《Frontiers in Cell and Developmental Biology》：Time matters: CB2 receptor, developmental stress sensitivity and affective vulnerability
早期生活经历是成年期情绪障碍（包括抑郁症）易感性的最强预测因素之一。尽管存在这种关联，但支撑这一联系的神经发育机制仍知之甚少。在此背景下，内源性大麻素系统（endocannabinoid system, ECS）——大脑中一种神经调节性脂质信号系统——因其在发育过程中调节应激反应和情绪行为的作用而受到关注。最初，大多数研究聚焦于1型大麻素受体（cannabinoid receptor type 1, CB1r），但近年来，越来越多的研究考察了2型大麻素受体（cannabinoid receptor type 2, CB2r）作为大脑在发育状态中应对环境挑战的潜在关键调节因子的作用。本综述旨在总结当前关于早期生活和青春期不良经历如何影响脑中CB2r的证据，探讨CB2r与这些经历所诱导的神经免疫和行为改变之间的联系，并评估药理学和遗传学研究如何支持CB2r在调节大脑对早期逆境反应中的作用。来自早期生活应激、产前或围产期药物暴露、青春期应激以及娱乐性药物使用的模型证据表明，CB2r表达受发育阶段、脑区和生物性别的动态调控。此外，药理学和遗传学方法已开始提供功能性证据，表明调节CB2r可能影响这些发育损伤的神经免疫和行为后果。尽管仍需进一步研究以充分理解CB2r的复杂作用，但迄今为止的证据提示，该大麻素受体可能参与发育逆境的情感及神经精神后果。
1 引言
大脑成熟由遗传和环境因素调控的动态过程塑造。这一复杂过程始于产前阶段，以强烈的神经发生和细胞分化为特征，但远在出生后延续，涉及出生后早期和青春期关键阶段的回路形成与精修。因此，早期生活和青春期代表了大脑对环境调节特别易感的发展敏感窗口。
在这些关键发育期暴露于不良经历，一直与成年后神经精神疾病（包括焦虑、抑郁及物质使用障碍）易感性增加相关。这种易感性增加与神经内分泌和神经递质系统的长期改变，以及参与情绪调节的脑回路成熟中断有关。重要的是，累积证据表明这些效应可能部分由神经免疫和神经炎症机制介导，这些机制塑造了发育过程中的应激反应性。
近年来，内源性大麻素系统（ECS）在此背景下日益受到关注。越来越多的证据表明，ECS可能参与大脑发育的基本过程，包括神经元分化、轴突导向、突触形成和回路成熟，主要通过1型大麻素受体（CB1r）实现。最近，注意力也转向2型大麻素受体（CB2r），它可能参与大脑对发育挑战的反应。
CB2r广泛表达于整个大脑，从皮层区域到小脑，包括额叶和边缘区域，如海马（HIP）和杏仁核（AMY）。更详细地说，CB2r在多种脑细胞类型中表达，包括神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞，其表达在发育过程中似乎受到动态调控。值得注意的是，CB2r已在神经祖细胞和HIP内的特定神经元群体中被鉴定，以及在人胎儿星形胶质细胞中被发现，支持其在脑发育早期阶段的存在。此外，其表达在青春期前和成年阶段之间存在差异，提示发育调控。
CB2r调节小胶质细胞的增殖、迁移及其功能表型，促进从促炎状态向抗炎状态的转变，并减少炎症介质释放。实验证据进一步支持CB2r在调节应激诱导的神经炎症反应和行为结果中的作用。CB2r的药理学激活可减弱应激诱导的炎症和抑郁样行为，而CB2r的基因敲除则增强神经炎症反应和对应激的脆弱性。此外，CB2r参与神经元增殖和存活的调节，可能通过MAPK-ERK和Akt通路实现。其参与神经免疫信号、炎症反应和突触可塑性，使其在发育逆境触发的神经生物学适应中的潜在贡献日益受到关注。
在过去十年中，越来越多的研究考察了早期生活和青春期的不良经历如何影响CB2r表达。来自早期生活应激（ELS）、产前或围产期药物暴露、青春期应激和娱乐性药物使用的模型证据表明，CB2r表达受发育阶段、脑区和生物性别的动态调控。此外，药理学和遗传学方法已开始提供功能性证据，表明调节CB2r可能影响这些发育损伤的神经免疫和行为后果。
在本综述中，我们总结了关于发育逆境（包括ELS、产前或围产期药物暴露、青春期应激和药物暴露）如何影响大脑发育并导致长期行为改变的当前证据，特别强调CB2r。具体而言，我们整合了关于这些不良经历如何影响CB2r表达的现有发现，考察了将CB2r与神经免疫和行为改变联系起来的可用证据，并强调了检验CB2r对发育逆境情感及神经精神后果功能性贡献的药理学和遗传学研究。
2 早期生活逆境与CB2r
2.1 早期生活逆境的发育易感性
出生后早期的大脑发育是一个动态且精细调控的过程，是神经元回路初步形成和组织的基础。尽管大脑的基本结构在出生时已基本建立，但其成熟广泛延伸到出生后时期，以强烈的神经发生、神经元迁移、轴突生长和导向以及突触连接的建立为特征。这使得早期生活成为高神经可塑性和对环境影响的敏感性的关键窗口。
在产前发育期间，大部分神经发生发生，产生将形成不同脑区的神经元群体。这些神经元随后迁移至最终位置，有助于大脑皮层等结构的层状组织。与此同时，轴突生长和导向建立了脑区之间的初始连接，形成脑回路的基本支架。
出生后，大脑经历强烈的重组阶段。该时期最具特征的过程之一是突触发生，涉及突触连接的大量形成，尤其是在与情绪处理和认知密切相关的脑区，如HIP、AMY和前额叶皮层（PFC）。这种突触连接的初始过度产生支持高可塑性和对环境输入的适应。随后，突触修剪移除较弱的连接，同时加强功能相关的连接。这一过程有助于精修神经元回路，并依赖于活动和经验。
此外，神经元经历关键的结构变化，包括树突生长和棘形成，这对有效的突触通讯至关重要。同时，进行性髓鞘化和神经递质系统（包括谷氨酸能、GABA能、多巴胺能和血清素能信号）的成熟，支持功能性网络建立和兴奋-抑制平衡的适当调节。
重要的是，免疫系统与中枢神经系统之间的相互作用在该时期发挥关键作用。小胶质细胞调节神经发生、突触修剪和神经元回路的成熟，充当局部环境的传感器，并将外部信号转化为神经元回路组织的变化。
总体而言，早期大脑发育可以被概念化为初始神经回路形成与其渐进精修相结合的过程。这种增强的可塑性使环境适应成为可能，但也增加了脆弱性，这解释了不良生活经历（如早期应激）如何能在大脑结构和功能中诱导深远而持久的改变。
ELS不仅与短暂改变相关，还可能在发育过程中主动重编程认知和情绪大脑网络。在此背景下，早期环境信号的质量和可预测性似乎是长期结果的关键决定因素。在哺乳动物（包括人类、啮齿动物和猴子）中，母体输入被认为是发育过程中所经历环境的最重要影响之一。早期生活感觉输入的紊乱或碎片化模式已被提出可诱导慢性应激并干扰情绪调节神经回路的成熟。相应地，大多数ELS动物模型集中于干扰母体互动。在啮齿动物中，母体分离是一种成熟的ELS模型，再现了与人类不良经历相关的母体护理和母幼互动的特定方面。该模型导致情绪反应性的即时和长期改变以及对应激相关障碍的脆弱性增加。这些行为结果伴随神经内分泌改变，包括下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴失调、应激激素水平升高和促炎通路激活。
在神经层面，ELS破坏了参与社会情绪处理的脑回路（特别是皮层-边缘网络，如AMY、HIP和PFC）的成熟和结构完整性。这些改变包括应激敏感脑区体积减少、突触功能受损以及树突结构和棘动力学变化，最终可能损害突触可塑性和认知功能。在此背景下，异常母体护理已被证明可增加应激敏感下丘脑神经元上兴奋性突触的数量和功能，有助于神经内分泌应激系统中枢成分的敏化和对后续应激的脆弱性增加。此外，髓鞘化等发育过程在早期生活中高度动态，特别容易受到环境因素（包括应激）的影响。
越来越多的证据表明，这些长期效应部分由神经免疫机制介导。ELS暴露以区域、年龄和性别依赖的方式改变小胶质细胞数量、形态和功能。例如，产前应激增加了发育中大脑的小胶质细胞密度，这一效应从早期发育阶段到青春期和成年期均有报道，特别是在HIP和PFC等区域。这些变化伴随小胶质细胞形态的转变，早期以阿米巴样为主，出生后和青春期过渡到分支表型，成年期转向更具反应性的特征。
关键的是，ELS已被提出可诱导小胶质细胞功能的长期改变，通常称为小胶质细胞启动，其中这些细胞对后续挑战表现出改变的反应性。这种持续的神经免疫重编程可能导致成年后夸大的炎症反应和回路功能受损，从而增加对应激相关情感障碍的脆弱性。小胶质细胞活化与神经发生和突触可塑性的改变相关，提示ELS、神经免疫失调和情感脆弱性之间的机制联系。
除ELS外，产前和出生后早期暴露于精神活性药物是一种关键的早期逆境形式，可改变大脑成熟。尽管有几个因素影响这些药物的影响，但在这些发育窗口期间的消费通常对大脑结构和功能产生长期影响，包括大脑成熟、结构连接、细胞迁移和神经递质系统的改变。更具体地说，神经发生、神经元迁移和突触修剪等基本细胞过程已被改变。此外，这种暴露损害了皮层和皮层下区域的结构和功能连接。在早期逆境框架内，精神活性药物诱导长期认知和行为缺陷，并与适应性大脑可塑性降低相关，增加了整个童年和青春期对后续环境应激源的脆弱性。
在此背景下，CB2r作为早期生活逆境神经生物学后果的潜在调节因子而受到关注，特别是鉴于其参与神经免疫和炎症过程。
2.2 CB2r参与早期生活逆境诱导脆弱性的证据
暴露于早期生活不良经历已被证明可影响CB2r表达和功能，并与神经免疫过程、突触可塑性和情绪行为的长期改变相关。现有证据表明，ELS以脑区、性别和发育阶段依赖的方式动态调节CB2r。这些改变并非代表对早期逆境的短暂反应，而是贯穿发育持续存在，并与应激相关行为异常的出现相关。
ELS实验模型表明，CB2r表达从发育最早阶段起即被动态重塑。母体剥夺后不久，HIP中检测到CB2r免疫反应性增加，表明CB2r改变在早期不良经历后迅速出现。ELS并非诱导受体表达的均匀增加或减少，而是根据发育阶段、生物性别和脑区重塑CB2r表达。相应地，母体分离在青春期早期增加了PFC中小清蛋白阳性中间神经元的CB2r表达，而受体表达在青春期后期下降，与抑郁样行为和情绪缺陷的出现相吻合。同样，母体剥夺在青春期诱导了CB2r蛋白表达的性别依赖性变化，雌性海马和前额叶水平增加，但雄性表达减少，并伴随抑郁样和精神分裂样表型。这些改变似乎延伸到成年期，因为在有限垫料筑巢条件下，成年雌性内侧前额叶皮层（mPFC）中也报道了Cnr2表达增加，并伴随性别依赖性行为改变。总体而言，这些发现表明ELS诱导了与情绪和行为功能障碍相关的长期且情境依赖的CB2r重塑。
虽然描述性研究表明ELS在发育过程中改变CB2r表达，但功能性方法已开始阐明这些改变是否积极参与早期逆境的行为后果。现有证据表明，CB2r激活可能减弱早期逆境诱导的神经免疫改变，特别是通过调节小胶质细胞炎症反应。母体分离降低了皮层小胶质细胞中MARCH7表达，同时促进NLRP3炎症小体激活和IL-1β信号传导，导致与抑郁样行为相关的持续促炎状态。CB2r激动剂HU-308的药理学激活部分恢复了MARCH7表达，减弱了炎症小体激活，并减少了神经炎症信号。此外，HU-308处理和通过慢病毒递送在 prelimbic 皮层中过表达CB2r均阻止了青春期快感缺乏和抑郁样行为的发展。总之，这些发现提供了功能性证据，表明增强CB2r信号可减弱ELS的长期神经免疫和行为后果，从而促进对早期生活逆境长期后果的韧性。
除ELS外，现有证据表明产前或围产期药物暴露诱导了CB2r改变。围产期暴露于屈大麻酚诱导了长期情绪和认知改变，以及HIP和AMY中Cnr2表达和ECS其他成分的变化。同样，围产期酒精暴露（PAE）增加了雄性和雌性后代的海马Cnr2表达，并伴随持续的情绪和认知改变。有趣的是，早期和慢性大麻二酚（CBD）治疗减弱了其中几种行为改变，并在雄性中部分正常化了Cnr2表达，而这一效应在雌性中未观察到。此外，PAE增加了伏隔核中的Cnr2表达，特别是在雄性中。这些变化与肠道微生物群组成和行为结果的改变相关，进一步表明PAE后的CB2r相关适应可能发生在更广泛的肠-脑和行为改变中。
总体而言，现有证据表明，早期发育期间的环境挑战可导致CB2r的长期且情境依赖的改变，在发育阶段、性别和脑区方面存在显著差异，这些改变与情绪和行为问题相关。
3 青春期逆境与CB2r
3.1 青春期逆境期间的发育易感性
青春期大约从10-11岁延伸到18岁，以涉及预先存在的神经元回路精修和成熟的显著神经发育变化为标志。在此期间，大脑发育主要由突触修剪和髓鞘化驱动，强化和优化大脑神经元网络，特别是在额叶-纹状体和皮层-边缘回路中。
突触修剪在青春期尤为突出，特别是在支持高阶认知功能的区域（如PFC），其中大量兴奋性突触被消除。这一过程改善了大脑功能和效率，并有助于大脑连接向成年期典型模式的重组，从而影响生命后期的神经元可塑性。与此同时，增加的髓鞘化提高了处理速度和神经元传递的可靠性，进一步支持跨脑区的功能整合。
这些结构变化伴随着参与情绪和认知调节的关键大脑系统的成熟。PFC在整个青春期持续发育，在执行功能、视角转换、目标导向行为和冲动行为控制中发挥关键作用。因此，该脑区在青春期的适当成熟对于发展支持更复杂行为结果的信息处理通路至关重要，包括目标导向的认知过程和思想与行动的同步化。PFC是大脑最后一个髓鞘化的区域，这一过程至关重要，因为在青少年中它导致假设、推理、逻辑思维、社交、权衡风险和回报以及调节情绪的能力发展。
另一个值得强调的系统是边缘系统，它由一组相互关联的皮层和皮层下结构组成，将内脏状态和情绪与认知和行为联系起来。AMY和HIP等边缘区域比皮层区域成熟更早，但保持高度反应性，有助于增强情绪敏感性和寻求奖励行为。在青春期，感觉和新奇经历由边缘系统区域处理，促进其成熟，并可能导致持续到青春期之后的显著变化，强调了这一发展阶段的重要性。这些系统之间的不平衡已被提出是青少年特征行为（包括冲动性和冒险行为增加）的基础。
在青春期，大脑成熟以神经递质系统的显著变化为标志，包括多巴胺能和谷氨酸能信号。这些系统以不同速率成熟，并在成熟认知模式的发展中发挥关键作用。中脑边缘-中脑皮层多巴胺系统成熟的变异和下行皮层谷氨酸能神经支配的较慢生长可能导致青春期冒险行为和物质滥用增加。
总体而言，青春期是一个增强神经可塑性的关键时期，在此期间神经元回路的持续精修使复杂认知和情绪功能的发展成为可能。这种动态重组受环境因素影响，使这一发育窗口对外部影响特别敏感，这些影响影响行为和精神病症的发生。
在此背景下，青春期暴露于应激可深刻影响脑回路的发展和功能，导致持续到成年期的行为问题。在人类中，青春期精神疾病最重要的触发因素之一是社交应激，包括同伴相关的逆境，如欺凌。遭受同伴的身体或心理伤害负面影响心理和身体健康，并与青春期及以后生活中抑郁症状风险增加持续相关。此外，证据表明青春期暴露于应激源增加了精神分裂症和神经质发展的风险。
此外，累积应激源（如家庭冲突、学业困难和社会不稳定）进一步导致情绪调节和行为结果的长期改变。有趣的是，青春期后期的累积应激与年轻成年男性mPFC奖励反应减弱相关，这与问题性酒精使用的脆弱性增加有关。
在生物学层面，青春期慢性暴露于应激生活事件改变了HPA反应性，促进应激激素的持续释放和外周免疫激活。这反过来促进免疫细胞的募集和促炎细胞因子的释放，可影响大脑功能并导致神经炎症。重要的是，小胶质细胞激活和血脑屏障完整性改变已被提出是介导外周免疫信号对大脑影响的关键机制，特别是在参与情绪调节的区域。
这些神经生物学改变与额叶-边缘连接成熟中断、情绪反应自上而下控制受损以及行为反应性增加相关。此外，青春期应激暴露与奖励处理的长期改变以及对物质使用和情感障碍的脆弱性增加有关。同样，青春期消费精神活性药物也破坏了突触重组和脑回路的成熟。一个特别脆弱的区域是PFC，它在此发育期间经历广泛的髓鞘化和突触修剪。由于与奖励和情绪调节相关的皮层下区域（如纹状体和AMY）比执行和认知控制机制成熟更晚，精神活性药物加剧了这种发育不平衡。此外，多巴胺能和应激反应系统的改变与冲动性和感觉寻求增加以及认知和情绪改变（包括严重焦虑和抑郁症状）相关，增加了成年期发展精神疾病和成瘾行为的风险。
在认知层面，青春期应激暴露也影响信息处理和情绪反应性。急性应激已被证明可增强自我参照处理，特别是在抑郁症状脆弱性增加的个体中，可能强化负面认知偏差。相比之下，应激暴露后的积极反馈可激活与奖励、动机和注意力相关的神经回路，支持适应性学习和韧性。这些发现强调青春期应激的影响不是统一的，而是取决于个体易感性和环境输入的性质。
重要的是，青春期应激的影响受性别、年龄和应激源类型等因素调节，突显了这一发育窗口的复杂性。应激暴露与行为特征（如易激惹）之间的双向相互作用进一步支持青春期代表一个敏感时期的观点，在此期间环境挑战可塑造长期情绪和认知结果。
ECS已成为大脑发育以及生命各阶段应激和焦虑调节的关键调节因子。在青春期，ECS的变化与脑区（特别是皮层-边缘回路内）的精修和成熟并行发生。ECS的核心功能之一是调节兴奋/抑制平衡，有助于稳定神经网络活动并协调PFC、AMY和HIP等脑区之间的通讯。通过这些机制，ECS似乎支持参与情绪调节的回路的功能整合。
有趣的是，青春期应激暴露已被证明可改变ECS信号，这反过来可能导致回路功能和行为结果的破坏，突显ECS作为该发育阶段应激效应介导者的作用。尽管大多数证据来自CB1r，但额外研究表明CB2r也可能参与这些过程，特别是通过其与神经免疫通路的关联。有趣的是，青春期药物暴露也改变了ECS，包括CB2r，它充当内源性大麻素和神经免疫系统之间的关键桥梁。
3.2 CB2r参与青春期逆境诱导脆弱性的证据
尽管研究远少于ELS，但越来越多的证据表明CB2r对青春期的环境挑战也敏感。在这一关键发育窗口暴露于应激源和娱乐性药物与参与情绪和奖励相关行为的脑区中CB2r表达的长期改变相关。
特别是，青春期应激似乎以脑区、性别和范式依赖的方式改变CB2r表达。重复尾部电击应激降低了雄性和雌性青春期大鼠PFC中的CB2r蛋白表达，而雌性在多个皮层边缘区域表现出更高的基础Cnr2基因表达，突显了该发育期CB2r调节中的性别依赖性差异。相比之下，急性和重复束缚应激均增加了杏仁核Cnr2表达，并在成年期诱导了持续的焦虑样行为。在急性应激范式中，这些变化伴随血浆皮质酮升高、循环2-AG水平增加和谷氨酸能信号改变，而重复束缚应激诱导了ECS相关基因的更广泛变化，以及谷氨酸能和CRH信号改变。额外证据表明，青春期应激也改变了CB2r对后续环境损伤的反应。在重复束缚应激与间歇性酒精暴露相结合的模型中，先前应激阻止了酒精诱导的海马Cnr2表达降低，以及其他ECS和谷氨酸相关基因的变化，部分恢复了海马分子稳态并减弱了长期记忆缺陷。
同样，青春期暴露于娱乐性药物也与CB2r表达改变相关。可卡因和酒精消费分别降低了PFC和HIP中的CB2r蛋白水平。有趣的是，这些变化的方向据报道取决于实验范式，因为青春期后期的慢性酒精消费增加了PFC中的CB2r表达。值得注意的是，这些改变伴随神经免疫变化。青春期后期的慢性酒精消费增加了PFC中NLRP3炎症小体激活，并促进小胶质细胞激活和较少分支的形态，这些变化与焦虑样行为增加相关。同样，青春期间歇性酒精消费诱导了认知缺陷，伴随小胶质细胞激活和HIP中促炎神经免疫特征的转变。此外，青春期暴露于JWH-018（合成药物Spice/K2的主要化合物）诱导了感觉运动门控的持续缺陷和焦虑样行为的性别依赖性改变，伴随PFC中CB2r表达降低、PFC中小胶质细胞和星形胶质细胞激活以及GAD67表达降低。
CB2r的药理学操作进一步支持其参与青春期药物相关行为和神经生物学过程。在这方面，选择性CB2r激动剂AM1241已被证明可预防酒精诱导的PFC神经炎症变化和戒断期间的焦虑样行为。此外，青春期直接药理学调节CB2r已被证明可产生奖励相关学习的长期改变。青春期施用CB2r拮抗剂/反向激动剂SR144528损害了成年期巴甫洛夫条件反应的获得，而不影响工具性条件作用。这些发现表明青春期CB2r活性有助于奖励相关行为特定方面的发展。总之，这些药理学研究提供了证据，表明CB2r有助于青春期环境损伤的长期行为后果，支持该受体作为旨在减轻应激和药物诱导后果的干预措施的潜在靶点。
总之，这些研究表明青春期不良经历与CB2r改变相关，这些改变似乎因暴露性质、脑区、性别和发育期内的时机而异。这些变化伴随情绪、认知和神经免疫改变。重要的是，尽管有限，药理学证据表明该受体在塑造青春期不良经历脆弱性方面的有前景作用。
4 当前空白、未来展望与结论
现有证据表明CB2r可能参与早期发育不良经历的行为和分子后果。当前研究报告了出生后生活和青春期早期暴露于应激源后皮层边缘脑区CB2r表达的改变。这种变化在发育过程中是动态的，并似乎取决于性别和分析的脑区。此外，迄今为止进行的少数药理学研究也表明CB2r至少在部分程度上参与早期生活和青春期应激的行为和分子后果。现有证据表明，激活CB2r可减轻与早期逆境相关的神经免疫变化，主要通过调节小胶质细胞炎症反应实现。
尽管有这些有前景的发现，证据仍然有限。实验模型之间的异质性，包括应激源性质、持续时间和强度的差异，以及评估的发育阶段和脑区的差异，使得研究之间的比较困难，并阻碍了建立一致结论的可能性。为解决这种异质性，一种有用的方法是在相同或密切可比的设计中系统比较关键实验变量。例如，不同的ELS范式（如母体分离/剥夺和有限垫料筑巢）应在等效发育阶段进行比较，以确定CB2r是否取决于不良经历的性质和特征。由于皮层边缘脑区与情绪反应密切相关，需要并行评估这些脑区（特别是PFC、HIP和AMY），以理解CB2r改变的区域特异性。此外，评估的行为特征（包括情感和认知结果）的更大一致性将进一步促进研究间的比较。此外，未来在同一范式后多个时间点评估CB2r的纵向研究对于表征其从早期生活到青春期和成年期的动态适应，以及区分短暂与持续改变至关重要。
确定CB2r改变是发生在神经元、小胶质细胞和/或星形胶质细胞中将是理解其在发育逆境后果中作用的关键。组织水平的CB2r表达变化不提供关于这些适应发生的特定细胞群体的信息。这种区分对于更精确地理解CB2r在特定细胞群体中的作用可能特别相关。例如，细胞特异性方法（如小胶质细胞特异性条件性CB2r敲除模型）可提供对此方面的进一步见解。
生物性别也可能影响发育逆境诱导的CB2r变化。然而，相对较少的研究在相同实验条件下直接比较了雄性和雌性。因此，当前证据不足以识别一致的性别依赖性模式，突显了未来专门设计以解决这一问题的研究的必要性。应在相同实验条件下评估两种性别，以确定CB2r变化是否具有性别依赖性。
重要的是，Cnr2或CB2r蛋白表达的变化不一定反映受体活性或下游信号的变化。因此，进一步的功能研究（例如使用诱导性条件敲除模型）可帮助确定CB2r是否有助于发育逆境的行为和神经生物学后果或减弱这些效应。同样，在HIP等脑区进行局部药理学操作或CB2r靶向敲低方法（如siRNA介导的CB2r敲低或CB2r靶向反义寡核苷酸）可帮助建立CB2r的区域特异性贡献。此外，现有发现表明与早期生活和青春期不良经历相关的行为、分子和脑改变并不仅仅依赖于CB2r。相反，这里综述的改变可能发生在更广泛的ECS适应中，而非代表仅由CB2r介导的反应。因此，需要进一步的功能研究来确定CB2r的具体贡献及其与ECS其他成分以及参与应激相关脆弱性的分子系统的相互作用。
正如本综述所强调的，只有有限数量的研究使用药理学方法评估了CB2r的功能作用。尽管如此，这些研究提供了CB2r激动减弱行为和神经生物学改变的证据，特别是涉及神经免疫机制的那些。CB2r调节的时机也是未来研究的重要问题。由于大多数药理学研究考察了早期生活和青春期逆境暴露期间或之后不久CB2r调节的效果，未来研究应评估CB2r激动剂（如HU-308或AM1241）在不同时间点施用的效果，包括逆境后果可能已经建立的后期阶段。此类研究将有助于确定CB2r激活是否可调节短期改变和青春期后期或年轻成年期出现的持续后果，并有助于定义CB2r调节的治疗窗口。
将这些发现转化为人类将需要关于CB2r功能和治疗相关性的实质性更多证据。初步转化方法可以是调查暴露于早期生活逆境的儿童或青少年的外周免疫细胞中是否也可检测到CB2r相关改变。例如，淋巴细胞中CNR2表达可作为一种微创测量进行探索，并与临床结果或干预反应（如认知行为疗法）纵向关联。因此，未来的临床和转化研究对于确定实验模型中观察到的CB2r发育改变是否也存在于人类中，以及建立其与应激相关精神疾病的相关性是必要的。另一个转化限制是人类和临床前CB2r文献中考察的逆境类型并不直接等效。虽然人类研究经常关注青春期的社会逆境（包括欺凌和负面同伴关系），但研究CB2r的临床前研究主要使用不可逃避尾部电击或急性/重复束缚应激以及药物暴露等范式。因此，CB2r相关适应是否也响应不良社会经历而发生仍 largely 未被探索。未来使用捕捉青春期社会逆境特定成分的临床前模型的研究可帮助弥合这一转化差距。
总体而言，敏感发育窗口期间的逆境与CB2r的持续和动态改变相关，这些改变似乎根据发育阶段、生物性别和脑区而变化。这些变化伴随情感、行为和神经免疫改变，而现有药理学和遗传学证据表明CB2r可能参与发育逆境的行为和神经生物学后果。进一步整合药理学和遗传学方法的研究将需要建立这些改变的功能相关性，并确定发育时机、生物性别、脑区和细胞群体等因素如何影响CB2r对发育逆境的反应。解决这些问题对于确定CB2r调节是否具有治疗相关性至关重要。
