免疫正常原发性中枢神经系统淋巴瘤患者中的全血EB病毒DNA：一项前瞻性探索性病例对照研究

《Clinical Lymphoma Myeloma and Leukemia》：“Whole-Blood Epstein–Barr Virus DNA in Immunocompetent Primary CNS Lymphoma patients: A Prospective Exploratory Case–Control Study”

　　

摘要

背景

Epstein–Barr病毒（EBV）与免疫功能低下患者原发性中枢神经系统淋巴瘤（PCNSL）密切相关。在免疫功能正常的患者中，循环EBV的诊断价值及其生物学意义尚不明确，特别是与中枢神经系统炎症性疾病、其他颅内肿瘤及健康个体相比。

方法

在这项前瞻性病例对照研究中，通过定量聚合酶链反应（qPCR）对全血中的EBV DNA进行定量检测。受试者包括40例经组织学或细胞学确诊为PCNSL的免疫功能正常患者和120例对照组：40例CNS炎症性疾病患者、40例其他CNS恶性肿瘤患者和40名健康个体。主要结局指标为各组中EBV DNA阳性率。

结果

在45%的PCNSL患者中检测到EBV DNA，且与PCNSL的几率显著增高相关（OR 3.27；95%置信区间[CI]，1.50–7.11）。以EBV DNA拷贝数/mL为指标，该检测的灵敏度为66.67%，特异度为62.5%。

结论

与对照组相比，免疫功能正常的PCNSL患者全血EBV DNA检出率更高，但病毒载量并不更高，且鉴别效能有限。这是一种相关性，并未确立EBV在淋巴瘤发生中的作用。在缺乏配对血浆和肿瘤EBV编码RNA（EBER）数据的情况下，该信号不能归因于肿瘤来源的病毒。全血EBV DNA不适合作为独立的诊断检测手段。

引言

原发性中枢神经系统淋巴瘤（PCNSL）是一种侵袭性且罕见的结外非霍奇金淋巴瘤，多数情况下局限于软脑膜、脑、脊髓和/或眼内¹。在组织学上，约90-95%的患者被归类为弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）。PCNSL占所有原发脑肿瘤的4-7%，占结外淋巴瘤的5%²。近几十年来，PCNSL的发病率持续增加，尤其是在老年人和免疫功能正常的人群中³。尽管近年来在诊断和治疗方面取得了突破，但PCNSL仍具有显著的发病率和死亡率⁴。

增强MRI脑部扫描和¹⁸F-FDG-正电子发射断层扫描（PET）-CT由于PCNSL与其他CNS疾病在影像学表现上重叠，其敏感性和特异性有限^5,6,7。活检作为诊断金标准，具有高度侵入性，在某些患者中存在禁忌，且可能无法做出诊断，尤其是在皮质类固醇治疗后^8,9。最后，CSF细胞学和流式细胞术具有参考价值，但作为独立的检测手段敏感性受限^10,11。

为了解决这些局限性，研究者们致力于发现微创生物标志物，如炎症标志物、白细胞介素和循环肿瘤源性核酸的评估，可能有助于PCNSL的早期检测^{12,13,14,15,16}。然而，尚无单一生物标志物被普遍接受，仍需进一步验证。

Epstein–Barr病毒（EBV）是一种普遍存在的γ-疱疹病毒，感染全球超过90%的人口^17,18。初次感染后，病毒在B细胞中建立终身潜伏，并受到严格的免疫控制^19,20。其致癌潜能已在多种淋巴样和上皮性恶性肿瘤的发病机制中得到充分证实，如经典型霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、移植后淋巴增殖性疾病、结外NK/T细胞淋巴瘤、鼻咽癌以及一部分弥漫大B细胞淋巴瘤^21,22,23,24。

EBV与PCNSL的关联在免疫功能低下个体中已得到充分证实，尤其是HIV/AIDS患者（PLHA）或接受免疫抑制治疗的患者，其中大多数肿瘤为EBV阳性^25,26。在这些情况下，EBV通过表达潜伏病毒蛋白直接促进淋巴瘤发生，这些蛋白促进B细胞增殖、防止凋亡并实现免疫逃逸²⁷。另一方面，EBV在免疫功能正常的PCNSL患者中较为少见，其在该人群中的诊断和生物学意义尚未完全明确。

在这项前瞻性病例对照研究中，我们定量检测了经组织学或细胞学确诊的PCNSL患者全血EBV DNA，并将其结果与CNS炎症性疾病、其他CNS恶性肿瘤患者以及健康对照组进行比较。本研究旨在评估免疫功能正常的PCNSL患者中EBV DNA的流行率，确定EBV阳性是否在免疫功能正常的PCNSL中相较于对照组富集，并探讨全血EBV DNA作为诊断生物标志物在当前对EBV相关淋巴瘤发生认识背景下的潜在价值。

片段

研究人群

本研究为前瞻性、单中心、病例对照研究，于2022年至2025年在印度北部的一家三级医疗机构——医学教育与研究研究生院（PGIMER）的神经内科、神经外科和肿瘤科的门诊及住院部开展。病例为连续纳入的具有组织学或细胞学证据的免疫功能正常PCNSL患者。排除患有任何相关急性或慢性炎症或感染性疾病的患者

研究队列

本研究共纳入160名参与者，包括40例具有组织学和细胞学证据的免疫功能正常PCNSL病例，以及120例对照组；40例CNS炎症性疾病[包括视神经脊髓炎谱系疾病（n=13）、多发性硬化（n=14）、IgG4相关性疾病（n=10）和神经结节病（n=02）、血管炎（n=01）]，40例其他CNS恶性肿瘤[包括胶质瘤（n=19）、星形细胞瘤（n=16）和转移性癌（n=05）]，以及40例年龄和性别匹配的健康对照者

讨论

在这项前瞻性病例对照研究中，45%的免疫功能正常PCNSL患者全血中检测到EBV DNA，高于合并对照组。然而，病毒载量并不高于其他CNS恶性肿瘤或健康对照组，且鉴别效能较差。

全血EBV DNA与PCNSL之间的相关性并不能确立EBV的致病作用。全血既包含细胞相关病毒（主要在潜伏感染的记忆B细胞中携带），也包含

结论

免疫功能正常的PCNSL患者全血EBV DNA检出率高于对照组，但病毒载量并不更高，且诊断鉴别效能有限。这些发现表明存在相关性，而非机制性联系。在没有配对血浆和肿瘤EBER研究的情况下，无法确定这些患者循环EBV DNA是否反映肿瘤来源病毒还是宿主对潜伏感染控制的改变。

作者贡献

Sofia Singh：概念化、撰写初稿、审阅和编辑、稿件准备、数据管理、正式分析

Diksha Rana：数据管理、正式分析。

Prabhjit Kaur：数据管理、正式分析

Raghav Lal：监督、可视化和验证。

Karthik Vinay Mahesh：监督、可视化和验证。

Debajyoti Chatterjee：监督、可视化和验证。

Seema Chhabra：监督、可视化和验证。

Aastha Takkar Kapila：

资金来源

本研究通过ANRF/DST-SERB核心研究资助计划资助，文件编号：CRG/2022/002818

CRediT作者贡献声明

Sofia Singh：撰写 – 初稿、可视化、软件、资源、项目管理、方法学、调查、资金获取、正式分析、数据管理、概念化。Diksha Rana：正式分析、数据管理。Prabhjit Kaur：正式分析、数据管理。Raghav Lal：可视化、验证。Karthik Vinay Mahesh：可视化、验证、监督、正式分析。Debajyoti Chatterjee：验证、监督。Seema Chabra：验证、监督、

Sofia Singh|Diksha Rana|Prabhjit Kaur|Raghav Lal|Karthik Vinay Mahesh|Debajyoti Chatterjee|Seema Chabra|Aastha Takkar|Gaurav Prakash|Ranjana W. Minz

印度昌迪加尔医学教育与研究研究生院神经内科 160012