《Frontiers in Cellular and Infection Microbiology》:Canine hookworm infections in Vietnam: prevalence, risk factors, and detection of zoonotic Ancylostoma ceylanicum
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引言:犬钩虫全球广泛分布,因其人兽共患潜力而成为公共卫生关注问题。钩虫感染在越南呈地方性流行;然而,关于犬钩虫感染的信息仍然有限。该研究调查了越南某农村地区犬钩虫的流行率、相关因素、虫种鉴定以及锡兰钩虫(Ancylostoma ceylanicum)的遗传多样
引言:犬钩虫全球广泛分布,因其人兽共患潜力而成为公共卫生关注问题。钩虫感染在越南呈地方性流行;然而,关于犬钩虫感染的信息仍然有限。该研究调查了越南某农村地区犬钩虫的流行率、相关因素、虫种鉴定以及锡兰钩虫(Ancylostoma ceylanicum)的遗传多样性。方法:共采集371份犬粪便样本,并采用Sheather溶液粪浮聚法(fecal flotation with Sheather’s solution)进行检查。钩虫阳性样本进一步进行聚合酶链式反应(PCR)以进行虫种鉴定。结果:66.6%的犬(95% CI:61.5-71.3)检出钩虫感染。无驱虫史的犬(调整比值比[aOR] = 1.77,95% CI:1.08-2.89)和缺乏规范粪便管理的犬(aOR = 1.79,95% CI:1.01-3.17)发生钩虫感染的比值显著更高。分子分析鉴定出两种钩虫,即A. ceylanicum和犬钩虫(Ancylostoma caninum),其中A. ceylanicum占优势。基于cox1序列的系统发育分析显示,所有A. ceylanicum序列均属于人兽共患单倍型,并与来自亚洲的人类、犬和猫的分离株密切相关。讨论:这些发现为亚洲犬群中人兽共患A. ceylanicum循环的日益增多的证据提供了支持,并支持在地方性流行地区开展整合的同一健康(One Health)监测和控制措施的必要性。
犬钩虫为全球广泛分布的犬肠道寄生虫,部分虫种具有人兽共患潜力,因而受到兽医和公共卫生关注。越南为钩虫感染地方性流行区,农村地区自由放养犬常见,人犬接触频繁;既往调查多依赖粪检,难以准确鉴定虫种,分子数据仍较缺乏。因此,研究人员在越南Dak Lak省Krong Nang县农村地区开展横断面研究,旨在确定犬钩虫流行率、相关因素和虫种组成,并分析锡兰钩虫(Ancylostoma ceylanicum)的遗传多样性。该研究共纳入371只犬,研究发现犬钩虫感染率较高,A. ceylanicum为优势虫种,且其cox1序列属于人兽共患单倍型;未驱虫和粪便管理不当与感染风险升高相关。研究结果提示当地存在人兽共患传播风险,支持通过改善犬管理、定期驱虫和规范粪便处理,并结合同一健康(One Health)监测与控制措施降低传播风险。
该研究为横断面调查,样本来自2025年2—3月越南Dak Lak省Krong Nang县Eatam和Eaho公社随机选取的犬,共371份新鲜粪便;采用Sheather溶液粪浮聚法(fecal flotation)镜检钩虫卵;对阳性样本以聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)鉴定虫种,并对A. ceylanicum阳性样本扩增细胞色素c氧化酶1(cox1)基因,随机选取15份测序并作系统发育分析;通过结构化问卷收集犬年龄、性别、品种及管理信息,采用单变量分析和多变量logistic回归分析相关因素。
3.1 研究犬的一般特征:研究纳入371只犬,雌性占56.3%,>12月龄占59.8%,本地品种占88.1%,允许自由放养者占75.2%;75.5%的犬从未驱虫,仅少数所有者报告规范处理犬粪。由此说明研究犬群以本地品种、自由放养和低驱虫覆盖为特征。
3.2 钩虫虫种流行率与分子特征:通过粪浮聚法,247/371只犬(66.6%,95% CI:61.5-71.3)检出钩虫卵;对浮聚阳性样本进行PCR-RFLP,232份(93.9%)成功扩增,15份浮聚阳性样本PCR未扩增。232份扩增阳性样本中,191份(82.3%)为A. ceylanicum单一感染,34份(14.7%)为A. caninum单一感染,7份(3.0%)为两种钩虫混合感染;未获得A. braziliense或U. stenocephala扩增产物。191份A. ceylanicum样本中188份(98.4%)成功扩增cox1基因,并随机选取15份用于测序和系统发育分析。由此表明当地犬钩虫以A. ceylanicum为主。
3.3 犬钩虫感染相关因素:单变量分析显示,本地品种(粗比值比[cOR] = 2.21,95% CI:1.16-4.18,p = 0.013)、未驱虫(cOR = 1.83,95% CI:1.12-2.98,p = 0.014)和无犬粪管理(cOR = 1.87,95% CI:1.06-3.29,p = 0.029)与钩虫感染显著相关。多变量分析中,未驱虫犬感染比值较高(调整比值比[aOR] = 1.77,95% CI:1.08-2.89,p = 0.022);无规范粪管家庭的犬感染比值也较高(aOR = 1.79,95% CI:1.01-3.17,p = 0.046)。模型拟合良好(Pearson χ
2 = 371.07,df = 367,p = 0.431),未见多重共线性,Cook距离提示的观察122对结果影响很小。由此说明未驱虫和粪便管理不当是感染风险因素。
3.4 A. ceylanicum cox1系统发育分析:基于cox1序列的系统发育分析显示,所有研究序列均聚类于A. ceylanicum分支,并与A. duodenale和A. braziliense明显分开;犬源分离株未形成独立分支,而与来自亚洲多国的人类、犬和猫参考序列交错分布,研究内分离株仅见轻微序列变异。代表性cox1序列已提交GenBank(PZ988225-PZ988239)。由此提示当地犬源A. ceylanicum与人及动物来源序列关系密切。
讨论部分认为,该研究犬钩虫感染率高于越南既往调查及泰国、柬埔寨和马来西亚相关报告,低于老挝报告;高流行可能与热带环境、自由放养、接触其他动物和粪便管理较差有关。分子鉴定显示A. ceylanicum和A. caninum并存,且A. ceylanicum占优势;这与越南Phu Tho和Dak Lak既往调查一致,而Long An曾检出A. braziliense且以A. caninum为主;亚洲不同地区优势虫种可因地理、宿主群体和诊断方法而异。A. ceylanicum可在人间建立自然显性感染(patent infection)并引起嗜酸性肠炎,是亚洲被忽视的人兽共患钩虫,犬可能作为储存宿主(reservoir);其在当地犬群中的优势具有公共卫生意义。cox1序列均属人兽共患单倍型(haplotype),并与越南人源及亚洲人、犬、猫源序列聚集,提示潜在人兽共患暴露;但越南犬源参考序列有限,限制直接比较。未驱虫和粪便管理不当与感染相关,自由放养且未治疗犬可持续污染环境;建议定期驱虫、妥善处理犬粪和改善犬管理,并以同一健康(One Health)思路开展人、动物和环境整合监测。247份浮聚阳性中15份PCR未扩增,可能与钩虫卵与Trichostrongylus或植物寄生线虫Meloidogyne卵形态相似导致镜检误判有关,或与低强度感染、粪样中虫卵分布不均及PCR粪样量较小有关。研究局限包括仅覆盖两个公社、抽样名单可能未涵盖全部合格家庭、选择偏倚不能完全排除,以及未纳入人源和环境样本,不能直接评估人兽共患暴露和环境污染;未来需扩大地理范围并整合犬、人和环境采样。结论部分翻译如下:该研究显示越南Dak Lak省Krong Nang县犬钩虫感染呈高流行;鉴定出A. ceylanicum和A. caninum,其中A. ceylanicum为优势虫种。鉴于A. ceylanicum的人兽共患潜力,这些发现提示农村地方性流行环境存在人兽共患传播风险。改善犬管理,尤其是定期驱虫和妥善处理犬粪,可能有助于减少环境污染并限制向人和动物传播的机会。