种植体周围组织免疫组织化学技术的方法学评估：一项系统评价

《Journal of Histotechnology》：A methodological evaluation of the immunohistochemistry techniques for peri-implant tissues. A systematic review

　　

免疫组织化学是一种通过抗原-抗体相互作用检测组织样本中特定抗原的技术。理解免疫组织化学的有效性和局限性对于评估牙种植体的临床和生物学意义至关重要。本系统评价综合了关于种植体周围组织免疫组织化学特征的证据，包括实验室方法及其可靠性的识别，特别关注用于检测关键免疫组织化学标志物的抗体选择以及影响种植体周围组织免疫组织化学特征的因素。纳入的研究为在种植体周围样本处理过程中使用免疫组织化学的随机和非随机研究。主要关注结局是免疫组织化学技术的分步流程。研究人员检索了多个数据库，以确定截至2026年1月发表的相关人体研究。提取的数据被整理成表格以进行定性分析。大多数已识别的研究表明，通过免疫组织化学检测，患病牙种植体周围的种植体周围组织比健康种植体周围组织表现出更强的炎症活性、缺氧、新生血管形成和边缘性骨吸收。尽管如此，方法学上的差异，特别是在抗体选择方面，挑战了不同研究间结果的可标准化性和可重复性。免疫组织化学被证明是表征种植体周围组织的有效工具，能够区分健康和炎症状态如种植体周围炎。未来的研究应侧重于验证抗体和标准化方案，以提高免疫组织化学在评估种植体周围状况方面的可靠性和临床适用性。

论文主体内容总结

引言

牙种植体是部分及全口无牙颌患者的可靠治疗方式。尽管其是替代缺失牙的理想方案，但多种生物学及修复并发症会影响种植体周围软硬组织，导致种植体周围疾病乃至种植失败。种植体周围疾病（包括种植体周围黏膜炎和种植体周围炎）的多因素性质已被广泛探索，但这些复杂的炎症状况对临床医生和科学家仍是重大挑战。目前已有多种技术和方案用于评估健康和疾病状态下种植体周围组织的特征。免疫组织化学是一种常用的技术，通过在组织切片中基于抗原-抗体相互作用的直接或间接标记方法来检测特定抗原，从而了解组织样本中的细胞功能和酶活性，并评估抗原在组织切片中的定位或强度。需要认识到IHC的局限性，它并非设计用于识别或定量基因表达。IHC的独特之处在于能够在保持组织学结构的同时进行检测，从而允许在微环境背景下评估目标分子的表达模式。IHC使用基于抗体的染色来原位检测各种细胞和分子标志物，揭示关于种植体周围条件下免疫细胞的分布和活性、炎症细胞因子的存在以及组织重塑状态的关键信息。本系统评价的目的是：1）识别实验室方法（如固定过程和IHC技术）及其可靠性；2）影响种植体周围组织免疫组织化学特征的因素；3）认识新兴的IHC方法以及用于研究人类种植体周围硬/软组织标本的抗体。

材料与方法

两名独立研究者（S.M.和C.G.P.）在PubMed、EMBASE和Cochrane Central Register of Controlled Trials数据库中进行了电子和手动文献检索，检索截至2026年1月发表的英文文章。该方案已在系统评价国际数据库PROSPERO注册，ID号为CRD420261288411。采用PICOS框架构建研究问题：在健康和疾病状态下，哪些因素影响人体种植体周围样本处理过程中IHC的结果？人群定义为至少有一颗牙种植体的成年人类受试者的活检样本；干预为使用IHC分析的样本；结局主要关注IHC技术的分步流程，次要关注技术对照的使用、靶向标志物/细胞、抗体类型、评估类型、样本固定过程及种植体周围组织状态。纳入标准包括英文撰写的人体临床试验以及在种植体周围组织活检分析中使用IHC的研究。排除未报告或未能提供IHC技术和固定过程详细描述的临床前/实验研究和临床研究。两名研究者独立筛选标题和摘要，随后阅读全文。若存在分歧，由第三名研究者（F.A.）做出最终决定。数据被提取并组织成证据表格。偏倚风险分析由两名检查者独立进行，分别使用Cochrane协作组工具、纽卡斯尔-渥太华量表和JBI关键评估清单。

结果

在去除重复后共获得438篇文章，经筛选后最终纳入73篇。这些研究包括4项病例对照研究、1项回顾性病例系列、8项前瞻性队列研究、6项随机对照试验和54项横断面研究。在评估的种植体周围状况方面，47项研究评估了种植体周围健康，7项分析了种植体周围黏膜炎，34项纳入了种植体周围炎病变，4项从晚期种植失败位点获取样本。大多数研究主要通过手术技术获取包含上皮和下方结缔组织的种植体周围软组织活检。关于固定方案，醛类固定是最常用的方法（占65.8%），其次是速冻方案（占23.3%）。多聚甲醛在不同浓度下被使用，较低浓度通常对应较长的固定时间。在IHC技术的方法学评估中，辣根过氧化物酶-亲和素-生物素复合物法是最常用的IHC方法，应用于22项研究。另有26项研究报告使用了未明确的HRP-免疫过氧化物酶法，13项应用了无生物素的聚合物-HRP法。二氨基联苯胺作为深棕色显色剂在41项研究中使用。在抗体类型方面，28项研究未提供全面的描述，19项同时使用了多克隆和单克隆抗体，17项仅使用单克隆抗体，8项仅使用多克隆抗体。有22项研究未报告阴性或阳性对照来验证IHC结果。最常见的阴性对照是省略一抗/二抗。总体而言，67项研究采用了手动评估，其中7项为定性评估，42项为半定量评估，24项为定量评估（其中18项为手动定量，6项为自动化定量）；另有6项研究使用了自动化评估。