肌萎缩侧索硬化症中血浆错误折叠超氧化物歧化酶1的表征

《Neurobiology of Disease》：Characterization of plasma misfolded superoxide dismutase 1 in amyotrophic lateral sclerosis

　　

肌萎缩侧索硬化症（ALS）是一种由多种分子病理机制驱动的暴发性运动神经元疾病，包括异常蛋白质质量控制、RNA代谢异常及轴突运输功能障碍。虽然大多数ALS病例为非遗传性，但5–10%的患者为家族性ALS，常见ALS相关基因包括超氧化物歧化酶1（SOD1）、染色体9开放阅读框72（C9orf72）、TAR-DNA结合蛋白43（TDP43）或肉瘤融合蛋白（FUS）。由于超过95%的ALS患者运动神经元中存在细胞质TAR DNA结合蛋白43（TDP-43）包涵体，异常TDP-43聚集已被视为ALS的病理标志。另一方面，携带SOD1和FUS突变的患者脊髓运动神经元中表现出SOD1和FUS错误折叠蛋白聚集。理解错误折叠蛋白的分子病理生理学对于多种神经退行性疾病（包括ALS）的精准诊断和潜在靶向治疗至关重要。错误折叠SOD1病理曾被认为仅见于SOD1突变携带者；然而，研究表明在缺乏SOD1突变的非遗传性和家族性ALS患者死后组织中可检测到野生型SOD1聚集。此外，研究人员近期证明19例非遗传性ALS患者中6例（32%）显示血浆错误折叠SOD1水平升高，该亚组患者表现出独特的轴突兴奋性改变，特别是由超极化激活环核苷酸门控（HCN）电流驱动的内向整流增强。值得注意的是，药理学抑制HCN通道可减轻神经毒性，表明错误折叠SOD1是病理的驱动因素而非旁观者。识别该亚组（尤其在非遗传性ALS中）在临床上具有紧迫性，原因是SOD1靶向治疗（包括tofersen等反义寡核苷酸及其他在研药物）快速发展。若错误折叠SOD1通过类似家族性ALS的机制驱动部分非遗传性ALS患者的病理，这些患者可能代表这些疗法的未识别适用人群。然而，成功转化需要基于生物标志物的分层以区分携带该特定病理的个体。血浆错误折叠SOD1是ALS诊断分类的潜在生物标志物；然而，血浆错误折叠SOD1的特征仍不明确。本研究旨在表征小鼠模型和ALS患者中血浆错误折叠SOD1，以揭示其异常升高率、动态变化及血浆与中枢神经系统（CNS）样本间的关系。研究人员还研究了血浆错误折叠SOD1升高的非遗传性ALS患者的临床特征和结局。

研究背景方面，肌萎缩侧索硬化症（ALS）是一种由多样分子病理驱动的暴发性运动神经元疾病，涉及异常蛋白质质量控制、RNA代谢异常和轴突运输功能障碍。大多数ALS病例为非遗传性，5–10%为家族性，常见相关基因包括SOD1、C9orf72、TARDBP和FUS。超过95%的ALS患者运动神经元中存在细胞质TDP-43包涵体，被视为病理标志；携带SOD1和FUS突变的患者则表现相应错误折叠蛋白聚集。错误折叠SOD1病理曾被认为仅见于SOD1突变携带者，但研究已在缺乏SOD1突变的非遗传性和家族性ALS患者死后组织中检测到野生型SOD1聚集。研究人员此前发现19例非遗传性ALS患者中6例（32%）血浆错误折叠SOD1水平升高，该亚组表现独特的轴突兴奋性改变，即由超极化激活环核苷酸门控（HCN）电流驱动的内向整流增强；药理学抑制HCN通道可减轻神经毒性，提示错误折叠SOD1是病理驱动因素而非旁观者。鉴于SOD1靶向治疗（如tofersen等反义寡核苷酸）快速发展，识别该亚组在临床上具有紧迫性。若错误折叠SOD1通过类似家族性ALS的机制驱动部分非遗传性ALS患者病理，这些患者可能代表此类疗法的未识别适用人群。然而，成功转化需要基于生物标志物的分层。血浆错误折叠SOD1是ALS诊断分类的潜在生物标志物，但其特征尚不明确。本研究旨在表征小鼠模型和ALS患者中血浆错误折叠SOD1，揭示其异常升高率、动态变化及血浆与中枢神经系统（CNS）样本间关系，并研究血浆错误折叠SOD1升高的非遗传性ALS患者的临床特征和结局。研究人员发现，血浆错误折叠SOD1在携带SOD1突变的ALS患者和模型小鼠中均升高；25%的非SOD1基因突变ALS患者和22.2%的非遗传性ALS患者表现血浆错误折叠SOD1升高；在SOD1/G93A小鼠中，血浆错误折叠SOD1与脊髓错误折叠SOD1水平相关；在人类队列中，全部ALS病例合并分析时血浆与脑脊液（CSF）错误折叠SOD1水平显著相关，但排除SOD1突变ALS后该关联不再显著；血浆错误折叠SOD1升高主要出现在ALS患者中度疾病阶段；非遗传性ALS患者无论血浆错误折叠SOD1是否升高，其临床特征和结局相当。综上，血浆错误折叠SOD1可能作为ALS诊断分类的候选生物标志物，其特征为在SOD1相关ALS和部分非遗传性ALS患者疾病中度阶段升高。重要意义在于：血浆错误折叠SOD1定义了跨越家族性和非遗传性疾病经典界限的生物学 distinct 亚组；在超过20%的非遗传性ALS患者中检测到血浆错误折叠SOD1升高，提示“SOD1opathy”是涉及相当部分ALS人群的汇聚性病理通路；随着SOD1降低疗法成熟，血浆错误折叠SOD1可能提供可扩展的非侵入性生物标志物以识别最可能获益的患者，尤其在前SOD1突变ALS中，同时将精准治疗机会扩展至部分非遗传性ALS患者；未来临床试验中，血浆错误折叠SOD1筛查可作为招募处于“活动窗口”（如ALSFRS-R 17–45）患者的生物标志物。

关键技术方法方面（不超过250字）：研究使用携带人SOD1/G93A转基因的ALS小鼠模型（B6SJL-Tg(SOD1*G93A)1Gur/J，由台湾中央研究院Jun-An Chen教授赠予），以野生型同窝小鼠和Smn基因外显子7纯合缺失并敲入人SMN2基因的脊髓性肌萎缩症（SMA）小鼠（Smn?/?SMN2+/+）为对照，在症状前（2–3月龄）、早期症状（4.5月龄）、晚期症状（5.5月龄）及人道终点采集血浆和脊髓组织。临床队列来自2017年10月至2025年8月ALS登记库共207例，排除替代诊断14例和缺乏血浆样本33例，余160例经Gold Coast标准诊断，接受SOD1、C9orf72、TARDBP和FUS等常见ALS致病基因筛查，部分接受下一代基因测序，分为SOD1突变ALS（n=4）、非SOD1遗传突变ALS（n=12）和非遗传性ALS（n=144）；另纳入健康志愿者（n=26）和SMA患者（n=20）作为疾病对照。采用酶联疏水相互作用错误折叠蛋白（eHIMP）测定法，以生物素化异噁唑（b-isox）沉淀含低复杂度结构域蛋白，用SOD1抗体检测血浆错误折叠SOD1（mSOD1）水平，以健康对照均值加3个标准差（1.234）为预设操作界值；用ELISA测定血浆和CSF总SOD1浓度；用免疫组织化学检测脊髓胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性运动神经元中错误折叠SOD1及聚集体；用非还原Western blotting结合构象敏感性B8H10抗体检测脊髓错误折叠SOD1单体、二聚体和高分子量种属；统计学采用Mann–Whitney U检验、Kruskal–Wallis检验及Dunn多重比较、Fisher精确检验、简单线性回归、Kaplan-Meier生存分析和log-rank检验。

研究结果方面：（1）SOD1/G93A小鼠模型中血浆错误折叠SOD1的表征：血浆mSOD1水平在SOD1/G93A小鼠、野生型同窝小鼠和SMA小鼠间差异显著（Kruskal–Wallis H(2)=10.58，P=0.0004），Dunn多重比较显示SOD1/G93A小鼠血浆mSOD1水平显著高于SMA小鼠（校正P=0.0042），而与野生型小鼠及野生型与SMA小鼠间差异不显著；对SOD1/G93A小鼠纵向监测显示血浆mSOD1水平呈非线性轨迹，五个疾病阶段间差异显著（Kruskal–Wallis H(4)=16.47，P=0.0024），5.5–6月龄时显著高于2月龄、4月龄和4.5–5月龄（校正P分别为0.0268、0.0023和0.0119），5.5–6月龄时SOD1/G93A小鼠血浆mSOD1水平亦显著高于同龄野生型小鼠（Mann–Whitney U=1，P=0.0012），随后在人道终点数值下降但多重比较校正后差异不显著（校正P=0.1326）；血浆与脊髓提取物错误折叠SOD1水平呈显著正相关（R2=0.306，P=0.0499）。为阐明终末期下降机制，分析脊髓病理：含错误折叠SOD1的运动神经元百分比组间差异显著（Kruskal–Wallis H(4)=21.47，P=0.0003），5.5月龄和人道终点显著高于野生型（校正P=0.0023和0.0017）；脊髓运动神经元密度组间差异显著（Kruskal–Wallis H(4)=19.12，P=0.0007），5.5月龄和人道终点显著低于野生型（校正P=0.0235和0.0004）；含错误折叠SOD1聚集体的运动神经元百分比组间差异显著（Kruskal–Wallis H(4)=22.37，P=0.0002），人道终点高于3月龄（校正P=0.0210），5.5月龄和人道终点均高于野生型（校正P=0.0074和0.0004）；非还原免疫印迹检测到单体、二聚体和高分子量mSOD1反应种属，总B8H10反应性mSOD1/GAPDH在各疾病阶段总体差异显著（Kruskal–Wallis H(3)=8.128，P=0.0152），但Dunn校正后各两两比较均不显著。这些发现表明随着疾病进展mSOD1相关病理增加和运动神经元丢失，支持（但未证明）血浆mSOD1“升-降”模式反映初期蓄积随后因运动神经元池丢失和mSOD1隔离于不溶性细胞内聚集体而终末耗竭的假说。（2）SOD1突变患者血浆错误折叠SOD1的特征：4例携带SOD1突变（p.G94V、p.G10A和两例p.G139E）的家族性ALS患者（平均年龄55.5±12.9岁，女性75%）血浆错误折叠SOD1水平高于26例健康对照（平均年龄48.6±15.1岁，女性61.5%）（2.26±1.10 vs. 0.98±0.08，P<0.001）；3例多次采血患者所有血浆样本均显示异常高水平；患者3和4在发病1年内短期随访ALSFRS-R下降<12而系列血浆mSOD1水平保持相似；患者2在发病2年后血浆mSOD1从3.8降至1.8，伴随ALSFRS-R下降43，呈现类似小鼠人道终点数值下降的晚期下降。患者4接受每月tofersen治疗1年，治疗前血浆和CSF mSOD1异常升高，治疗后两者快速、平行且持续降低，提供单患者初步证据表明血浆mSOD1可能具有药效动力学反应性；CSF总SOD1浓度治疗后 modest 下降，而血浆总SOD1浓度高度变异无一致变化。（3）非SOD1突变ALS和非遗传性ALS患者血浆错误折叠SOD1水平的特征：血浆mSOD1水平在健康对照、SMA患者、SOD1突变ALS、非SOD1遗传ALS和非遗传性ALS间差异显著（Kruskal–Wallis H(4)=40.45，P<0.0001）；Dunn多重比较显示三个ALS组血浆mSOD1水平均高于健康对照（均校正P<0.0001）；SOD1突变ALS和非SOD1遗传ALS血浆mSOD1水平亦高于SMA（校正P=0.0028和0.0196），而非遗传性ALS与SMA间差异不显著（校正P=0.4526）；SOD1突变ALS血浆mSOD1水平高于非遗传性ALS（校正P=0.0287），SOD1突变与非SOD1遗传ALS间及非SOD1遗传与非遗传性ALS间差异不显著。12例非SOD1突变ALS患者中（C9orf72 n=3、TARDBP n=4、FUS n=3、OPTN n=2），25%（3/12，包括TARDBP、FUS或OPTN突变患者）检测到血浆mSOD1升高；非遗传性ALS队列中32例（22.2%）血浆mSOD1升高，与性别、年龄或起病模式（肢体或延髓起病）无显著关联。各组超过预设界值（1.234）的比例：26例健康对照无一超过（0/26，0%）；20例SMA患者中3例（15.0%）超过界值，与健康对照比例差异不显著（P=0.075）。进一步将非遗传性ALS患者血浆mSOD1水平与疾病持续时间和功能状态相关：疾病持续时间长（>3年）的患者较少出现高mSOD1水平；按ALSFRS-R分层显示中度残疾（ALSFRS-R 17–45）患者血浆mSOD1升高比例较高，达24.0%（29/121），而早期疾病（ALSFRS-R>45）为12.5%（2/16），晚期疾病（ALSFRS-R<17）为14.3%（1/7）。一例非遗传性ALS患者（ALS70）在超过6年随访中获得7份系列血浆样本，随着ALSFRS-R和医学研究委员会（MRC）总分下降及ALS King分期增加，血浆mSOD1初始正常但在疾病活动症状期显著升高，终末期最终下降；该单例说明性病例中mSOD1纵向变化与SOD1/G93A小鼠模型观察到的随疾病进展“升-降”动力学定性相似。（4）血浆和CSF错误折叠SOD1水平的相关性：160例有血浆样本的ALS患者中59例（36.9%）有相应CSF样本；有与无CSF样本患者的人口学和临床特征无差异，除有CSF样本患者疾病持续时间较短且更可能表现延髓起病症状。所有配对样本患者中血浆和CSF mSOD1水平显著相关（R2=0.4456，P<0.0001）；然而排除3例SOD1突变ALS后，在合并非遗传性和非SOD1遗传ALS队列中关联明显减弱且不再显著（n=56；R2=0.0344，P=0.1714）；同样仅限非遗传性ALS分析时无显著关联（n=52；R2=0.0224，P=0.2849）；3例SOD1突变ALS中血浆和CSF mSOD1水平呈强数值关联但未达统计学显著（R2=0.9821，P=0.0854）。这些敏感性分析表明总体队列中观察到的显著关联主要受SOD1突变病例影响。（5）血浆错误折叠SOD1升高的非遗传性ALS患者的临床特征：比较血浆mSOD1升高与正常的非遗传性ALS患者人口学和临床变量，血浆采样年龄、发病年龄、疾病持续时间、起病表型或功能状态均无统计学显著差异；以ALSFRS-R年下降率衡量的疾病进展率和生存分析在两组间相当；仅限ALSFRS-R 17–45患者分析时，上述特征和结局在血浆mSOD1升高与正常者间仍相似。

讨论部分总结：本研究表征了小鼠模型和ALS患者血浆错误折叠SOD1。研究人员证明所有携带SOD1突变基因的ALS患者和模型小鼠血浆错误折叠SOD1水平升高；值得注意的是，25%的非SOD1基因突变ALS患者和22.2%的非遗传性ALS患者表现血浆错误折叠SOD1升高；在SOD1/G93A小鼠中血浆mSOD1与脊髓mSOD1水平相关；人类队列中全部ALS病例合并分析时血浆与CSF mSOD1水平显著相关，但排除SOD1突变ALS后该关联不再显著；血浆错误折叠SOD1升高主要出现在ALS患者中度疾病阶段；非遗传性ALS患者无论血浆错误折叠SOD1是否升高，临床特征和结局相当。综上，血浆错误折叠SOD1可能作为ALS诊断分类的候选生物标志物，其特征为在SOD1相关ALS和部分非遗传性ALS患者疾病中度阶段升高。突变SOD1蛋白异常结构构象在SOD1突变ALS患者中产生错误折叠聚集体，新兴证据提示野生型SOD1蛋白可获得类似突变变体的毒性特性，如异常氧化化学、病理性线粒体膜对接和聚集倾向。既往死后研究报道非遗传性ALS和非SOD1遗传突变ALS患者脊髓和脑运动神经元中存在错误折叠SOD1免疫反应性；与这些发现一致，研究人员在100%的SOD1突变携带者以及25%的非SOD1突变ALS患者和22.2%的非遗传性ALS患者中检测到血浆错误折叠SOD1升高，支持异质性ALS人群中存在SOD1相关ALS患者亚组（所谓“SOD1opathy”患者）。携带TARDBP、C9orf72或FUS突变患者中存在错误折叠SOD1提示野生型SOD1错误折叠可能是细胞稳态失衡的下游后果而非原发性起始事件；几种机制可驱动此汇聚：TDP-43或FUS细胞质聚集体可能压倒蛋白稳态机制（包括热休克蛋白和泛素-蛋白酶体系统），从而损害SOD1等亚稳态蛋白的折叠或清除；氧化应激和线粒体功能障碍可促进野生型SOD1翻译后修饰（如半胱氨酸残基氧化），导致结构失稳和解折叠；已提出“朊病毒样”交叉播种机制，即一种蛋白（如TDP-43）的病理聚集体作为模板诱导其他易聚集蛋白错误折叠。研究人员发现错误折叠SOD1升高发生在多样遗传背景中，支持错误折叠SOD1是继发性但强毒性级联反应、可能加剧运动神经元变性且不同于原发遗传病因的观点；聚集SOD1种属对人多能干细胞衍生运动神经元直接有毒、导致选择性神经元死亡（即使无SOD1突变）的证据进一步支持这一点。与神经丝轻链倾向早期升高并保持升高或平台至疾病晚期不同，血浆错误折叠SOD1在SOD1/G93A小鼠中表现独特的阶段依赖性“升-降”或“倒U”轨迹，5.5–6月龄较早期疾病阶段显著升高，随后在人道终点数值下降；在一例纵向人类病例中观察到定性相似的波动。ALS小鼠中的病理相关性提供合理解释机制：运动神经元池耗竭减少蛋白来源，剩余错误折叠SOD1可能日益隔离于大型不溶性包涵体，较不可能释放到间质液和血浆；SOD1溶解度随疾病进展显著下降的生化研究支持该隔离假说。分层分析强调这一点：错误折叠SOD1升高最高患病率（24.0%）见于中度残疾（ALSFRS-R 17–45）患者；因此ALS患者“正常”错误折叠SOD1水平可能意味着患者真正缺乏SOD1病理，或采样位于潜在“检测窗口”之外（过早或过晚）；这种“状态依赖性”动态可能有助于解释既往研究中单时间点采样常产生关于非遗传性ALS错误折叠SOD1患病率的矛盾结果。Da Cruz等应用七种构象敏感性抗体结合免疫组织化学、免疫荧光和免疫沉淀于尸检组织，发现SOD1突变患者错误折叠SOD1易检测，而散发性和非SOD1遗传病例脊髓和皮质低于检测限；该阴性结果不能归因于方法不敏感，研究人员不认为其数据反驳该结果；三点差异有助于调和：研究人员测量循环血浆种属而非CNS组织，两者不必对应；b-isox基于疏水性而非结构表位选择，两种方法不会报告相同非天然SOD1亚群；尸检材料代表终末期疾病，可能不对应循环mSOD1最易检测的阶段；该调和是假说而非证明，检验需阶段分层组织与同期血浆采样。开发可靠神经疾病血液生物标志物的关键挑战是证明生物流体标志物的特异性并建立血液与CNS样本联系。SOD1/G93A小鼠血浆mSOD1水平高于SMA疾病对照，尽管与野生型同窝小鼠校正比较未达统计学显著；此外血浆错误折叠SOD1水平在100%的SOD1突变ALS患者中升高，而在0%健康对照和15% SMA患者中升高；这些结果支持进一步评估血浆mSOD1作为SOD1相关ALS候选生物标志物。SOD1/G93A小鼠模型中血浆mSOD1水平与脊髓提取物水平相关；临床队列中全部ALS病例合并分析时血浆与CSF mSOD1显著相关，但排除SOD1突变ALS病例后该关联明显减弱且不再显著，仅非遗传性ALS分析时无显著关联；这些发现表明总体血浆–CSF关联主要受SOD1突变亚组影响；非遗传性ALS中血浆mSOD1是否反映CNS mSOD1仍不确定。另一方面CSF或血浆总SOD1水平与CSF错误折叠SOD1水平不相关。值得注意的是，一例接受每月tofersen注射患者治疗1年后CSF和血浆错误折叠SOD1水平显著降低；然而CSF总SOD1浓度 modest 下降（类似既往临床试验结果），血浆总SOD1浓度高度变异；一例SOD1突变患者tofersen治疗后血浆和CSF mSOD1平行降低提供初步证据表明血浆mSOD1可能具有药效动力学反应性，而血浆总SOD1浓度不能完全代表疾病状况；鉴于CSF SOD1已被确立为SOD1降低疗法的优良药效动力学标志物，研究人员发现进一步提示血浆构象特异性错误折叠SOD1可提供更易获取的非侵入性替代方法监测靶点结合。值得注意的是，非遗传性ALS患者无论血浆错误折叠SOD1是否升高，其临床特征（包括年龄、性别、起病模式和疾病严重程度）以及结局（如疾病侵袭性和生存）均无法区分；因此识别该特定非遗传性ALS亚组需要直接生物流体定量；该观察与SOD1突变携带者表现可变特征、仅凭症状无法与非遗传性病例区分的事实一致。此外神经兴奋性测试作为有价值的功能辅助手段，因为电流-电压阈值曲线中特征性内向整流增强模式在错误折叠SOD1升高的非遗传性患者、SOD1突变携带者和SOD1转基因小鼠中共有；整合血浆错误折叠SOD1水平和周围神经兴奋性测试等生物标志物可能进一步提高非遗传性“SOD1opathy”ALS患者的诊断特异性。识别错误折叠SOD1相关非遗传性ALS的主要临床紧迫性在于SOD1靶向治疗的快速发展；反义寡核苷酸tofersen已证明能降低SOD1和神经丝水平并减缓SOD1突变ALS神经变性；此外错误折叠SOD1导向免疫疗法已显示临床前疗效，其他SOD1降低方法（包括siRNA偶联物）正进入临床开发；鉴于既往试验仅聚焦SOD1突变ALS，若野生型错误折叠SOD1通过类似突变SOD1机制发挥毒性，则携带该病理的非遗传性ALS患者若循环mSOD1信号的生物学相关性被确认，可能潜在受益于这些方法；野生型错误折叠SOD1可镜像家族性模型中观察到的线粒体毒性、提示共享病理靶点的发现强调了这一潜力。值得注意的是，研究人员近期电生理工作已将非遗传性ALS中血浆错误折叠SOD1升高与特定轴突通道病（如HCN通道功能障碍）联系起来，与SOD1突变患者和小鼠中所见相同；在携带突变SOD1转基因的ALS小鼠中药理学抑制HCN通道可部分逆转疾病表型；这些发现支持该亚组SOD1相关病理生理学的生物学相关性，尽管它们未确立循环mSOD1信号本身具有因果致病性；错误折叠SOD1特异性抗体减轻神经毒性的治疗疗效进一步验证生物流体中检测的错误折叠种属是疾病过程的主要驱动因素；未来临床试验必须研究SOD1靶向治疗在高血浆错误折叠SOD1水平ALS患者中的治疗效果。本研究若干局限性：最重要局限性涉及测定验证和动物模型；未测试一组定义构象状态的重组SOD1蛋白；该测定此前已用SOD1/G93A和野生型组织提取物进行过分析验证，但其在定义构象状态的纯化SOD1种属间的选择性尚未全面确立；同时小鼠实验未包括携带人野生型SOD1转基因的小鼠；由于SOD1/G93A小鼠过表达人SOD1而野生型同窝小鼠和SMA小鼠不过表达，SOD1/G93A动物中较高信号不能与转基因过表达本身效应分离。临床队列方面，研究人员缺乏队列中非遗传性ALS患者匹配的死后组织；非遗传性ALS患者高血浆错误折叠SOD1者细胞内SOD1聚集体的确定性确认仍需未来尸检研究确立；此外SOD1突变携带者（n=4）和非SOD1遗传病例（n=12）数量相对较小，尽管这反映这些突变在亚洲人群相较白人队列的罕见性。第三，“升-降”动态意味着单时间点测量存在错误分类风险；检测“阴性”的患者可能在几个月前为“阳性”；这强调临床实践中需要纵向监测而非横断面筛查。第四，必须承认错误折叠SOD1可能从非神经元来源（如胶质细胞或外周组织）释放；尽管多数存档CSF标本无或极少红细胞污染，血红蛋白未系统测量，个别样本中残余血液污染不能完全排除。最后，研究人员ALS患者未接受常规神经兴奋性测试；未来研究应探索血浆错误折叠SOD1水平的电生理相关性以加强生物标志物与运动神经元功能障碍间的机制联系。研究结论部分翻译：总之，血浆错误折叠SOD1定义了跨越家族性和非遗传性疾病经典界限的生物学 distinct ALS患者亚组。通过验证该生物标志物的可靠性，研究人员提供了在诊断和疾病进展背景下解读血浆错误折叠SOD1水平的框架。在超过20%的非遗传性ALS患者中检测到血浆错误折叠SOD1升高，提示“SOD1opathy”是涉及相当部分ALS人群的汇聚性病理通路。随着SOD1降低疗法成熟，血浆错误折叠SOD1可能提供可扩展的非侵入性生物标志物以识别最可能获益的患者，尤其在前SOD1突变ALS中，同时将精准治疗机会扩展至部分非遗传性ALS患者。未来临床试验中，血浆错误折叠SOD1筛查可作为招募处于“活动窗口”（如ALSFRS-R 17–45）患者的生物标志物，以最大化靶点结合概率。