TAF9B通过TBP依赖的转录激活ADAM17促进食管鳞状细胞癌进展

《Cellular Signalling》：TAF9B promotes esophageal squamous cell carcinoma progression through TBP-dependent transcriptional activation of ADAM17

　　

摘要

食管鳞状细胞癌（ESCC）是一种常见的恶性肿瘤。TATA结合蛋白相关因子9B（TAF9B）对于调控RNA聚合酶II介导的转录至关重要，而这种转录水平上的调控与多种肿瘤的发生密切相关，是一个复杂的过程。本研究旨在探讨TAF9B在ESCC中的表达及其对患者预后的潜在影响。实时定量聚合酶链反应分析显示，TAF9B在ESCC组织中的表达水平显著上调（P?=?0.0039）。Kaplan-Meier生存分析表明，TAF9B低表达患者的总生存期优于高表达患者（P?=?0.01）。本研究表明TAF9B在ESCC中高表达，并可能对ESCC患者具有预后相关性。进一步研究发现，敲低TAF9B可在体外和体内抑制ESCC细胞的增殖。转录组测序分析和验证实验证实，解整合素金属蛋白酶17（ADAM17）是受TAF9B调控的下游靶基因。我们的研究表明，TAF9B促进TATA结合蛋白在ADAM17启动子上的占据，并上调ADAM17的表达。这一过程进一步激活TNF-α/NF-κB信号通路，抑制ESCC细胞的凋亡。总的来说，TAF9B在ESCC中作为一种新型致癌因子，促进肿瘤进展。

引言

食管癌已成为威胁人类生命的疾病，2022年估计有51.1万新发病例和44.5万癌症相关死亡[1]。食管癌是全球癌症死亡的第7大原因，也是全球第11位最常见的癌症，五年生存率约为15%–25%[1]，[2]。相比之下，在中国，食管癌是第六位最常见的恶性肿瘤，也是癌症相关死亡的第四大原因，占全球所有新发食管癌病例的近一半[3]，[4]。食管鳞状细胞癌（ESCC）占所有病例的90%[5]，[6]。迄今为止，ESCC的临床管理仍然依赖于广泛淋巴结清扫的手术切除，以及辅助化疗和放疗[7]。然而，由于术后高复发和转移率，ESCC患者的预后仍然很差[8]。肿瘤发生被广泛认为是一个多因素驱动的复杂过程。此外，很少有ESCC的预后生物标志物被转化为常规临床应用[9]，[10]，[11]。因此，探索ESCC的发病机制并识别与ESCC相关的异常表达生物标志物，对于促进早期诊断、改善食管切除术患者的预后以及指导更精准的治疗方案至关重要。

RNA聚合酶II的转录起始需要转录因子IID（TFIID），它由TATA结合蛋白（TBP）和一组进化上保守的蛋白质组成，这些蛋白质被称为TBP相关因子（TAFs）[12]，[13]。多项独立研究表明，TAFs参与共激活复合物的形成，并作为核心启动子识别因子执行基线转录，这取决于TAF亚基；事实上，绝大多数RNA Pol II基因是TAF依赖的[14]，[15]。其中，由TAF9旁系同源基因编码的TATA结合蛋白相关因子9B（TAF9B）代表了一个新的亚基[16]。TAF9B在多种细胞系中表达，以细胞类型特异性的方式表现出启动子和增强子靶向活性，并在神经元分化时上调，在体内控制神经元基因表达[17]。此外，TAF9B对于人类细胞生长至关重要；其敲低可减少HeLa细胞的生长并诱导凋亡[16]，[18]。此外，杂合性缺失在癌症中常见[19]。Deryusheva等人证明，TAF9B基因中存在杂合性缺失与乳腺癌患者较低的无转移生存期相关，表明其作为预后生物标志物的潜力[20]。尽管如此，TAF9B在人类恶性肿瘤中调控转录起始的作用仍不清楚。基于一项研究TAF9B在促进细胞生长和分化中作用的研究，我们假设TAF9B可能以不同于其在正常细胞中的方式影响肿瘤细胞的转录活性。然而，TAF9B在包括ESCC在内的实体瘤中的表达和功能尚未得到充分探索。

解整合素金属蛋白酶17（ADAM17），一种广泛表达的跨膜蛋白，介导各种前体膜蛋白的蛋白水解切割，并在炎症调节、细胞增殖和程序性细胞死亡等若干生理过程中发挥关键作用[21]。ADAM17从根本上参与多种肿瘤类型的发生和进展，包括肺癌[22]、胃癌[23]、结直肠癌[24]和乳腺癌[25]。在本研究中，我们发现TAF9B调控ADAM17的表达，从而激活TNF-α/NF-κB信号通路，抑制肿瘤细胞凋亡，促进ESCC的进展。

在本研究中，初步观察表明，通过实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白质印迹（WB）分析，TAF9B在ESCC肿瘤组织中相对高表达。生存分析显示，TAF9B高表达与ESCC患者的不良预后显著相关。此外，我们发现敲低TAF9B在体外抑制了ESCC细胞的增殖、迁移和活力，而ADAM17的过表达部分逆转了由TAF9B敲低引起的抑制作用。机制上，TAF9B通过增强TBP的功能和调控ADAM17的表达来激活TNF-α/NF-κB信号通路，从而促进ESCC的进展。

章节片段

ESCC组织标本和临床信息

所有从齐鲁医院胸外科获取的人体组织样本立即在液氮中速冻，随后储存于?80?°C。所有入组患者的临床信息从医院信息系统中检索。本研究纳入2019年6月至2021年6月期间诊断为ESCC的患者。无失访患者，中位随访时间为51.40个月（95% CI: 43.856–58.944）。手术日期为

TAF9B在ESCC组织和细胞中的表达上调

使用在线数据库（gepia.cancer-pku.cn），我们发现TAF9B在食管癌（包括ESCC和食管腺癌）组织中高表达（图1A），且TAF9B高表达患者的总生存期短于低表达患者（图1B）。进一步进行WB检测肿瘤与正常组织之间TAF9B蛋白表达的差异。TAF9B蛋白水平在肿瘤组织中通常高于配对邻近正常组织

讨论

ESCC是中国癌症相关死亡的主要原因之一。尽管许多研究已确定ESCC致癌的新贡献因素，可能为诊断、预后和治疗提供信息，但ESCC的管理仍然具有挑战性，目前临床上尚无获批的个体化靶向治疗[26]。生物标志物的持续开发将有助于预测ESCC患者的预后和治疗反应。

在我们的研究中，我们展示了表达谱和

结论

我们的研究首次报道TAF9B可能是ESCC的潜在预后因素。研究表明TAF9B在ESCC组织中上调，并与不良预后正相关。机制上，TAF9B促进TBP在ADAM17启动子上的占据，导致ADAM17表达上调，从而进一步激活TNF-α/NF-κB信号通路并促进ESCC进展（图6J）。我们的研究揭示了TAF9B在ESCC中的机制，并表明其潜在

CRediT作者贡献声明

Zhanpeng Tang: 写作 – 审阅与编辑、写作 – 原稿、调查、资金获取、概念化。 Chuanle Cheng: 写作 – 原稿、可视化、调查、形式分析、数据管理。 Yijun Ma: 写作 – 原稿、数据管理。 Zitong Feng: 写作 – 原稿、形式分析。 Jianqing Zhang: 写作 – 原稿、数据管理。 Lei Qi: 写作 – 原稿、验证、资金获取。 Lin Li: 写作 – 审阅与编辑，

参与同意

所有患者均知情同意参与本研究。

出版同意

所有作者已阅读并批准最终稿件。

伦理批准

本研究获得山东大学齐鲁医院伦理委员会正式批准（批准号：KYLL-202412-034-1）。此外，所有动物实验均获得齐鲁医院动物伦理委员会批准（批准号：DWLL-202500445）。本研究按照《赫尔辛基宣言》进行。

资助

本工作受山东省自然科学基金资助（基金号：ZR2023MH261、ZR2026QC1771）。

利益冲突声明

作者声明，没有已知的竞争经济利益或个人关系可能影响本论文所报告的工作。

致谢

我们感谢山东大学齐鲁医院基础医学研究中心提供的咨询和仪器使用，支持了本工作。

Zhanpeng Tang|Chuanle Cheng|Yijun Ma|Zitong Feng|Jianqing Zhang|Lei Qi|Lin Li

山东大学齐鲁医院胸外科，济南，山东 250012，中国