丹参酮IIA通过调控EIF4A3的转录激活抑制神经元铁死亡，从而减轻小鼠的抑郁样行为

《Neurochemical Research》：Tanshinone IIA Inhibits Neuronal Ferroptosis to Alleviate Depressive-Like Behavior in Mice via Regulating Transcriptional Activation of EIF4A3

　　摘要丹参酮IIA是丹参中提取的活性成分，已被证明具有抗抑郁样活性。我们研究了丹参酮IIA治疗抑郁症的潜在分子机制。本研究建立了慢性不可预知性轻度应激（CUMS）诱导的小鼠模型和皮质酮（CORT）诱导的HT22细胞模型。抑郁样行为通过蔗糖偏好实验、强迫游泳实验和悬尾实验进行评估。海马神经元损伤通过H&E染色和尼氏染色检测。使用CCK-8检测细胞活力。铁死亡通过丙二醛测定、细胞内Fe2+测定、GSH/GSSH比值、BODIPY-581/591-C11探针和透射电子显微镜进行分析。蛋白质和mRNA表达通过蛋白质印迹法和RT-qPCR测量。分子相互作用通过染色质免疫沉淀、双荧光素酶报告基因检测和RNA免疫沉淀进行验证。此外，使用放线菌素D实验分析mRNA稳定性。丹参酮IIA缓解了CORT损伤的HT22细胞中的铁死亡。丹参酮IIA减轻了CUMS诱导小鼠的海马神经元铁死亡和抑郁行为。转录因子EB（TFEB）的耗竭抵消了丹参酮IIA的抗铁死亡效应。TFEB能够结合真核起始因子4A3（EIF4A3）的启动子，介导其转录激活。TFEB过表达抑制了CORT诱导的铁死亡，而EIF4A3敲低逆转了这一效应。EIF4A3耗竭降低了脑源性神经营养因子（BDNF）的mRNA稳定性，同时导致BDNF表达和核相关因子2（NRF2）核转位减少。CORT诱导的铁死亡以及EIF4A3、BDNF和NRF2的减少被丹参酮IIA逆转，而这些效应在EIF4A3沉默后消失。丹参酮IIA通过增加TFEB改善了CUMS小鼠的神经元铁死亡和抑郁。丹参酮IIA激活TFEB/EIF4A3/BDNF轴以抑制神经元铁死亡，改善抑郁行为。这些发现表明丹参酮IIA是治疗抑郁症的有前景的选择。图形摘要丹参酮IIA是丹参中提取的活性成分，已被证明具有抗抑郁样活性。我们研究了丹参酮IIA治疗抑郁症的潜在分子机制。本研究建立了慢性不可预知性轻度应激（CUMS）诱导的小鼠模型和皮质酮（CORT）诱导的HT22细胞模型。抑郁样行为通过蔗糖偏好实验、强迫游泳实验和悬尾实验进行评估。海马神经元损伤通过H&E染色和尼氏染色检测。使用CCK-8检测细胞活力。铁死亡通过丙二醛测定、细胞内Fe2+测定、GSH/GSSH比值、BODIPY-581/591-C11探针和透射电子显微镜进行分析。蛋白质和mRNA表达通过蛋白质印迹法和RT-qPCR测量。分子相互作用通过染色质免疫沉淀、双荧光素酶报告基因检测和RNA免疫沉淀进行验证。此外，使用放线菌素D实验分析mRNA稳定性。丹参酮IIA缓解了CORT损伤的HT22细胞中的铁死亡。丹参酮IIA减轻了CUMS诱导小鼠的海马神经元铁死亡和抑郁行为。转录因子EB（TFEB）的耗竭抵消了丹参酮IIA的抗铁死亡效应。TFEB能够结合真核起始因子4A3（EIF4A3）的启动子，介导其转录激活。TFEB过表达抑制了CORT诱导的铁死亡，而EIF4A3敲低逆转了这一效应。EIF4A3耗竭降低了脑源性神经营养因子（BDNF）的mRNA稳定性，同时导致BDNF表达和核相关因子2（NRF2）核转位减少。CORT诱导的铁死亡以及EIF4A3、BDNF和NRF2的减少被丹参酮IIA逆转，而这些效应在EIF4A3沉默后消失。丹参酮IIA通过增加TFEB改善了CUMS小鼠的神经元铁死亡和抑郁。丹参酮IIA激活TFEB/EIF4A3/BDNF轴以抑制神经元铁死亡，改善抑郁行为。这些发现表明丹参酮IIA是治疗抑郁症的有前景的选择。