Galápagos群岛Mugil thoburni中Contracaecum overstreeti（线虫纲：异尖科）的高流行率与分子鉴定

《International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife》：High prevalence and molecular identification of Contracaecum overstreeti (Nematoda: Anisakidae) in Mugil thoburni from the Galápagos Islands, Ecuador

　　

专业摘要翻译 本研究首次报道了厄瓜多尔Galápagos群岛海洋鱼类中Contracaecum overstreeti的感染情况。研究人员对来自Santa Cruz岛Puerto Ayora港口的185尾Mugil thoburni（黑尾鲻）进行了剖检，总体感染率为77.8%（144/185），共分离到436条第三期幼虫（L3）。幼虫分布于体腔（34%）、肌肉组织（12.8%）及两者兼有（53.2%）。基于核糖体ITS区（ITS1-5.8S-ITS2）、线粒体细胞色素氧化酶亚基II（cox2）及延伸因子1-α（EF-1α）基因的多位点分子分析证实所有幼虫均为C. overstreeti。系统发育分析将Galápagos标本与先前报道的C. overstreeti序列聚为一支，支持其单系性。2025年样本的cox2单倍型分析揭示低遗传多样性（最大差异<0.5%），提示近期种群扩张或宿主介导的基因流。幼虫在可食用肌肉组织中的检出凸显了食品安全关切，尤其是当地生食“ceviche”及盐渍鱼传统菜肴的消费习惯。尽管C. overstreeti的人兽共患潜势尚未确定，但高流行率及肌肉寄生现象表明需加强监测。本研究强调了“One Health”策略在保护野生动物、渔业资源及公共健康中的重要性，并为未来流行病学调查提供了基线数据。

论文深度解读

一、研究背景与科学问题

异尖科（Anisakidae）线虫是全球水生生态系统中广泛分布的寄生虫，其中Contracaecum属的某些物种已被报道可引起人类感染。在南美洲，已有95种商业捕捞及食用海鱼被报道感染异尖科幼虫，且感染率差异显著。然而，作为联合国教科文组织世界遗产地的Galápagos群岛，其独特海洋生态系统中本地消费鱼类的异尖科感染状况此前完全未知。Mugil thoburni（俗称“lisa rabo negro”）是该群岛常见食用鱼，常被制成生腌“ceviche”或盐渍鱼“fanesca”等传统菜肴，其生食或未充分加工的特性可能增加寄生虫暴露风险。因此，明确该鱼种中异尖科线虫的种类、流行程度及分布，对于评估食品安全风险及制定防控策略至关重要。

二、研究设计与主要发现

研究人员于2024年10月和2025年10月在Santa Cruz岛的Puerto Ayora港口进行横断面采样，从当地渔民处购得185尾新鲜M. thoburni（2024年85尾，2025年100尾）。通过标准化解剖与视觉检查，在144尾鱼中检出436条形态一致的异尖科幼虫，总体感染率达77.8%。幼虫在体腔、肌肉组织及两者兼有的分布比例分别为34%、12.8%和53.2%，其中肌肉组织的检出率在2025年较2024年有所上升（8.6% vs. 16.1%）。鱼体长度（31.0–48.5 cm）和体重（350–1200 g）与感染率及平均感染强度均无统计学显著关联。

三、关键技术方法

1. 1.
   形态学鉴定：依据标准分类学特征（如头端钻孔齿、唇原基、排泄孔、肌食管末端球形胃室、前伸肠盲囊及后伸胃附属器、尾部尖突）将幼虫初步鉴定至Contracaecum属第三期幼虫。
2. 2.
   多位点分子标记：针对核糖体ITS1-5.8S-ITS2区域（908 bp）、线粒体cox2基因（629 bp）及Anisakis simplex特异性EF-1α基因进行PCR扩增与Sanger测序。
3. 3.
   系统发育分析：采用最大似然法（ML）分别基于ITS和cox2数据集构建系统树，以Pseudoterranova ceticola为外群，经1000次自举检验评估节点支持度。
4. 4.
   单倍型网络分析：对2025年cox2序列进行单倍型划分与遗传距离计算。

四、研究结果

3.1 鱼体与幼虫形态鉴定、感染率、感染强度及其与体型体重的关联

• •
  感染率：总体77.8%（2024年74.1%，2025年81.0%），两年间无显著差异。
• •
  感染强度：平均每尾感染鱼含3.12条幼虫（2024年2.03条，2025年3.41条），最高值出现在31–35 cm组（4.75条）。
• •
  体型相关性：鱼体长度与体重各分组间的感染率及平均强度均无统计学显著差异（p > 0.05）。

3.2 分子表征与系统发育分析

• •
  分子鉴定：40尾幼虫的ITS和cox2序列经BLAST比对均确认为C. overstreeti，而EF-1α引物扩增均为阴性，排除了Anisakis属污染。
• •
  系统发育：ITS树显示所有Galápagos序列形成强支持的单系分支（自举值99），与已知C. overstreeti序列（MG515224、PP737161）构成姐妹群；cox2树同样将其嵌套于C. overstreeti进化枝内（参考序列MG495095、OR792399）。
• •
  单倍型多样性：2025年cox2序列检测到4种单倍型（H1–H4），H1为优势单倍型（占5/9个体），最大遗传距离低于0.5%，显示低水平线粒体变异。

五、讨论与结论

讨论要点：

• •
  本研究的感染率（77.8%）高于多数美洲地区报道，但与澳大利亚西南部M. cephalus中Contracaecum spp.的81%感染率及厄瓜多尔大陆太平洋沿岸M. cephalus中C. overstreeti的90%感染率相当，表明该寄生虫在鲻科鱼类中具有高适应性。
• •
  幼虫在肌肉组织中的高比例检出（12.8%纯肌肉，53.2%混合分布）是重要的食品安全隐患，尤其考虑到当地生食“ceviche”的传统——柠檬汁腌制无法灭活异尖科幼虫。
• •
  缺乏感染强度与鱼体大小的正相关性，可能与采样鱼体尺寸范围较窄或感染已达饱和有关。
• •
  cox2低单倍型多样性可能反映近期种群建立事件或由终末宿主（如迁徙性食鱼鸟类）介导的持续基因流。Galápagos群岛丰富的食鱼鸟类（如加拉帕戈斯鹭、熔岩鹭、弱翅鸬鹚、企鹅）和海狮（Zalophus wollebaeki）可能是潜在的终末宿主，但本研究未直接证实。
• •
  C. overstreeti的人兽共患潜势尚未明确，但幼虫在可食用组织中的存在构成了潜在膳食暴露途径。

研究结论：

本研究首次提供了Galápagos群岛M. thoburni中C. overstreeti感染的分子证据，2024年和2025年的高感染率（74.1%和81.0%）揭示了显著的公共卫生关注点。幼虫在可食用肌肉组织中的检出确认了一条潜在膳食暴露路径；然而，C. overstreeti的人兽共患潜势仍待确定。未来应优先开展实验性哺乳动物模型感染评估、加热/冷冻/干燥/盐渍/酸化等加工方法的灭活效果验证，以及终末宿主的寄生虫分子鉴定。从公共卫生角度，这些发现强调需在Galápagos群岛强化预防措施与食品安全监测，包括充分烹饪或冷冻处理、及时去脏、系统性鱼类检疫，以及对渔民、加工者、餐饮从业者和消费者的健康教育干预。