《Veterinary Sciences》：Temporal Changes in Pain, Demeanour, Sedation and Salivary Cortisol During Repeated Pregabalin Administration in Hospitalised Feral Cats: An Exploratory Prospective Single-Arm Study
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：住院流浪猫可能经历应激、疼痛及防御性行为，这些因素使临床护理复杂化。本前瞻性、探索性、非对照研究描述了反复给予普瑞巴林期间的时序变化。研究纳入25只猫，其中20只完成试验。普瑞巴林（10 mg/kg）每12小时给药一次，共4剂。研究人员在T-Pre至T60时
：住院流浪猫可能经历应激、疼痛及防御性行为，这些因素使临床护理复杂化。本前瞻性、探索性、非对照研究描述了反复给予普瑞巴林期间的时序变化。研究纳入25只猫，其中20只完成试验。普瑞巴林（10 mg/kg）每12小时给药一次，共4剂。研究人员在T-Pre至T60时间点评估了心率（HR）、呼吸频率（RR）、猫科动物痛苦面容量表（FGS）、行为评分系统（DSS）及整体镇静评分（GSS）；同时测量唾液皮质醇。重复测量一般线性模型纳入了18例完整评分数据、8例HR数据及15例RR数据；皮质醇亚组分析为事后分析。时间因素对FGS、DSS及GSS均有显著影响（均p < 0.001）。在T36时点，FGS的个体平均变化为?48.3%（95% CI，?65.8%至?30.8%），DSS为?54.1%（95% CI，?63.7%至?44.5%）。GSS在T6达到峰值，提示轻度镇静。HR（p = 0.112）、RR（p = 0.259）及总体皮质醇（n = 16）均未检测到显著时间效应。在洗脱期（Tw），患有严重持续性疾病的猫皮质醇水平高于无此类疾病的猫（p < 0.001）；临床操作与短暂性升高相关。未记录到不良事件。临床恢复、环境适应、伴随治疗、救援镇痛及反复操作可能均有贡献，因此这些关联并不能确立普瑞巴林的疗效，仍需开展对照研究加以验证。
论文解读
一、研究背景与目的
猫与人类共存数千年，但家猫在自由活动及室内环境中均保留了诸多祖先行为特征。流浪猫指在领地内自由生活、社会化期间与人类接触极少或完全无接触的猫。此类猫在陌生环境中对应激尤为敏感，当无法逃脱抓捕时，可能表现出防御性行为，既威胁动物自身安全，也危及兽医人员，并可能改变其生理指标。运输、体格检查及诊断程序均可进一步增加应激。这些挑战激活中枢威胁反应机制及下丘脑–垂体–肾上腺（HPA）轴。HPA轴激活会增加皮质醇释放，使皮质醇成为客观评估应激的有效标志物。由于采血本身可能诱发额外应激反应，唾液皮质醇为评估猫应激提供了创伤更小的途径。
住院猫的应激管理策略包括适当保定、环境丰容及提供躲藏机会。猫还可能隐藏疼痛体征，进一步增加临床评估难度，因此可能需要药物干预。普瑞巴林作为γ-氨基丁酸（GABA）的结构类似物，不直接结合GABA受体，而是结合突触前电压门控钙通道的辅助α2-δ亚基，减少兴奋性神经递质释放。口服普瑞巴林溶液相比固体制剂可实现更精确的剂量控制。既往研究评估了单次口服5–10 mg/kg在猫中的效果，但反复给予10 mg/kg在住院流浪猫中的研究尚属空白。
疼痛、防御性行为、镇静、神经内分泌应激及生理变量提供互补而非可互换的信息。FGS通过观察量化疼痛相关面部表情，尤其适用于应尽量减少直接接触的场景；DSS用于描述接近、防御行为及互动耐受性；GSS评估镇静与警觉水平；唾液皮质醇提供肾上腺皮质激活的非侵入性指标；心率与呼吸频率作为常规评估的非特异性临床变量，可补充行为及内分泌指标。
据此，本前瞻性、探索性、非对照研究旨在描述住院流浪猫在反复口服普瑞巴林期间疼痛相关面部表情、行为、镇静、生理变量及唾液皮质醇的时序变化，并评估其对保定及临床操作的耐受性。
二、研究设计与方法
本研究为前瞻性、探索性、非对照、单臂临床研究，于2024年3月至2025年9月在意大利巴里阿尔多莫罗大学兽医教学医院开展。研究经该校临床与畜牧伦理委员会批准。流浪猫由群落管理者发现患病后转运至医院，依据其自由活动生活方式及与人类极少社会化的历史确认流浪状态。入组标准要求DSS评分至少9/25，且能自主进食、临床状况允许完成方案。排除标准包括终末期肿瘤、休克或脓毒症、意识或感觉状态改变、神经或肾脏疾病、无法自主进食、持续输注镇静或镇痛药物、入院24小时内计划手术或无明确诊断。
研究房间仅收治猫科患者，光照与声音因临床护理需要无法标准化。每只猫单独笼养，笼内配备食物与水碗、猫砂盆及纸板躲藏箱。研究周期为4天，仅研究操作人员直接接触猫、给药及提供食物饮水。基线评估在首次给药前24小时内完成（T-Pre）。普瑞巴林口服溶液（Bonqat?）以10 mg/kg剂量混入少量湿粮或干粮，于T0、T12、T24及T36每12小时给药一次，共4剂。HR、RR、FGS、DSS及GSS在T-Pre、T4、T6、T12、T24、T30、T36、T48及T60评估，其中T48与T60分别对应末次给药后12与24小时。
猫接受针对基础疾病的个体化治疗，方案不由研究标准化，可能包含抗炎药物。每只猫均放置静脉导管。每次预定观察时，FGS评估先于任何救援干预。当FGS评分≥4或临床提示需要救援镇痛时，给予静脉美沙酮（0.1 mg/kg）。救援镇痛后研究评估至少延迟4小时。临床操作需额外镇静时给予丙泊酚（1–5 mg/kg IV），预定评估推迟至猫完全恢复后按调整时间表执行。需全身麻醉进行重大操作或其他显著方案偏离的猫予以排除。
FGS评估5个面部动作单元，每项0–2分，总分0–10分，分值越高表示疼痛表情越明显。DSS包含8个项目，总分0–25分，划分为五个类别：友好自信（0）、友好害羞（1–8）、退缩防御（9–18）、退缩攻击（19–24）及明显攻击（25）。GSS范围?3至+3，正值表示镇静加深，负值表示警觉增强。
唾液于13:00在T-Pre、第1天、第2天及洗脱期（Tw）采集，通过轻柔擦拭口腔获取，离心后储存于?20 °C。皮质醇使用高灵敏度唾液皮质醇酶免疫分析试剂盒（Salimetrics，美国宾夕法尼亚州州学院；编号1-3002）测定，该试剂盒已针对包括猫在内的人类及动物样本验证，检测下限为0.007 μg/dL。16只具有完整皮质醇数据的猫依据病历信息回顾性分为两个临床亚组：严重持续性疾病组与非严重持续性疾病组。
统计分析使用IBM SPSS Statistics 17版。数据分布经Kolmogorov–Smirnov检验评估。HR、RR、FGS、DSS及GSS分别采用重复测量一般线性模型（GLM）分析，以时间为受试者内因素，各结局采用完整病例，缺失值不进行插补。球形性不满足时采用Greenhouse–Geisser校正。整体时间效应显著后，采用Fisher最小显著差异法进行各随访时点与T-Pre的两两比较，并考察T36–T48及T36–T60对比。16只完整皮质醇数据的猫进行探索性事后分析，评估总体及亚组内时序变化，亚组间Tw比较采用单因素方差分析，临床操作前后比较采用重复测量GLM。显著性水平设为p < 0.05。
三、研究结果
3.1 研究人群与临床特征
初始纳入25只流浪猫，5只因神经系统异常、咀嚼障碍及下颌骨骨折等影响方案执行的情况被排除。最终20只猫完成研究，包括9只雌性与11只雄性。临床状况异质性较大，包括慢性龈口炎3只、耳部疾病3只、骨盆骨折2只、眼部疾病2只，其余分别患有蝇蛆病、皮肤脓肿、尾损伤、血尿、体重减轻、呼吸窘迫、肠梗阻、厌食或皮肤创面（后者2只）。因流浪状态无法准确确定年龄。平均体重3.90 ± 0.93 kg，平均体况评分5.00 ± 0.97（九分制）。
3.2 生理变量
因部分时点测量缺失，HR完整病例分析仅纳入8只猫，RR纳入15只。时间对HR（p = 0.112）及RR（p = 0.259）均无显著影响。
3.3 疼痛、行为与镇静评分
FGS、DSS及GSS的完整病例重复测量GLM各纳入18只猫。时间对FGS有显著影响（p < 0.001）。与T-Pre相比，FGS在T12、T24、T36、T48及T60显著降低（均p < 0.001），在T30亦显著降低（p = 0.002）。T4（p = 0.059）与T6（p = 0.053）差异未达显著。FGS最低均值出现在T36，从基线3.25 ± 1.33降至1.40 ± 1.05，配对均差?2.06分，个体平均百分比变化?48.3%。DSS亦随时间显著变化（p < 0.001），T4至T60各随访时点均显著低于基线（均p < 0.001）。DSS最低均值出现在T36，从基线15.85 ± 2.68降至7.25 ± 3.32，配对均差?9.06分，个体平均百分比变化?54.1%。GSS同样随时间显著变化（p < 0.001），T4至T60各时点均显著高于基线，提示镇静程度增加。GSS最高均值出现在T6，从基线?1.05 ± 0.69升至0.80 ± 0.62，配对均差1.78分。停药后，DSS从T36至T48及T60显著回升，而FGS与GSS无相应变化。
3.4 救援镇痛与不良事件
救援美沙酮给药比例在基线为8/20只（40%），此后各时点均低于基线，T12、T30及T60无猫需要救援镇痛。研究期间未记录到不良事件。
3.5 唾液皮质醇浓度
4只猫因无法获得完整唾液样本被排除，16只猫所有样本均可检出皮质醇。总体组平均唾液皮质醇浓度在T-Pre为0.31 ± 0.27 μg/dL，第1天0.40 ± 0.28 μg/dL，第2天0.38 ± 0.21 μg/dL，Tw为0.27 ± 0.31 μg/dL，未检测到显著时序变化。16只猫中，10只回顾性归类为非严重持续性疾病，6只为严重持续性疾病。非严重组Tw皮质醇显著低于T-Pre、第1天及第2天。严重组T-Pre与Tw比较p = 0.050。10只猫在临床操作（导尿或影像学检查）期间皮质醇较操作前升高，操作后下降（均p < 0.05）。Tw时严重组皮质醇显著高于非严重组（0.56 ± 0.32对0.10 ± 0.10 μg/dL；p < 0.001）。
四、讨论与结论
本研究描述了住院流浪猫反复口服普瑞巴林期间临床评分、生理变量、救援镇痛及唾液皮质醇的时序变化。FGS与DSS随时间降低，GSS在治疗期间轻度升高，HR、RR及总体唾液皮质醇无显著时间效应。这些发现仅描述研究期间的关联，不能确立普瑞巴林疗效。FGS与DSS的降低可能反映镇痛、临床恢复、环境适应及与操作人员互动改变的不同组合。DSS在停药后显著回升而FGS与GSS无相应变化，提示三个量表未呈现一致的开关模式或T36累积效应。救援美沙酮使用比例在基线后各时点均低于基线，但受治猫数随时间波动且未作为独立结局分析。GSS从负基线均值转为轻度正值并在T6达峰，提示轻度镇静而非镇静减弱。既往单剂量研究亦报道普瑞巴林在减少恐惧或焦虑的同时伴随镇静。HR与RR未显示显著时间效应，但HR完整病例仅8只，样本量限制精度。未记录不良事件，但研究未以安全性为主要终点，4天观察期无法识别罕见或延迟效应。唾液皮质醇总体无显著时序变化，提示任何共同模式相对于猫间异质性均较小。操作相关分析显示临床干预期间皮质醇短暂升高、操作后下降，支持该指标对短期临床应激源的敏感性。事后亚组分析中，非严重组Tw皮质醇降低而严重组升高，两组在Tw存在显著差异，该发现具有假设生成性质，因分类为回顾性、亚组样本量小且未使用验证的严重程度量表。主要局限包括缺乏未治疗或安慰剂对照、样本量小且临床异质性高、测量不完整、伴随治疗未标准化、救援镇痛及丙泊酚可能的影响、反复操作、住院适应、临床恢复及操作人员熟悉度等。入院24小时内基线评估可能捕获了峰值新奇应激。行为评分受个体差异及观察者判断影响。未来随机对照研究应纳入适当对照、更大样本、标准化伴随治疗及救援镇痛方案、前瞻性定义的疾病严重程度标准、盲法评估及预设重复测量模型，以区分普瑞巴林效应与恢复及适应效应，确定反复给药在住院流浪猫中的临床价值。
研究结论：在本前瞻性、探索性、非对照队列中，住院流浪猫反复口服普瑞巴林期间及之后，疼痛相关面部表情、行为及镇静评分随时间变化，而总体人群中HR、RR及唾液皮质醇浓度未检测到显著时序变化。由于临床恢复、环境适应、反复操作、伴随治疗、救援镇痛及临床操作均可能影响所测结局，这些发现不能确立普瑞巴林的因果效应或临床疗效。事后皮质醇亚组发现应视为假设生成性质。尽管未记录不良事件，样本量与随访时长限制了安全性结论的确定性。需开展更大样本、伴随治疗标准化及前瞻性临床严重程度标准的随机对照研究，以确定普瑞巴林在该人群中的贡献及潜在临床作用。
