《International Journal of Molecular Sciences》：Regimen-Dependent Anti-Cytokine and Immune-Checkpoint Autoantibodies Are Associated with Immunotherapy Toxicity and Response in Melanoma
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专业摘要翻译：
成纤维细胞生长因子23（FGF23）和骨钙素参与矿物质与骨代谢，但二者在慢性肾脏病（CKD）中的关系仍未得到充分阐明。本横断面研究探讨了FGF23与羧化不全骨钙素（Glu-OC）之间的关联，并评估该关联在校正肾功能后是否仍然存在。研究纳入80名
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成纤维细胞生长因子23（FGF23）和骨钙素参与矿物质与骨代谢，但二者在慢性肾脏病（CKD）中的关系仍未得到充分阐明。本横断面研究探讨了FGF23与羧化不全骨钙素（Glu-OC）之间的关联，并评估该关联在校正肾功能后是否仍然存在。研究纳入80名成人受试者：12名健康对照者和68名非透析CKD G1–G4期患者。研究人员采用Spearman相关分析、校正估算肾小球滤过率（eGFR）的偏相关分析以及互补的多变量线性回归模型评估关联。在CKD患者中，FGF23与eGFR呈负相关（ρ = ?0.346，p = 0.004），与Glu-OC呈负相关（ρ = ?0.344，p = 0.004），与血清肌酐呈正相关（ρ = 0.299，p = 0.013）。FGF23与Glu-OC之间的负相关在校正eGFR后仍然显著（偏ρ = ?0.475，p < 0.001）。在多变量回归模型中，Glu-OC与FGF23呈负相关（标准化β = ?0.258，p = 0.024），而碱性磷酸酶与FGF23呈正相关（β = 0.369，p = 0.001）。在以Glu-OC为因变量的模型中，FGF23（β = ?0.266，p = 0.020）和血清钙（β = ?0.366，p = 0.002）与Glu-OC呈负相关。在CKD G1–G3期观察到FGF23与Glu-OC之间存在显著的负相关，但在G4期或对照组中未观察到。这些发现支持非透析CKD中FGF23与Glu-OC之间存在关联，并为进一步研究CKD相关矿物质和骨异常（CKD-MBD）中潜在的FGF23–Glu-OC轴提供了依据。需要纵向和机制性研究来阐明该关联的性质及临床相关性。
论文解读文章：
一、研究背景与问题
慢性肾脏病-矿物质和骨异常（CKD-MBD）是以矿物质代谢紊乱、骨转换异常、骨矿化及结构异常以及血管钙化为特征的系统性综合征。早期紊乱反映肾-骨相互作用的改变，并可能伴随磷酸盐潴留、成纤维细胞生长因子23（FGF23）信号改变、维生素D代谢受损以及继发性甲状旁腺功能亢进的发展。骨钙素是由成骨细胞谱系细胞合成的非胶原蛋白，与骨形成相关。维生素K依赖性γ-羧化产生羧化骨钙素（Gla-OC），而部分或完全羧化不全的形式以羧化不全骨钙素（Glu-OC）形式循环。FGF23是由骨细胞和成骨细胞谱系细胞产生的骨源性内分泌激素，在α-Klotho存在下通过成纤维细胞生长因子受体发挥作用，促进肾脏磷酸盐排泄并抑制肾脏1,25-二羟维生素D的合成。随着肾功能下降，FGF23浓度升高，这通常被认为是对磷酸盐稳态紊乱的早期适应性反应。
尽管对FGF23和骨钙素在CKD中作用的认识不断深入，但循环FGF23与Glu-OC之间的关系，尤其是在考虑肾功能后的关系，仍未得到充分表征。肾功能下降可能通过肾清除率变化及其他疾病相关过程影响循环FGF23浓度。因此，观察到的FGF23与Glu-OC之间的关联可能部分反映肾功能差异或CKD严重程度，而非两种生物标志物之间的特定关系。此外，血清钙是否与循环Glu-OC独立相关，以及血清钙和骨转换标志物是否有助于更全面地表征FGF23与Glu-OC之间的关联，仍不清楚。基于这些考虑，研究人员假设非透析CKD成人中循环FGF23与Glu-OC存在关联，且该关联在校正肾功能后可能仍然存在。
二、研究内容与结论
本研究为横断面设计，纳入80名年龄33–84岁的成人：12名健康对照者和68名非透析CKD G1–G4期患者，按KDIGO标准分类，eGFR采用2021年CKD-EPI肌酐方程计算。研究人员同时检测了FGF23、Glu-OC、Gla-OC、I型前胶原氨基端前肽（P1NP）、I型胶原交联羧基端肽（CTX-1）、碱性磷酸酶（ALP）、甲状旁腺激素（PTH）、钙、磷酸盐、总25羟维生素D和α-Klotho。研究发现CKD进展与矿物质和骨代谢的特征性紊乱相关，包括钙和总25(OH)D降低，磷酸盐、PTH和ALP升高，以及P1NP显著升高。Glu-OC、Gla-OC和FGF23的组间显著差异进一步支持肾功能恶化时骨和矿物质代谢调节的改变。CKD病因分布方面，高血压肾病和糖尿病肾病最常见，分别占35.3%和33.8%。
三、主要技术方法
研究人员采用以下关键技术方法：横断面研究设计，纳入健康对照者和非透析CKD G1–G4期患者；采用2021年CKD-EPI肌酐方程计算eGFR；使用罗氏cobas c 311临床化学分析仪检测血清肌酐、无机磷酸盐和ALP；使用罗氏cobas e 411分析仪以电化学发光免疫分析技术检测PTH和总25(OH)D；使用商品化酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测Glu-OC、Gla-OC、FGF23、P1NP、CTX-1和α-Klotho；统计方法包括Spearman秩相关分析、基于秩转换变量的偏相关分析、多变量线性回归（后退法）、Dunn-Bonferroni事后检验以及基于10,000次重抽样的自举法（Bootstrap）分析。
四、研究结果
2.1 研究人群的临床和生化特征：按肾功能障碍程度分层的组间比较显示，性别分布无显著差异，而年龄差异显著。eGFR从对照组的103.00 mL/min/1.73 m2逐步下降至CKD G4期的16.50 mL/min/1.73 m2，血清肌酐显著升高。矿物质代谢参数出现显著变化：血清钙降低，无机磷酸盐和PTH随肾功能恶化而升高。Glu-OC组间差异显著，从对照组的0.59 ng/mL升至CKD G3期的5.22 ng/mL，G4期略有下降。FGF23组间差异显著，CKD G1期中位数最低（83.40 pg/mL），CKD G4期最高（208.65 pg/mL），呈非线性模式。α-Klotho组间无显著差异。P1NP随肾功能恶化显著升高。
2.2 FGF23和Glu-OC与肾功能及矿物质-骨代谢的关联：在CKD患者中，FGF23与eGFR呈负相关（ρ = ?0.346，p = 0.004），与血清肌酐呈正相关（ρ = 0.299，p = 0.013），与Glu-OC呈负相关（ρ = ?0.344，p = 0.004），与血清磷酸盐（ρ = 0.257，p = 0.034）和总ALP（ρ = 0.286，p = 0.018）呈正相关。校正eGFR后，FGF23与Glu-OC的负相关仍然显著（偏相关系数 = ?0.475，p < 0.001），FGF23与P1NP呈负相关（偏相关系数 = ?0.284，p = 0.020），与血清钙呈正相关（偏相关系数 = 0.271，p = 0.027）。Glu-OC与eGFR呈负相关（ρ = ?0.252，p = 0.038），与P1NP呈正相关（ρ = 0.382，p = 0.001），与血清钙呈负相关（ρ = ?0.405，p < 0.001）。校正eGFR后这些关联仍然显著。敏感性分析显示，同时校正eGFR和α-Klotho后，FGF23与Glu-OC的负相关仍然显著（偏相关系数 = ?0.481，p < 0.001）。
2.3 对照组及不同CKD分期中FGF23与Glu-OC的关联：在CKD G1期（ρ = ?0.768，p < 0.001）、G2期（ρ = ?0.511，p = 0.043）和G3期（ρ = ?0.541，p = 0.021）观察到显著的负相关。CKD G4期相关系数为负但未达统计学显著（ρ = ?0.366，p = 0.163）。对照组无显著相关（ρ = ?0.086，p = 0.791）。自举法分析显示，CKD G1、G2和G3期的偏差校正加速（BCa）95%置信区间排除零，而G4期和对照组的区间包含零。
2.4 FGF23与Glu-OC相互关联的多变量线性回归分析：以FGF23为因变量的最终模型保留eGFR、ALP和Glu-OC，模型显著（F(3,64) = 7.842；p < 0.001），解释FGF23浓度26.9%的方差。ALP与FGF23呈显著正相关（β = 0.369；p = 0.001），Glu-OC与FGF23浓度呈显著负相关（β = ?0.258；p = 0.024），eGFR与FGF23呈负相关且接近统计学显著（β = ?0.226；p = 0.053）。以Glu-OC为因变量的最终模型显著（F(3,64) = 6.409；p = 0.001），解释23.1%的方差。年龄与Glu-OC呈显著正相关（β = 0.353；p = 0.003），血清钙（β = ?0.366；p = 0.002）和FGF23（β = ?0.266；p = 0.020）与Glu-OC独立负相关。
五、讨论与结论
讨论部分指出，本研究的主要发现是FGF23与Glu-OC之间的负相关，该关联在校正eGFR后增强，并在互补的多变量回归模型中持续存在，提示肾功能差异本身不能完全解释观察到的关系。分期分析显示CKD G1–G3期存在显著负相关，而G4期和对照组未达统计学显著，这可能与晚期CKD中钙-磷酸盐稳态紊乱更显著、PTH和维生素D变化、骨转换差异以及CKD-MBD表型的个体异质性更大有关。另一个重要发现是总血清钙与Glu-OC呈负相关，但该研究未测量离子钙，白蛋白校正钙也未计算，限制了对这一关系的机制性解释。Glu-OC与P1NP的正相关支持Glu-OC与成骨细胞谱系细胞活性的关联。关于α-Klotho，循环α-Klotho浓度不一定反映组织特异性膜表达或局部Klotho依赖性信号活性，因此未观察到显著相关不能排除Klotho参与相关过程。
研究结论为：在这项非透析CKD患者的横断面研究中，血清FGF23与Glu-OC独立负相关，且该关联在校正eGFR后仍然存在。Glu-OC还与血清钙负相关、与P1NP正相关，表明其与矿物质稳态和骨转换存在关系。分期分析显示CKD G1–G3期存在显著负相关，但G4期和对照组未达显著，这些亚组结果因样本量有限应谨慎解读。总体而言，这些结果支持非透析CKD中FGF23与Glu-OC之间存在关联，为CKD-MBD中潜在FGF23–Glu-OC轴的进一步研究提供了依据。然而，横断面设计不能确立因果关系或阐明潜在生物学机制，需要更大规模的纵向研究和机制性研究来确定该关联的性质及其是否提供超越既定肾功能和矿物质骨代谢标志物的临床意义。
