来自僵蚕的肾保护性维生素E和木脂素4-O-甲基葡萄糖苷：一种罕见的真菌糖基化特征

《Tetrahedron》：Renoprotective Vitamin E and Lignan 4-O-Methylglucosides from Bombyx batryticatus: A Rare Fungal Glycosylation Signature

　　

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  从僵蚕中分离得到了十二种新化合物，bombatrysides A?L（1?12）。
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  所有新化合物均含有罕见的4-O-甲基葡萄糖苷结构。
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  化合物5、6、10、11、14和15对TGF-β1诱导的肾纤维化表现出剂量依赖性的肾脏保护作用。

引言

僵蚕是一种由昆虫与真菌共生形成的独特产物，兼具药用和食用价值。临床上，它具有解痉、化痰和散结的功效，对治疗惊厥性疾病显示出疗效，同时具有降血糖和抗肿瘤潜力（Hu等，2017；Jiang等，2014；Kong等，2014；Yuan等，2020）。僵蚕是蚕幼虫（家蚕）被昆虫病原真菌白僵菌感染并木乃伊化后的干燥尸体（Hu等，2017）。这种治疗药物的形成是一个复杂的生物学过程：真菌侵入蚕幼虫，在其血腔内增殖，最终杀死宿主。在这一致病过程中，由真菌的酶促机制驱动发生深刻的生化转化，这些酶会修饰源自昆虫宿主及其桑叶饮食的内源代谢产物（Hu等，2017）。此过程导致一组独特的次级代谢产物积累，其中许多在健康昆虫中并不存在。

这种利用真菌感染的昆虫入药的现象并非僵蚕独有。经典例子包括冬虫夏草（中国虫草），这是一种真菌-幼虫复合体，用作强效滋补品和免疫调节剂；以及蝉花（蝉花），一种被真菌感染的蝉若虫，因其肾脏保护和镇静作用而受重视（Sen等，2023；Ghosh等，2026；Li等，2021）。在所有这些案例中，药用价值本质上与宿主昆虫和入侵真菌之间复杂的代谢相互作用有关，从而产生具有显著生物活性的新型化学实体。对于僵蚕而言，一个特别显著的特征是存在4-O-甲基葡萄糖基化化合物。这些是通过真菌介导的蚕内源酚类成分的4-O-甲基葡萄糖基化而形成的稀有次级代谢产物，这种修饰在高等植物或常见微生物中很少观察到（Kikuchi等，2004；Huang等，2017a, b）。

近年来，在表征僵蚕的化学成分和药理活性方面取得了重大进展（Hu等，2017；Kikuchi等，2004；Huang等，2017a, b；Song等，2021）。特别引人注目的是4-O-甲基葡萄糖基化化合物，这是一类独特的化学物质，通过真菌介导的僵蚕感染期间内源酚类成分的4-O-甲基葡萄糖基化形成（Kikuchi等，2004；Huang等，2017a, b；Sadorn等，2019）。值得注意的是，已证明白僵菌在生物转化过程中能催化姜黄素和黄酮的4′-O-甲基葡萄糖基化（Zeng等，2010；?u?ny等，2020；Chlipa?a等，2024），表明其具有生成4-O-甲基葡萄糖基化衍生物的能力。此类转化被认为由真菌的糖基转移酶-甲基转移酶功能模块执行，正如Xie等人所证明的（Xie等，2019），这为这些稀有糖苷的真菌起源提供了机制上的依据。作为我们对这种药用昆虫化学多样性持续研究的一部分，本研究报道了从僵蚕中分离和结构阐明化合物。干燥的僵蚕材料用50%乙醇提取，粗提物依次通过MCI凝胶CHP 20P、ODS-A-HG、Sephadex LH-20和半制备HPLC进行分级分离。该过程得到34种化合物，包括6种新的维生素E衍生物（1?6）和6种新的木脂素糖苷（7?12），这些化合物均具有罕见的4-O-甲基葡萄糖苷结构。此外，还鉴定出三种已知的带有此修饰的黄酮类结合物和19种其他已知化合物（图1）。此外，对化合物1?24进行了抗肾纤维化活性测定。

章节摘要

结构解析

僵蚕的粗提物依次通过MCI凝胶CHP 20P、ODS和Sephadex LH-20柱色谱分级分离，然后使用半制备HPLC进行最终纯化，得到化合物1?34。新分离物的结构解析如下。化合物1为黄色胶状物。根据HRESIMS、¹H和¹³C NMR数据确定其分子式为C₂₃H₃₄O₉，表明有七个不饱和度。其¹H NMR数据（表1）

结论

本研究从僵蚕中成功分离并鉴定了34种化合物。值得注意的是，十二种新代谢物，bombatrysides A?L（1?12），以及三种已知类似物（13?15），被鉴定为罕见的4-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷类化合物。其中包括六种前所未有的维生素E衍生物（1?6）和六种新的木脂素糖苷（7?12）。这一结构独特的化合物簇的发现显著丰富了4-O

通用方法

色谱实验使用以下材料：MCI凝胶CHP-20P（75?150 μm，三菱化学工业株式会社，东京，日本）、YMC凝胶ODS-A-HG（40?60 μm，YMC有限公司，京都，日本）和Sephadex LH-20（Amerchim，瑞典）。半制备高效液相色谱（HPLC）采用配备MWD紫外检测器的SEP LC-52仪器（赛谱技术有限公司，北京，中国）和YMC-Pack ODS-A色谱柱（250 mm × 10 mm，5 μm）。

CRediT作者贡献声明

朱文兴： 写作 – 初稿，方法学，调查，正式分析。 王思雨： 写作 – 初稿，方法学，调查，正式分析。 刘静： 数据管理。 秦灿珍： 调查。 程永贤： 写作 – 审阅与编辑，监督，项目管理，资金获取，概念化。 刘云云： 数据管理。 严永明： 写作 – 审阅与编辑，监督，项目管理，资金获取，概念化

未引用文献

Wang等，2009。

利益冲突声明

? 作者声明，他们没有任何已知的利益冲突或个人关系可能影响本论文所报告的工作。

致谢

本研究得到国家自然科学基金（82322071，82530118）、深圳市科技计划（KQTD20210811090219022）和深圳大学顶级项目（868/000005030322）的资助。我们感谢深圳大学仪器分析中心在NMR分析方面提供的帮助。

王思雨|朱文兴|秦灿珍|刘静|刘云云|严永明|程永贤