基于SH-HA-g-CS水凝胶的ASC分泌组缓释平台在骨关节炎无细胞治疗中的体外评估

《Scientific Reports》：Stem cell secretome-enriched hydrogels as a potential therapeutic approach for osteoarthritis

　　骨关节炎（OA）是一种慢性退行性关节疾病，以进行性软骨丢失和滑膜炎症为特征，目前的治疗方法主要是对症治疗，无法持久改变疾病进程。透明质酸（HA）和硫酸软骨素（CS）广泛用于黏度补充治疗，但HA的快速清除和简单混合物的有限生物活性限制了其长期疗效。与此同时，脂肪来源间充质基质细胞（ASC）分泌组因其多效性抗炎和再生作用，已成为一种有前景的无细胞疗法。在此，我们评估了一种可注射的SH-HA-g-CS水凝胶作为ASC来源分泌组的缓释平台，并在体外OA模型中比较了其与相应可溶性制剂的生物学性能。通过纳米颗粒跟踪分析（NTA）和LC-MS/MS蛋白质组学对ASC来源条件培养基（分泌组）进行了表征。在基础条件和TNF/IFN-γ诱导的炎症条件下，用可溶性HA、CS、HA+CS、ASC来源分泌组、SH-HA-g-CS水凝胶或负载分泌组的SH-HA-g-CS水凝胶（水凝胶：分泌组=2:1，v/v）处理人软骨细胞。随后评估了细胞代谢活性、伤口愈合、基因表达和多重蛋白质组学谱。在炎症模型中，可溶性HA+CS和ASC来源分泌组保持了代谢活性，促进了伤口愈合，并降低了IL1A和IL6基因表达，其中分泌组对两种细胞因子的表达水平最低。多重蛋白质组学分析显示，HA+CS和ASC来源分泌组与多种促炎介质的较低水平相关，而在第14天，负载分泌组的SH-HA-g-CS水凝胶相比未负载水凝胶显示出多种促炎介质的更低恢复水平。负载ASC来源分泌组的SH-HA-g-CS水凝胶显示出提供持续免疫调节作用并保持良好细胞相容性的潜力，支持其作为骨关节炎无细胞治疗策略的进一步开发。需要进一步进行体内研究以确认其治疗功效和转化潜力。