《Acta Tropica》：Molecular detection of pathogens in
Rhipicephalus ticks collected from companion animals in Bejaia province, northern Algeria
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本研究首次对阿尔及利亚东北部贝贾亚省伴侣动物体表采集的蜱开展蜱传病原体的分子调查。在采集的蜱中检测到立克次体属（Rickettsia）、肝簇虫属（Hepatozoon）和梨形虫（Piroplasmid）的DNA，其中立克次体属（Rickettsia spp.）
本研究首次对阿尔及利亚东北部贝贾亚省伴侣动物体表采集的蜱开展蜱传病原体的分子调查。在采集的蜱中检测到立克次体属（Rickettsia）、肝簇虫属（Hepatozoon）和梨形虫（Piroplasmid）的DNA，其中立克次体属（Rickettsia spp.）是检出率最高的蜱传病原体。测序分析揭示存在犬巴贝斯虫（Babesia vogeli）、Cytauxzoon spp.、犬肝簇虫（Hepatozoon canis）、马西立克次体（Rickettsia massiliae）和康氏立克次体（Rickettsia conorii）。
硬蜱（Acari: Ixodida: Ixodidae）是仅次于蚊虫的第二大传染病传播媒介，可传播多种原生动物、细菌和病毒病原体，对野生和家养动物及人类健康构成威胁。伴侣动物（主要是狗和猫）在蜱传病原体（tick-borne pathogens, TBPs）的流行病学中具有重要作用，其体表蜱的感染情况可指示环境暴露风险，并与人类健康密切相关。在北非地区，包括阿尔及利亚，尽管已有若干TBPs分子调查报道，但流行病学数据仍零散且地域覆盖不全。贝贾亚省位于阿尔及利亚东北部，属地中海气候，温暖湿润的条件利于蜱的生存与繁殖，但此前尚无关于该省伴侣动物蜱携带病原体的分子数据。为填补这一知识空白，本研究拟调查贝贾亚省伴侣动物体表蜱中Rickettsia spp.、嗜吞噬细胞无形体（Anaplasma phagocytophilum）、巴尔通体属（Bartonella spp.）、犬埃里希体（Ehrlichia canis）、肝簇虫属（Hepatozoon spp.）和梨形虫（Piroplasmida）的感染情况，以获取基线流行病学数据，支持未来在“One Health”框架下的蜱传疾病监测与防控。
研究人员于2022年9月至2025年11月期间，在贝贾亚省多个城市和城郊地区，从75只狗、11只猫和1只希腊陆龟身上采集了共100只蜱。形态学及分子鉴定结果显示，99只（99%）为血红扇头蜱（Rhipicephalus sanguineus），1只为埃及璃眼蜱（Hyalomma aegyptium）。病原体分子筛查结果表明，18%（18/100）的蜱至少携带一种病原体，其中Rickettsia spp.检出率最高（11.1%），其次为Hepatozoon spp.（6.1%）和Piroplasmida（2.0%）。测序进一步鉴定出马西立克次体（R. massiliae）、康氏立克次体（R. conorii）、犬肝簇虫（H. canis）、犬巴贝斯虫（B. vogeli）和Cytauxzoon spp.。此外，Hepatozoon在猫来源蜱中的检出率（27.3%）显著高于狗来源蜱（3.4%）。所有样本均未检出E. canis、A. phagocytophilum和Bartonella spp.。上述结果证实了贝贾亚省伴侣动物蜱中存在多种具有兽医和公共卫生意义的病原体，其中立克次体是最主要的病原体类群。
本研究采用的主要技术方法包括：蜱种鉴定方面，先以形态学分类为主，对存疑标本进一步扩增线粒体16S rRNA基因（约455 bp）并测序；病原体检测方面，针对Rickettsia spp.的gltA基因、Bartonella spp.的ssrA基因、A. phagocytophilum的msp2基因和E. canis的16S rRNA基因采用实时荧光定量PCR（qPCR）筛查，针对Piroplasmida和Hepatozoon spp.的18S rRNA基因采用常规PCR；阳性样本经Sanger测序后，使用NCBI BLAST比对，并利用MEGA 12.1.2构建最大似然系统发育树；统计学上采用Fisher精确检验比较不同宿主来源蜱的病原体检出率差异。样本队列来自贝贾亚省多个城镇的伴侣动物，所有蜱均在动物临床检查时采集。
**3.1 蜱的采集**
研究人员从87只宿主共采集100只蜱，经形态学和分子鉴定，99%为Rh. sanguineus，1%为H. aegyptium。Rh. sanguineus为当地伴侣动物蜱的优势种，这一结果与地中海地区已知的蜱种分布特征一致。
**3.2 病原体检测**
通过qPCR和常规PCR筛查，在Rh. sanguineus中检出Rickettsia spp.、Hepatozoon spp.和Piroplasmida，阳性率分别为11.1%、6.1%和2.0%。仅有的1例混合感染（Rickettsia与Hepatozoon）来自一只幼年公狗体表采集的蜱。按宿主来源分析，Rickettsia和Piroplasmida仅在狗来源蜱中检出，而Hepatozoon在猫来源蜱中的检出率（27.3%）显著高于狗来源蜱（3.4%）。所有样本均未检出E. canis、A. phagocytophilum和Bartonella spp.，这提示这些病原体在本次采样条件下未被发现，但不能排除其在研究区域的存在。
**3.3 病原体鉴定与系统发育分析**
测序分析鉴定出R. massiliae和R. conorii，其中R. massiliae在4份样本中检出，R. conorii在1份样本中检出。5份阳性样本鉴定为H. canis，其序列与GenBank中已知H. canis序列100%一致。Piroplasmida阳性样本中，1份为B. vogeli，另1份为Cytauxzoon spp.，两者均来自临床健康狗体表采集的蜱。基于ompB基因和18S rRNA基因的系统发育分析分别将Rickettsia序列和原生动物序列聚类到相应物种分支中，并与来自不同地理区域的参考序列高置信度地聚在一起。由于Cytauxzoon所扩增的18S rRNA片段较短，其未能被准确鉴定到种水平。
讨论部分指出，本研究是贝贾亚省首次对伴侣动物蜱进行TBPs的分子调查，其中Rh. sanguineus的主导地位与地中海地区已知生态特征相符。R. massiliae为本研究检出最多的立克次体，而R. conorii仅在1只蜱中检出，该趋势与既往阿尔及利亚北部研究以R. massiliae为主的认识一致。Hepatozoon在猫来源蜱中的高检出率差异具有统计学意义，提示不同宿主在肝簇虫传播中的角色可能不同，但其机制尚需更多研究阐明。鉴于样本量及采样策略的局限性，未检出的病原体并不能排除在当地循环的可能；同时，较短的18S rRNA扩增片段也限制了Cytauxzoon的种级鉴定。
研究结论如下：本研究提供了贝贾亚省伴侣动物蜱中TBPs的首个分子证据，确认了R. massiliae、R. conorii、H. canis、B. vogeli和Cytauxzoon spp.在当地蜱中的存在，且Rh. sanguineus为采集蜱中的优势种。系统发育分析证实了病原体的鉴定结果，并揭示了其与既有报道分离株的遗传关系。这些发现强调了在蜱传病原体监测中考虑伴侣动物的重要性，在兽医和One Health视角下具有实际意义，并为后续整合蜱监测、病原体检测与宿主因素的研究奠定了基础。
