模块化Mono-Bac系统实现重组腺相关病毒的高效生产

《Communications Biology》：A mMono-Bac1.0 system for recombinant adeno-associated virus vectors with higher flexibility, throughput and yield

　　

摘要

重组腺相关病毒（rAAV）在治疗应用中潜力巨大，但高昂的生产成本限制了其广泛临床应用，凸显了生产突破的迫切需要。在此，我们建立了一个模块化的Mono-Bac系统，使用p24-NanoLuciferase（Nluc）报告杆粒（Bacmid）进行rAAV生产，命名为mMono-Bac1.0，同时提高了生产灵活性、通量和产量。该系统向基于pFD/Cap-(ITR-GOI)-Rep转移载体的Mono-Bac框架引入了两项关键技术。首先，模块化pGB-AAV供体构建策略实现了一步式全合一AAV转移载体组装，并轻松切换衣壳或目标基因（GOIs），从而促进高通量组合生产。其次，工程化p24-Nluc杆粒能够快速（少于5分钟）定量感染性重组杆状病毒（rBV）滴度，并实时监测培养上清液中的Nluc活性，以确定最佳收获点（log RLU ~ 6.5），从而最大化rAAV产量。该系统有潜力推动基于杆状病毒表达载体（BEV）的rAAV生产进入数据驱动时代，支持高效的工业规模生产。