Netrin-1过表达脂肪源性干细胞外泌体通过重编程巨噬细胞减轻腹主动脉瘤

《Stem Cell Research & Therapy》：Netrin-1 enriched ADSC exosomes attenuate abdominal aortic aneurysm via NF-κB and JNK/AP-1 modulation

　　背景腹主动脉瘤（AAA）是一种以巨噬细胞为驱动的疾病，目前尚无有效的药物治疗方法。鉴于Netrin-1在巨噬细胞中的抗炎作用，本研究旨在探讨过表达Netrin-1的脂肪源性干细胞（N-ADSC-exo）来源的外泌体是否能够重编程巨噬细胞并减轻AAA。方法将小鼠ADSCs转导（或不转导）Netrin-1腺病毒载体，分别生成ADSC-exo和N-ADSC-exo。通过黏附实验和迁移实验、LPS诱导的ROS、凋亡以及CCK-8细胞活力评估对RAW264.7巨噬细胞的影响。采用批量RNA测序，结合GO/KEGG富集分析和GSEA比较转录组。通过Western blotting分析NF-κB和JNK/AP-1信号通路及极化标志物。在Ang II诱导的AAA ApoE?/?小鼠中，静脉注射PBS、ADSC-exo或N-ADSC-exo。评估AAA发生率、最大腹主动脉直径、弹性蛋白/胶原组织学、巨噬细胞极化的免疫荧光分析、主动脉IL-1β/MMP9、DiD标记外泌体的生物分布以及全身生物相容性。结果ADSC-exo和N-ADSC-exo被巨噬细胞内化的程度相似。与ADSC-exo相比，N-ADSC-exo增强了黏附和迁移，减少了LPS诱导的ROS而不增加凋亡，并适度提高了细胞活力。RNA测序显示，在N-ADSC-exo处理的细胞中，细胞周期通路富集，NF-κB相关基因集被抑制，在蛋白质水平上表现为p-p65、p-JNK、AP-1和IL-1β降低，M2标志物升高。在AAA小鼠中，N-ADSC-exo被F4/80+细胞优先摄取，降低了AAA发生率，减小了主动脉直径，改善了弹性蛋白的保留，减少了F4/80+CD86+巨噬细胞和IL-1β/MMP9，且未诱导全身毒性。结论N-ADSC-exo通过促使巨噬细胞重编程为NF-κB和JNK/AP-1抑制、M2偏倚的表型，从而减轻AAA。图形摘要