冷冻保存脐带血单位在13年内质量稳定：主要变化源于冻融循环而非长期储存

《Stem Cell Research & Therapy》：Within-unit paired aliquots reduce between-unit variation and help distinguish freeze–thaw injury from storage-duration effects in cryopreserved cord blood products

　　摘要背景冷冻保存的脐带血是造血干细胞移植的既定来源，血库在发放前会将脐带血单位储存数年至数十年。因此，单位在多久时间内保持合格的活性和造血能力，与发放资格的决定密切相关。然而，大多数稳定性研究比较的是不同单位在不同储存时长下的情况，从而混淆了储存效应与单位间变异性。方法在本质量控制计划中，同一脐带血单位按储存时长进行分装、冷冻保存和解冻；冻存前和复苏后的样本以配对方式进行比较，使每个单位作为自身对照。从2012年至2024年制备的67个单位中，我们获得了229对冻存前-复苏后配对（储存时间最长13年2个月）。我们评估了总有核细胞（TNC）、CD34+细胞计数、集落形成能力（CFU）、台盼蓝活性（vTNC-TB），以及三种基于7-AAD的流式细胞术活性指标（vTNC、vCD45+、vCD34+），采用配对Wilcoxon检验和经测量时期调整的线性混合效应模型进行分析。结果经过单次冻融循环后，核心植入相关指标下降：vCD45+约下降18个百分点，vCD34+约下降12个百分点，CD34+细胞计数约下降20%。CFU总体约降低14%，但在短期储存首次复苏亚组中无显著降低（恢复率0.95，p = 0.339）。TNC基本保留（恢复率0.98，p = 0.036），vTNC-TB同样基本保留（约下降1.6个百分点）。大多数损伤发生在初次冻融时。在调整测量时期混杂因素后，在观察期内（最长13年）未发现储存导致显著额外恶化。vTNC-TB读数比vTNC高约6个百分点。结论在13年内，脐带血的主要质量变化与首次单次冻融循环相关，而非长期储存，尽管储存效应无法与测量时期完全区分。对于脐带血产品等长期冷冻保存的人类细胞，需要建立标准化的质量控制计划，以管理测量仪器等外部变化。