核BCL10的易位会加速淋巴瘤的进展，并导致外周T细胞淋巴瘤的预后较差

《European Journal of Pharmacology》：Nuclear BCL10 translocation contributes to lymphoma progression and poor prognosis of peripheral T-cell lymphomas

　　

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  BCL10的下调抑制了PTCL细胞的增殖和肿瘤生长，增加了细胞凋亡，并增强了化疗效果。
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  核BCL10的表达与phospho-AKT、核BCL3和NF-κB的表达显著相关，并且PTCL患者的总体生存率更差。
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  同时具有核BCL10表达和RHOA突变的PTCL患者的生存率明显低于没有这两种表达或突变的患者。

引言

外周T细胞淋巴瘤（PTCL）起源于成熟的T细胞，是一种罕见且异质性强的淋巴系统恶性肿瘤。根据北美中央癌症登记处的数据，2011-2012年美国外周T细胞/自然杀伤（NK）细胞淋巴瘤的年发病率为每10万人中有1.8例（Teras等人，2016年）。2016年，PTCL占所有成熟非霍奇金淋巴瘤的4%，最常见的亚型是未特指的PTCL（PTCL-NOS）、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤（AITL）和间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）（Teras等人，2016年）。Vose等人报告称，间变性淋巴瘤激酶（ALK）阳性的ALCL患者的5年总生存率为70%，而ALK阴性ALCL、AITL和PTCL-NOS患者的5年生存率分别为49%、32%和32%（Vose等人，2008年）。在台湾，NK/T细胞淋巴瘤的年发病率为每10万人中有1.0例以上，PTCL-NOS、AITL和ALCL是最常见的亚型（Chuang等人，2017年；Ko等人，2018年）。尽管采用了新开发的药物，但大多数PTCL患者的生存率仍然较低（Al-Hamadani等人，2015年），因此探索这些淋巴瘤亚型的预后因素并研究新的治疗方法是必要的。

国际预后指数（IPI）根据患者的年龄、淋巴瘤阶段、东部协作肿瘤学组（ECOG）性能状态、血清乳酸脱氢酶（LDH）水平以及结外病变部位来计算评分（国际非霍奇金淋巴瘤预后因素项目，1993年；Gisselbrecht等人，1998年）。该评分系统可以预测包括T细胞亚型在内的侵袭性淋巴瘤患者的长期生存情况（国际非霍奇金淋巴瘤预后因素项目，1993年；Gisselbrecht等人，1998年）。与非蒽环类药物方案相比，包含蒽环类药物（如环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松）的一线方案能改善PTCL患者的无进展生存期（PFS）和总生存期（Briski等人，2014年）。对于ALK阳性的ALCL患者，依托泊苷和CHOP的一线联合化疗方案尤其能改善他们的PFS和OS，尤其是在60-65岁之间的患者中（Schmitz等人，2010年；Cederleuf等人，2017年）。

核因子-κB（NF-κB）是一类可诱导的转录因子，在免疫细胞的激活和存活中起作用（Hayden MS和Ghosh S，2008年）。在PTCL中，NF-κB的激活是一个关键的致病因素，它促进细胞增殖、抑制细胞凋亡并诱导耐药性（Odqvist等人，2013年；Wang等人，2017年）。B细胞慢性淋巴细胞性白血病蛋白10（BCL10）源自黏膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤，位于B细胞或T细胞的细胞质中，与含有caspase招募结构域的MAGUK蛋白1（CARMA1，也称为CARD11）和MALT1相互作用，从而传递来自B细胞或T细胞受体（TCR）介导的信号，并进一步触发NF-κB的激活（David等人，2018年；Lork等人，2019年；Cheng等人，2020年）。

我们之前的研究表明，在乳腺癌细胞和弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞中，TNF-α或B细胞活化因子（BAFF）的激活会导致AKT磷酸化，而这种激活的AKT会在Ser²¹⁸和Ser²³¹位点磷酸化BCL10。随后，磷酸化的BCL10从MALT1解离并与含有核定位信号的BCL3结合，之后BCL10-BCL3复合物转运到细胞核中，激活NF-κB的转录活性（Yeh等人，2006年；Kuo等人，2008年；Kuo等人，2017年）。AKT触发的BCL10核转运，或者BCL10本身的核转运，在某些癌症和淋巴瘤中通过核BCL3共诱导剂在激活NF-κB的过程中起着关键作用（Yeh等人，2006年；Kuo等人，2008年；Kuo等人，2017年；Kuo等人，2017年；Kuo等人，2021年）。

我们假设AKT/BCL10/BCL3/NF-κB信号通路也可能参与淋巴瘤的进展机制，从而影响PTCL患者的不良预后。本研究通过体外和体内模型以及95名PTCL患者，评估了核BCL10定位及其相关信号的生物学和临床意义。

章节片段

T细胞淋巴瘤（TCL）细胞系、BCL10 siRNA转染、capivasertib试剂和TNF-α

为了确认BCL10调控信号的生物学意义，我们使用了两种TCL细胞系SR786和HuT78。根据癌症细胞系百科全书（CCLE）数据库（https://sites.broadinstitute.org/ccle/），SR786（美国类型文化收集中心[ATCC]? CRL-2262?；RRID: CVCL_1711；ALCL细胞系）具有高水平的BCL3转录本表达，用于检测NF-κB活性（Mathas等人，2005年）。HuT78（ATCC? HTB-176?；RRID: CVCL_0337；皮肤TCL细胞系）也具有较高的BCL3表达水平。

下调BCL10可抑制TCL细胞的增殖，诱导亚G1期停滞，并增强化疗的细胞毒性

在本研究中，共聚焦显微镜免疫荧光成像显示BCL10存在于SR786和HuT78细胞的细胞核和细胞质中（图1A）。使用siBCL10敲低BCL10后，细胞核中的BCL10和BCL3荧光强度显著减弱，BCL3和BCL10主要位于细胞质中（图1A）。siBCL10转染显著降低了SR786和HuT78细胞的增殖（图1B）。

48小时后，我们进行了进一步分析……

讨论

我们的结果与Vose等人和Lin等人的研究结果一致（Vose等人，2008年；Lin等人，2012年），其中94%的病例为AITL、具有TFH细胞表型的PTCL或PTCL-NOS（中位年龄65岁；男性占61%），83%的病例处于III/IV期，72%的病例IPI评分为3-5分。然而，我们的患者5年生存率略高，为39.4%。可能的原因是超过80%的患者接受了前线多柔比星治疗或强化化疗，20%的患者接受了自体干细胞治疗。

CRediT作者贡献声明

Kuo Sung-Hsin：撰写——审阅与编辑，撰写——初稿，监督，资源协调，项目管理，数据管理，概念构思。Cheng Ann-Lii：监督，资源协调。Chang Chin-Hao：方法学研究，正式数据分析。Yuan Chung-Wu：方法学研究，正式数据分析。Wu Shang-Ju：资源协调，数据管理。Lee Hsiao-Wei：方法学研究，实验设计。Yao Ming：资源协调，数据管理。Hsu Chia-Lang：方法学研究，实验设计。

未引用参考文献

国际非霍奇金淋巴瘤预后因素项目，1993年；Kuo等人，2017年；Navari等人，2020年；Shen等人，2003年。

伦理声明

作者未获得参与者或其法定代表的知情同意。本研究在回顾性组织收集和分析过程中免除了知情同意的要求。

本研究涉及器官或组织捐赠者。研究中使用的人类生物材料已获得捐赠者或其近亲或法定代表的同意，用于本研究及文章发表。所使用的样本并非来自已故捐赠者。

伦理审批

国立台湾大学医院研究伦理委员会（NTUHREC）批准了这项回顾性研究（NTUHREC编号201904057RIND和202106012RINA），并在回顾性组织收集和分析过程中免除了知情同意的要求。本研究遵循《赫尔辛基宣言》及其后续修订版本进行。

动物实验程序已获得国立台湾大学机构动物护理和使用委员会（IACUC）的批准。

作者没有任何需要披露的利益冲突。

数据和材料的获取

支持本研究结果的数据可向相应作者请求获取。

资金支持

本研究得到了台湾国家科学技术委员会的资助，项目编号包括114-2314-B-002-207-MY3、115-2314-B-002-273、115-2811-B-002-044和115-2314-B-002-186-MY3；以及台湾国立台湾大学医院的资助，项目编号包括115-S0314和115-SS0088。

Wei-Li Ma没有需要披露的利益冲突。

Ming-Feng Wei没有需要披露的利益冲突。

Chia-Lang Hsu没有需要披露的利益冲突。

Ming Yao没有需要披露的利益冲突。

Hsiao-Wei Lee没有需要披露的利益冲突。

Shang-Ju Wu没有需要披露的利益冲突。

Chung-Wu Lin没有需要披露的利益冲突。

Chang-Tsu Yuan没有需要披露的利益冲突。

Chin-Hao Chang没有需要披露的利益冲突。

Ann-Lii Cheng没有需要披露的利益冲突。

致谢

作者感谢国立台湾大学医院的集成医学数据库和国立台湾大学医院的医学研究部门分享患者信息。我们还要感谢国立台湾大学医院医学研究部门的同事提供的统计咨询，以及医院第二核心实验室和第五核心实验室的技术支持。

Wei-Li Ma|Ming-Feng Wei|Chia-Lang Hsu|Ming Yao|Hsiao-Wei Lee|Shang-Ju Wu|Chung-Wu Lin|Chang-Tsu Yuan|Chin-Hao Chang|Ann-Lii Cheng|Sung-Hsin Kuo