《Analytical Cellular Pathology》：Momordica charantia Attenuates Hepatic Steatosis in High-Fat, High-Sucrose Diet-Induced Obese Mice
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高脂高蔗糖（HFHS）饮食摄入是肥胖及肝脏相关代谢紊乱的重要诱发因素。源自传统攀缘植物的苦瓜（Momordica charantia）乙醇提取物粉（MC）已被证实具有多种生物活性，包括抗糖尿病、抗氧化和抗炎活性。基于上述特性，本研究探讨了MC对HFHS饮食喂养
高脂高蔗糖（HFHS）饮食摄入是肥胖及肝脏相关代谢紊乱的重要诱发因素。源自传统攀缘植物的苦瓜（Momordica charantia）乙醇提取物粉（MC）已被证实具有多种生物活性，包括抗糖尿病、抗氧化和抗炎活性。基于上述特性，本研究探讨了MC对HFHS饮食喂养小鼠肝脏脂质代谢及肥胖相关参数的潜在影响。雄性C57BL/6J小鼠（6周龄）经HFHS饮食喂养4周后分为四个饮食组，分别继续接受HFHS、Cissus quadrangularis（CQ；阳性对照）、MC 125（125 mg/kg）或MC 250（250 mg/kg）干预12周。与HFHS组相比，MC补充与较低体重增加、肝脏脂质蓄积及附睾脂肪细胞尺寸相关。组织学结果与脂肪组织中的上述变化一致。在分子水平上，MC补充与肝脏脂质代谢相关基因表达改变相关，包括脂肪生成相关基因甾醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、脂肪酸合酶（FAS）和硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）表达降低，以及CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达改变。此外，MC补充组中纤维化相关基因I型胶原α1（Col1α1）和α-平滑肌肌动蛋白（αSMA）表达降低。上述发现提示，MC补充可能调节HFHS饮食喂养小鼠肝脏脂质代谢及纤维化相关基因表达。总体而言，本研究结果提示，MC可能影响与长期HFHS饮食相关的代谢反应。
一、研究背景与问题。肥胖和超重是全球健康挑战，是糖尿病等慢性进展性疾病的重要诱因，并受饮食模式和体力活动等生活方式因素影响。高热量、高脂和高果糖饮食导致代谢失衡，果糖摄入增加可降低饱腹感、刺激摄食并改变脂质和碳水化合物代谢，促进脂肪合成。过量能量主要储存于脂肪组织，但当脂肪组织缓冲能力被超过时，脂质可异位蓄积于肝脏等器官并造成功能障碍。现有体重和肥胖管理包括健康饮食、运动、生活方式干预、膳食补充剂和药物干预，但补充剂 indiscriminate 使用可能带来毒性反应或药物相互作用，因此植物提取物来源的功能食品受到关注。苦瓜（Momordica charantia）为葫芦科攀缘藤本植物，传统用于糖尿病防治，并报道具有免疫调节、抗糖尿病、抗病毒、抗菌、抗氧化、抗溃疡和抗炎等作用；近期研究关注其胰岛素相关反应、胰腺β细胞功能、血脑屏障和炎症因子等。然而，既有研究多聚焦神经保护、抗炎或胰岛素调节、肥胖和糖尿病，针对肝脏健康尤其是肝脏脂肪蓄积的研究相对不足。因此，研究人员在本研究中将未成熟苦瓜乙醇提取物粉称为MC，并在体内评价其对肥胖相关参数、肝脏脂质蓄积和脂肪细胞形态的影响，旨在考察HFHS饮食条件下MC对脂质代谢相关参数的作用，为其作为功能食品原料的潜在应用提供实验证据。
二、研究开展、结论与意义。研究人员采用6周龄雄性C57BL/6J小鼠，先以HFHS饮食4周诱导肥胖，随后分为继续HFHS、CQ阳性对照、MC 125 mg/kg和MC 250 mg/kg组，再干预12周，并以正常饮食（NC）组作参照。与HFHS组相比，MC补充与较低体重增加、肝脏脂质蓄积和附睾脂肪细胞尺寸相关，组织学发现与脂肪组织变化一致；分子水平上，MC补充与肝脏脂质代谢相关基因表达改变相关，包括SREBP-1c、ACC、FAS和SCD1表达降低，C/EBPα和PPARγ表达改变，以及Col1α1和αSMA表达降低。作者总结认为，MC补充可能调节HFHS饮食喂养小鼠肝脏脂质代谢和纤维化相关基因表达，并可能影响慢性HFHS饮食相关的代谢反应；这些发现提示MC作为管理肥胖相关代谢改变的功能食品原料具有潜在价值，但后续仍需控制能量摄入并进一步确证活性成分和作用机制。
三、关键技术方法。研究使用6周龄雄性C57BL/6J小鼠（购自RAONBIO Co., Ltd.），经HFHS饮食4周诱导肥胖后分为NC、HFHS、HFHS+CQ 60 mg/kg、HFHS+MC 125 mg/kg和HFHS+MC 250 mg/kg组，干预12周；MC为单批次未成熟苦瓜70%乙醇提取物粉（KolmarBNH Co., Ltd.提供，标准化含GABA 1.08 mg/g）。采用qRT-PCR检测肝脏和脂肪组织基因表达，H&E染色评估附睾脂肪细胞面积（μm
2），免疫组织化学（IHC）检测肝脏PPARγ、C/EBPα及脂肪组织PPARγ，统计采用one-way ANOVA/Tukey及重复测量two-way ANOVA/Dunnett检验。
四、研究结果。1. 体重、摄食与摄水。通过每周体重、食物和水摄入测量及统计比较发现，12周干预后HFHS组体重较NC组显著增加；MC补充组体重增加数值上低于HFHS组，MC 125和MC 250分别降低1.76%和3.33%，但差异无统计学意义；MC组食物和水摄入低于HFHS对照，MC 250食物摄入降低44.27%、水摄入降低28.89%，其食物效率比与HFHS组相当。作者提示解释MC 250较低体重时应考虑摄食差异，并需在能量摄入匹配条件下进一步明确非摄食依赖效应。2. 肝脏脂肪生成相关基因。通过qRT-PCR发现，HFHS组SREBP-1c表达约为NC组2倍；MC 125和MC 250组SREBP-1c较HFHS组分别降低46.66%和59.10%，FAS降低67.95%和75.15%且降幅大于CQ组，ACC降低51.48%和65.17%，SCD1降低82.78%和89.32%；结论为MC补充与肝脏脂肪生成相关基因表达降低相关。3. C/EBPα和PPARγ。通过qRT-PCR发现，HFHS组C/EBPα表达较NC组高约34%；MC 125和MC 250组C/EBPα分别降低77.07%和66.91%，PPARγ分别降低63.66%和55%，与CQ组降幅相近；结论为MC补充与脂质储存相关转录因子表达降低一致，肝细胞PPARγ在脂肪变性状态可被诱导。4. 纤维化相关基因。通过qRT-PCR发现，HFHS组Col1α1和αSMA表达较NC组高约72%；MC 125和MC 250组Col1α1分别降低47.58%和44.09%，αSMA分别降低45.22%和60.98%；结论为MC补充与纤维化相关基因表达改变相关，但作者指出仅凭转录本不足以确立抗纤维化作用，仍需组织学和蛋白水平验证。5. 附睾脂肪组织形态。通过H&E染色和ImageJ定量发现，NC组脂肪细胞较小且排列紧密，HFHS组脂肪细胞增大，MC组平均脂肪细胞面积低于HFHS组，MC 250降幅大于MC 125；结论为MC补充与脂肪组织形态改变相关，脂肪细胞增大反映脂质沉积与脂解失衡，脂肪储存能力饱和可促进异位脂质沉积。6. 脂肪组织SREBP-1c和PPARγ。通过qRT-PCR发现，与HFHS组相比，MC 125和MC 250组脂肪组织PPARγ表达分别降低53.85%和45.46%，SREBP-1c表达分别降低63.06%和56.41%；原文并报告HFHS组较NC组约增加68.25%；结论为MC补充与脂肪组织脂肪生成和脂质代谢相关转录调控改变相关，并与脂肪细胞大小变化一致。7. 免疫组化验证。通过IHC检测肝脏PPARγ、C/EBPα及脂肪组织PPARγ发现，DAB染色强度虽有轻微差异，但未见与RT-qPCR结果一致的分组依赖变化，脂肪组织PPARγ免疫染色亦无明显组间差异；结论为定性IHC敏感性及背景染色可能限制其区分细微蛋白表达差异，仍需定量蛋白水平分析验证。
五、讨论与结论。讨论部分指出，MC补充伴随能量摄入降低，尤其在高剂量组，因此观察到的分子和表型变化应结合摄食影响解释；GABA仅作为质量控制和提取物标准化的标志化合物，不能据此认定GABA是唯一活性成分；苦瓜含三萜类、charantin、酚类化合物和黄酮类等多种植物化学物，可能贡献其报道的生物活性，但当前数据不能将观察到的变化归因于特定成分。总体而言，MC补充与HFHS喂养小鼠体重及脂质代谢相关基因表达改变相关，后续需在控制能量摄入的随访研究中确认，并进一步表征活性成分及潜在机制。研究结论翻译：肝脏中脂肪的异常蓄积促进肥胖并增加代谢并发症风险，而高脂和高果糖饮食摄入增加会加剧这一状况。肝脏脂肪蓄积可通过多种机制实现，包括脂质排泄延迟、脂质摄入增加、脂质合成增加或脂肪氧化减少。为应对上述问题，本研究在HFHS饮食条件下考察了MC对肥胖相关参数和肝脏脂质代谢的影响，尤其关注脂质代谢及纤维化相关基因表达。总体而言，研究结果显示，在HFHS喂养小鼠中，MC补充与较低体重增加以及关键脂肪生成转录因子和基因（SREBP-1c、C/EBPα、PPARγ、ACC、FAS和SCD1）及纤维化相关基因（Col1α1和αSMA）表达改变相关。在HFHS饮食诱导肥胖模型中，MC补充与较低肝脏脂质蓄积和脂肪细胞尺寸以及脂质代谢相关基因改变相关。上述发现提示，MC可能调节HFHS饮食条件下的脂质代谢相关反应。鉴于与代谢紊乱相关的高脂高糖饮食模式日益普遍，上述发现突出MC作为功能食品原料用于管理肥胖相关代谢改变的潜力。
