《Neurochemical Research》：Grape Seed Extract Mitigates Acute Stress-Induced Neuroinflammation and Oxidative Damage in Female Mice: Evidence for Gut–Brain Axis Modulation
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短期应激已知可触发氧化和神经炎症反应，并促进重度抑郁障碍（MDD）的发生和进展。酚类化合物如葡萄籽提取物（GSE）因能够调节这些生物学通路而受到关注。本研究旨在评估GSE（20或40 mg/kg，口服途径）是否在暴露于急性束缚应激（ARS）模型的雌性小鼠中发挥
短期应激已知可触发氧化和神经炎症反应，并促进重度抑郁障碍（MDD）的发生和进展。酚类化合物如葡萄籽提取物（GSE）因能够调节这些生物学通路而受到关注。本研究旨在评估GSE（20或40 mg/kg，口服途径）是否在暴露于急性束缚应激（ARS）模型的雌性小鼠中发挥抗抑郁样效应并减轻应激诱导的生化改变。雌性小鼠经GSE预处理后接受ARS。行为学结局采用悬尾实验（TST）和旷场实验（OFT）评估。通过标准生化和分子分析定量血浆皮质酮水平、前额皮质、海马和小肠中活性物质（RS）生成，以及脑和肠组织中炎症介质核因子κB（NF-κB）、白细胞介素-1β（IL-1β）和干扰素-γ（IFN-γ）的信使RNA（mRNA）表达。GSE预处理显著阻止ARS诱导的TST不动时间增加，而不影响OFT中的运动活性。ARS暴露升高皮质酮浓度和中枢及外周组织中的RS生成；这两种效应均被GSE减弱。此外，GSE下调神经和肠道样本中应激诱导的促炎细胞因子表达，表明抑制关键炎症通路。这些发现表明，GSE通过相互关联的氧化还原和细胞因子信号通路发挥抗抑郁样、抗氧化和抗炎作用，如摘要图所总结。重要的是，本研究提供新证据表明GSE沿肠–脑轴发挥作用，减轻皮质酮驱动的氧化和炎症反应。这些结果突出GSE作为预防和管理应激相关神经精神障碍的有前景天然化合物。
研究背景：葡萄（Vitis vinifera）是全球广泛消费的水果，GSE含90%以上多酚，主要为黄烷-3-醇衍生物，如儿茶素和表儿茶素的单体、二聚体、三聚体和寡聚体。MDD是多因素精神疾病，表现为持续低情绪、快感缺失及睡眠、食欲、能量和认知紊乱；其病因涉及神经炎症、氧化应激和神经内分泌失调，损害神经传递和突触可塑性。世界卫生组织（WHO，2025）指出女性MDD患病率几乎为男性两倍，该差异在青春期后出现并持续整个生殖年，提示需研究性别特异机制。应激激活下丘脑–垂体–肾上腺（HPA）轴，导致糖皮质激素过量释放；持续升高引起受体抵抗和负反馈破坏，增加线粒体活性和活性氧（ROS）过度产生，激活小胶质细胞和星形胶质细胞，释放促炎细胞因子，维持神经炎症和氧化失衡。既往Sun显示GSE降低产前应激雌鼠海马氧化应激和神经炎症并减轻抑郁样行为；Jiang显示GSE预处理减轻脂多糖（LPS）小鼠抑郁行为并抑制IL-1β和NF-κB；体外GSE恢复氧化还原平衡并抑制喹啉酸诱导的NLRP3炎症。尽管有这些证据，女性临床前研究代表性不足，GSE在雌性ARS模型中对行为、HPA轴、氧化、炎症及肠–脑轴（gut–brain axis，胃肠道与中枢神经系统间的双向通讯）的作用需明确。本研究评估GSE预处理（20或40 mg/kg口服）在雌性Swiss小鼠ARS模型中的抗抑郁样效应及生化改变，以阐明其调节HPA轴功能障碍并发挥神经保护和抗炎作用的机制。研究人员开展雌性Swiss小鼠ARS模型研究，结论为GSE阻止ARS诱导的不动时间增加，不影响OFT运动，降低皮质酮和RS，下调脑和小肠IL-1β、IFN-γ、NF-κB mRNA，提示GSE具有抗抑郁样、抗氧化、抗炎作用并沿肠–脑轴发挥作用；这为应激相关神经精神障碍的预防和管理提供了候选天然化合物。
关键技术方法：雌性Swiss小鼠（4–6周龄，20–25 g）来源于Federal University of Pelotas（UFPel）中央动物设施；伦理批号CEUA/UFPel 131/2023。随机分6组（每组n=7）：非应激对照、GSE 20 mg/kg per se、GSE 40 mg/kg per se、ARS+溶媒、ARS+GSE 20 mg/kg、ARS+GSE 40 mg/kg。连续7天灌胃GSE或溶媒；第8天4 h ARS；第9天约24 h后行OFT和TST。行为后异氟烷麻醉心脏穿刺采血测血浆皮质酮；取前额皮质、海马和小肠。RS用荧光法检测；qRT-PCR（定量实时逆转录聚合酶链反应）检测NF-κB、IL-1β、IFN-γ mRNA，GAPDH为内参，2
ΔΔCT法归一化，仅20 mg/kg组进行基因表达分析；两因素方差分析（ANOVA）后Tukey事后检验。
研究结果：
（1）GSE减轻ARS诱导的抑郁样行为而不改变运动与探索活动。通过TST和OFT，ARS小鼠TST不动时间显著增加，GSE 20和40 mg/kg显著减弱该增加；GSE per se未增加不动时间，甚至低于非应激对照；OFT未显示不同预处理后 rearing 和 crossings 的改变，支持抗抑郁样效应非一般活动改变。
（2）GSE减轻ARS诱导的皮质酮水平变化。ARS升高血浆皮质酮，GSE两剂量使其正常化；GSE per se无改变。
（3）GSE降低应激小鼠前额皮质、海马和小肠的氧化损伤。ARS增加三组织RS，GSE两剂量显著降低；GSE per se未升高RS，低于非应激对照。
（4）GSE降低应激小鼠前额皮质、海马和小肠中IL-1β、IFN-γ和NF-κB水平。qRT-PCR显示ARS增加三组织IL-1β、IFN-γ、NF-κB mRNA；GSE 20 mg/kg降低或正常化这些标志物。IL-1β前额皮质治疗×ARS交互未达显著，而海马和小肠交互显著；NF-κB前额皮质和海马交互显著，肠道交互未达显著；IFN-γ三区域交互显著。GSE per se在无ARS时未引起IL-1β（脑和小肠）、IFN-γ（所评估结构）及NF-κB（前额皮质和海马）的显著变化。
讨论部分指出，GSE预处理防止TST行为改变且不损害OFT运动，抗抑郁样效应可能与其调节HPA轴、氧化应激和神经炎症有关。GSE降低前额皮质、海马和小肠RS并降低血浆皮质酮，同时下调IFN-γ、IL-1β、NF-κB mRNA。ARS是可靠应激诱导抑郁样模型；GSE降低不动时间与Jiang等一致，GSE非应激小鼠轻度降低不动时间提示内在神经调节；OFT无运动改变支持效应非非特异活动。脑对糖皮质激素波动敏感，短期HPA轴过度激活可破坏神经元稳态，尤其前额皮质和海马回路；GSE降低皮质酮提示HPA轴调节。高皮质酮与脑氧化损伤相关，糖皮质激素受体密度高的海马和前额皮质易损；GSE降低三组织RS，并首次显示其降低前额皮质和小肠氧化应激。氧化应激与神经炎症互相放大，危险相关分子模式（DAMPs）激活固有免疫受体，Toll样受体4（TLR4）/NF-κB上调IL-1β；Rigotti等网络药理学和分子对接显示同一GSE的六种酚类（儿茶素和芦丁为主）与TLR4通路AKT1、MAPK8强相互作用，本研究ARS增加NF-κB和IL-1β而GSE降低，提示TLR4/NF-κB可能机制需验证。ARS上调IFN-γ，GSE降低；中枢IFN-γ促小胶质激活、抑制海马神经发生、诱导抑郁样行为和认知缺陷，并与NF-κB/IL-1β交互放大神经炎症。研究关注上游机制而非下游神经递质，未来需直接神经化学分析。Rigotti等提出GSE可能调节微生物群–肠–脑轴；氧化应激损害肠屏障，促进LPS易位和TLR4激活，放大NF-κB炎症；本研究肠组织分析提供机制线索。未直接评估肠道菌群，但多酚到结肠被菌群代谢为生物活性酚类；GSE有益生元样作用，促进Bifidobacterium、Lactobacillus、Akkermansia、Roseburia，减少Streptococcus、Proteobacteria、Enterococcus；改善肠道氧化还原、紧密连接和黏蛋白表达及微生物代谢。因此肠道氧化和炎症标志物降低与GSE维持肠道稳态、影响肠–脑通讯一致。局限性包括：无微生物群分析；未测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、还原型谷胱甘肽（GSH）；无阳性对照；仅雌性且未监测动情周期；无组织病理；未评估杏仁核；未来需菌群和代谢组研究。研究结论翻译：总之，本研究证明GSE减轻雌性小鼠急性应激诱导的行为、氧化和炎症改变。提取物与HPA轴活性、氧化还原状态及脑和肠组织细胞因子信号变化相关，可能符合潜在全身保护效应。这些发现提示GSE可能影响HPA轴活性及沿肠–脑轴的炎症信号，值得进一步研究其作为应激相关心境障碍补充营养策略的潜力。
