留高于南方，可能与较低环境温度和较少太阳辐射减弱化学及光解降解有关；PHI由5 d延长至7 d时残留下降15%–50%，辽宁和湖南两点在两个PHI均低于LOQ；所有检测水平低于相应MRL；根据GB 2763-2026，肟菌酯在辣椒中MRL为0.5 mg/kg，接近本研究7 d PHI的0.45 mg/kg；对氟唑菌酰胺建议考虑0.5 mg/kg的MRL。3.4 慢性膳食摄入风险评估（Chronic Dietary Intake Risk Assessment）：通过STMR值与中国一般人群食物消费模式结合NEDI模型评估，氟唑菌酰胺NEDI为1.167和1.166 mg，分别占63 kg成人ADI的92.61%（5 d）和92.57%（7 d）；辣椒贡献0.23%（PHI=5）和0.19%（PHI=7），浅色蔬菜、水果、大米及其制品为主要贡献类别，占ADI的88.17%；肟菌酯NEDI为0.336和0.334 mg，分别占ADI的13.30%（5 d）和13.27%（7 d）；所有RQ_c均远低于100%，表明慢性膳食暴露具有较大安全边际。

讨论部分总结：残留水平受区域气候、种植系统和农艺实践共同影响，北京点高残留与温室、皱皮品种和低温相关，肟菌酯高残留与其亲脂性和低水溶性相关，南北梯度与温度和辐射差异相关；MRL可依据良好农业规范条件下最高残留的约2–4倍估算，本研究结果支持肟菌酯现有MRL及氟唑菌酰胺MRL建议；膳食风险评估采用保守的确定性方法，假设所有农产品均含STMR或MRL水平残留，氟唑菌酰胺RQ_c高于肟菌酯主要因其登记作物更广和膳食暴露更高，但所有RQ_c均低于100%，在评估条件下食品安全性可接受。

研究结论部分翻译：本研究评估了在中国12个田间点施用30%悬浮剂（SC）共制剂后辣椒中氟唑菌酰胺和肟菌酯的消解、残留水平及慢性膳食暴露风险。经验证的QuEChERS-UPLC-MS/MS方法能够精确、同时定量两种母体化合物及其代谢物（M700F008、M700F048和CGA 321113），满足线性、灵敏度、准确度和精密度所有监管标准。两种杀菌剂在辣椒中快速消解，符合一级动力学，DT₅₀分别为2.4–5.2 d和1.8–4.6 d。在推荐剂量下，终残留试验发现氟唑菌酰胺残留为<0.010–0.23 mg/kg，肟菌酯残留为<0.010–0.49 mg/kg。使用NEDI模型的膳食风险评估显示风险商分别为ADI的92.57–92.61%和13.27–13.30%，均远低于100%安全阈值。这些发现证实，在测试的GAP条件下，该共制剂对中国一般人群不构成不可接受的慢性膳食风险。据研究人员所知，这是中国首个关于该共制剂在辣椒中消解和残留的系统性多区域研究。未来研究应确定干制和腌制辣椒产品的加工因子，将该方法扩展至其他基质及相关SDHI/QoI杀菌剂，评估该杀菌剂组合的累积膳食暴露，并通过实验室间验证验证方法稳健性。