《Reproductive Biology》：Leuprolide acetate improves ovarian indices but does not restore uterine morphometry in obese Zucker rats
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摘要肥胖与动情周期紊乱、卵泡发育受损及子宫反应改变有关。醋酸亮丙瑞林（LA）是一种促性腺激素释放激素激动剂，对生殖轴产生时间依赖性效应；然而，其在严重肥胖条件下的作用尚不明确。本研究评估了LA对肥胖Zucker大鼠代谢参数、动情周期、卵巢形态和子宫形态计量学的影响。使用36只成年
摘要
肥胖与动情周期紊乱、卵泡发育受损及子宫反应改变有关。醋酸亮丙瑞林（LA）是一种促性腺激素释放激素激动剂，对生殖轴产生时间依赖性效应；然而，其在严重肥胖条件下的作用尚不明确。本研究评估了LA对肥胖Zucker大鼠代谢参数、动情周期、卵巢形态和子宫形态计量学的影响。使用36只成年雌性大鼠：正常体重Long–Evans（LE）和肥胖Zucker（OZ）大鼠被分配到未处理对照组、载体组或LA处理组（n = 6/组）。LA以2.5 μg/只/天的剂量皮下注射，连续21天。治疗前后评估动情周期，治疗后评估代谢、卵巢和子宫结果。肥胖Zucker大鼠表现出更大的肥胖度、代谢改变、延长且紊乱的动情周期、卵泡发育受损、卵泡闭锁增加、黄体数量减少以及子宫形态计量学改变。LA产生条件依赖性生殖反应。在肥胖大鼠中，LA缩短了延长的动情周期，并使动情期分布向正常体重动物观察到的模式转变。LA还增加了健康、发育中、窦状和排卵前卵泡，显著增加了黄体数量，并减少了卵泡闭锁和囊性结构。相反，在正常体重大鼠中，LA主要产生抑制性卵泡和动情周期改变。LA显著降低了肥胖大鼠的总胆固醇，但不改变血清葡萄糖，而甘油三酯未检测到条件特异性治疗效应。在子宫水平，LA降低了肥胖大鼠的子宫直径，但未改变子宫内膜厚度。这些发现表明，LA根据代谢和生殖背景产生显著不同的生殖反应，改善肥胖Zucker大鼠的一些卵泡和黄体组织形态计量学指标，但未伴随子宫形态计量学的平行恢复。
引言
肥胖是一种慢性多因素疾病，以脂肪组织过度积聚及相关代谢和内分泌紊乱为特征。在育龄女性中，超重和肥胖与生殖功能受损有关，包括无排卵、月经不规律、不孕、卵母细胞质量下降和子宫内膜容受性改变[1]、[2]、[3]、[4]。在辅助生殖中，肥胖女性可能需要更高剂量的促性腺激素，回收的卵母细胞数更少，且着床率和妊娠率较低[1]、[4]、[5]。这些观察表明，肥胖可以影响生殖生理的多个层面，而非单一的卵巢或内分泌过程。
肥胖相关生殖功能障碍是多因素的，涉及胰岛素抵抗和高胰岛素血症、脂肪因子信号改变、慢性低度炎症以及下丘脑–垂体–性腺轴的失调[6]、[7]、[8]。瘦素和其他代谢介质的改变可能改变促性腺激素释放激素（GnRH）的脉冲性、促性腺激素分泌、卵巢甾体生成、卵泡成熟、卵母细胞能力、动情周期或月经周期以及子宫内膜功能[6]、[7]、[8]。因此，肥胖不仅直接影响生殖组织，还改变了生殖药理学干预所作用的内分泌和代谢环境。近期证据进一步支持代谢状态、神经内分泌调节与女性生殖功能之间的密切相互作用[9]、[10]。
GnRH激动剂，包括醋酸亮丙瑞林（LA），最初激活垂体GnRH受体，可能诱导黄体生成素（LH）和促卵泡激素（FSH）分泌的短暂增加，通常称为“突发效应”。相反，反复或持续的受体刺激逐渐诱导垂体GnRH受体脱敏，并降低促性腺激素反应性，这是长期GnRH激动剂治疗抑制效应背后的主要机制[11]、[12]、[13]。雌性大鼠的实验研究表明，这些反应的大小和时间模式取决于剂量和暴露时间，且垂体、卵巢和子宫对慢性GnRH激动剂给药的敏感性可能不同[14]、[15]。因此，长期LA暴露的生殖后果不应被解释为持续的促性腺激素刺激，而应视为治疗持续时间、剂量、垂体脱敏和组织特异性反应性的综合结果。GnRH激动剂也已实验用于研究内分泌和代谢改变条件下的卵巢反应[16]。
肥胖Zucker大鼠携带瘦素受体突变，广泛用于研究肥胖、代谢与生殖功能障碍之间的相互作用[17]、[18]、[19]。纯合肥胖动物会出现摄食过度、严重肥胖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、血脂异常以及其他代谢功能障碍特征[17]、[18]。雌性肥胖Zucker大鼠也表现出生殖异常，包括动情周期改变、对卵巢激素的反应性受损、下丘脑–垂体–性腺功能紊乱以及卵巢功能障碍[19]、[20]、[21]、[22]。我们小组之前的研究也证明了Zucker肥胖雌性大鼠卵巢功能和生殖性能的改变[21]、[22]，支持该模型用于研究肥胖相关生殖功能障碍的实用性。
尽管GnRH激动剂已在生殖医学和实验生殖生物学中得到广泛研究，但在严重肥胖条件下长期LA暴露的卵巢和子宫反应仍缺乏充分表征。这一问题尤为重要，因为肥胖可能改变对GnRH激动剂给药的内分泌反应性，而卵巢和子宫组织对长期抑制促性腺激素信号传导的敏感性可能不同。雌性大鼠的实验研究已证明慢性GnRH激动剂治疗下卵巢和子宫反应的剂量和时间依赖性差异[14]、[15]。因此，分别评估卵巢和子宫终点可能更全面地理解代谢改变环境下LA的生殖反应。
因此，本研究旨在评估21天LA给药对肥胖Zucker大鼠动情周期、卵巢组织形态计量学和卵泡动力学、子宫形态计量学以及选定代谢参数的影响，并以正常体重Long–Evans大鼠作为非肥胖参考。我们假设长期LA暴露在肥胖条件下会差异调节卵巢和子宫结果，使得卵泡和黄体指数的变化不一定与子宫反应平行。我们还评估了这些生殖反应是否伴有葡萄糖和脂质相关代谢参数的变化。本研究旨在表征长期LA暴露的生殖和形态学反应，并为未来研究探讨肥胖中这些效应的内分泌机制提供基础。
章节片段
遵守伦理标准
动物由普埃布拉州立大学（BUAP）的Claude Bernard动物设施获得并饲养。所有程序均按照ARRIVE指南以及国际公认的实验动物护理和使用标准进行，包括国家研究委员会《实验动物护理和使用指南》、墨西哥标准NOM-062-ZOO-1999和墨西哥动物保护法。已采取措施以尽量减少动物
形态计量参数
肥胖Zucker大鼠表现出预期的肥胖表型。双因素方差分析显示，实验条件对体重[F(1,30) = 142.61, P < 0.0001]、腹围[F(1,30) = 640.09, P < 0.0001]和肥胖指数[F(1,30) = 773.17, P < 0.0001]有强烈影响。治疗或实验条件×治疗的交互作用对体重[F(2,30) = 0.94, P = 0.402；F(2,30) = 1.19, P = 0.319]或腹围[F(2,30) = 1.25,
讨论
本研究评估了21天醋酸亮丙瑞林（LA）给药对正常体重Long–Evans（LE）和肥胖Zucker（OZ）雌性大鼠代谢、动情周期、卵巢和子宫结果的影响。LA根据实验条件产生显著不同的生殖反应。OZ大鼠表现出更大的肥胖度和代谢改变，同时伴有动情周期紊乱、卵泡发育受损、卵泡闭锁增加、黄体数量
结论
醋酸亮丙瑞林治疗21天产生条件依赖性生殖效应。在肥胖Zucker大鼠中，LA缩短了延长的动情周期，增加了健康和晚期卵泡及黄体数量，并减少了卵泡闭锁和囊性结构。这些卵巢组织形态计量学变化在体重或肥胖度未正常化的情况下发生，并伴有总胆固醇显著降低，但血清葡萄糖无治疗效应，且
伦理声明
本研究按照ARRIVE（动物研究：体内实验报告）指南以及以下动物福利和/或报告指南进行：国家研究委员会《实验动物护理和使用指南》、墨西哥标准NOM-062-ZOO-1999和墨西哥动物保护法。本研究经普埃布拉州立大学机构实验动物护理和使用委员会（CICUAL）批准。
资助
本研究由VIEP-BUAP资助；拨款号 100274222–2023–2026。NMG获得了SECIHTI的硕士奖学金，奖学金编号 1318398。资助来源在研究设计、数据收集、数据分析、结果解释、稿件准备或提交发表决策中没有任何作用。
利益冲突声明
作者声明，他们没有已知的可能影响本报告工作的相互竞争经济利益或个人关系。
致谢
作者感谢普埃布拉州立大学Claude Bernard动物设施在动物护理和饲养方面的支持。
Natalia Martínez-García|Angélica Trujillo-Hernández|Carmen Cortés|José Ramón Eguibar
