《Journal of Dermatological Science》：Non-Lesional Skin Reflects Disease Activity in Pediatric Atopic Dermatitis: Inflammatory Biomarker Profiling Using Skin Swabs
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•在特应性皮炎（AD）中，皮损（LS）与非皮损（NL）皮肤呈现不同的生物标志物谱。
•非皮损（NL）生物标志物与临床疾病严重度相关。
•白细胞介素-8（IL-8）在皮损（LS）皮肤中显著升高。
•炎症生物标志物水平随儿童年龄组变化。
•非皮损（NL）皮肤反映特
•在特应性皮炎（AD）中，皮损（LS）与非皮损（NL）皮肤呈现不同的生物标志物谱。
•非皮损（NL）生物标志物与临床疾病严重度相关。
•白细胞介素-8（IL-8）在皮损（LS）皮肤中显著升高。
•炎症生物标志物水平随儿童年龄组变化。
•非皮损（NL）皮肤反映特应性皮炎（AD）的疾病活动度。
特应性皮炎（AD；一种慢性炎症性皮肤病）具有异质性免疫失调和临床表型变异，不同儿童年龄组在皮肤和血液中的炎症通路存在差异，提示疾病生物学随年龄变化。随着AD免疫学表征和靶向治疗发展，临床需要可靠评估皮肤炎症活动、指导治疗选择和监测疗效的方法。儿童对活检等有创采样耐受性差，需局麻且存在不适、出血、感染和瘢痕风险，因此微创或无创、可重复采样方法受到关注。胶带剥离（tape-stripping）和皮肤拭子（skin swabs）是主要方法；胶带剥离在儿童AD中证据较多，但存在胶带类型、采样深度和处理标准化不足及缺乏验证临床平台的问题；皮肤拭子简单快速、设备要求低，但尚缺乏数据证明其能捕获AD相关分子变化，且既往拭子研究多聚焦疾病预测。基于此，研究人员开展横断面探索性观察研究，评估浅表皮肤拭子能否捕获既往报道的AD生物标志物在皮损（LS；lesional）和非皮损（NL；non-lesional）皮肤中的变化，并按儿童年龄组和AD活动度分层，探索与临床严重度的相关性。研究在三级儿童皮肤科中心纳入98例儿童AD患者，结论提示非皮损皮肤可反映疾病活动，白细胞介素-8（IL-8；一种趋化因子）为最突出标志物，支持皮肤拭子作为儿童AD无创监测工具进一步研究。
关键方法方面，研究为横断面、探索性、观察性研究，样本队列来源于三级儿童皮肤科中心，纳入98例儿童AD患者（婴儿0-5岁40例、儿童6-11岁37例、青少年12-18岁21例）。采集同一肢体的LS与远离病变的NL配对皮肤拭子；拭子经磷酸盐缓冲液（PBS）预湿，在5 cm区域以标准化压力来回20次。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素（IL）-1α、IL-1β、IL-8、IL-6、IL-36γ及白蛋白、激肽释放酶5（KLK5）、IL-1受体拮抗剂（IL-1RA），氧自由基吸收能力（ORAC）测总抗氧化能力，二辛可宁酸（BCA）法测总蛋白。临床严重度用湿疹面积和严重度指数（EASI）、研究者整体评估（IGA）、体表面积（BSA）和特应性皮炎控制工具（ADCT）评估；生物标志物经log
2转换后行t检验和Spearman相关，探索性设计以p<0.05为阈值且未多重校正。
3.1 浅表拭子采样可检测LS皮肤中更高生物标志物水平（Superficial swab sampling detects higher biomarker levels in LS skin）
研究人员对98例儿童AD患者的配对LS/NL拭子进行9种生物标志物及总蛋白分析。全队列中，除IL-1α外，LS所有标志物均显著高于NL（p<0.01）；除IL-1α和ORAC外，所有标志物LS/NL倍数变化（FCH）>1.8，范围从IL-36γ的1.9至IL-6的4.7和IL-8的6.7。排除接受系统治疗患者的敏感性分析结果相似，主要LS与NL差异保留。结论是浅表拭子可捕获AD相关LS-NL差异。
3.2 婴儿和青少年呈现更高LS生物标志物水平（Infants and adolescents present greater LS biomarker levels）
按年龄分层，白蛋白、IL-1β、IL-1RA、IL-6、IL-8、KLK5、ORAC和总蛋白的LS水平显著高于NL；仅IL-1α和IL-36γ未在各年龄组显示显著LS-NL增加。合并所有标志物比较显示，青少年LS标志物水平显著高于儿童（NL无差异），婴儿与儿童或青少年LS水平相当。儿童LS特定标志物较低：婴儿LS白蛋白、IL-1RA和IL-8显著升高，青少年LS IL-1β和KLK5显著更高（p<0.05）。NL样本除IL-1α外各年龄组无显著差异；IL-1α在儿童LS和NL均高于婴儿，提示年龄相关而非AD相关升高。结论为年龄组间LS炎症标志物存在差异，婴儿和青少年更突出。
3.3 拭子样本可检测中重度AD更高生物标志物水平（Swab-collected samples detect greater biomarker levels in moderate-to-severe AD）
按IGA分为轻度（1-2，n=44）和中重度（3-4，n=54）后，各严重度内除IL-1α外所有标志物LS显著高于NL（p<0.05）。KLK5、IL-1β、IL-6、IL-8和总蛋白在中重度LS显著高于轻度LS（p<0.05）；IL-1β甚至NL在中重度高于轻度；无标志物在轻度高于中重度。Spearman分析显示LS中EASI与IL-8、KLK5等呈弱但显著相关（0.22≤ρ≤0.42，p<0.05），而NL标志物与严重度相关性更强；ρ≥0.4主要见于NL，包括白蛋白与EASI（ρ=0.51）和IGA（ρ=0.48）、IL-8与IGA（ρ=0.47）、EASI（ρ=0.46）和ADCT（ρ=0.41）（均p<0.001）；LS仅IL-8和KLK5与EASI的ρ=0.42和0.40。年龄相关：IL-1α在LS/NL的ρ=0.37/0.32，ORAC在LS/NL的ρ=0.26/0.29，均未达ρ≥0.4；NL-IL-8与年龄负相关（ρ=-0.36），LS-白蛋白（ρ=-0.21）。治疗状态与任何标志物不相关。结论为中重度AD标志物更高，NL标志物与临床严重度更稳健相关，IL-8突出。
讨论部分总结：皮肤拭子作为无创方法，简单快速、设备要求低、可定点采样且无需专门培训，与胶带剥离相比标准化问题较少。本研究大样本显示拭子可捕获LS-NL多数AD相关标志物差异，IL-8最佳；IL-8为先天免疫趋化因子，参与Th2极化皮肤环境中的细胞趋化，并在环孢素、NB-UVB、dupilumab治疗后下调，也与其他过敏性疾病相关；其浅表采样更易检测，与活检和胶带剥离结果一致。IL-6、IL-1β、IL-1RA、IL-36γ、KLK5、总蛋白和白蛋白在LS升高，ORAC仅轻微升高，IL-1α为唯一LS-NL相当标志物。NL标志物与严重度相关性更强，原文提出可能因LS水平普遍升高压缩变异度，而NL动态范围更宽。局限性包括探索性、标志物panel有限、缺乏足够功效年龄匹配健康对照、部分患者同时治疗、单时间点采样、IL-36γ仅61例、局部病变严重度未正式评估、三级中心中重度过代表；需外部队列验证。
研究结论翻译：总之，研究结果表明，与顺序胶带剥离采样相比，皮肤拭子无创且仅需基本技术，其产生的数据与既往胶带剥离和活检研究一致，支持对该皮肤采样方法开展进一步研究。皮肤拭子样本能够捕获LS与NL皮肤生物标志物水平差异，特定生物标志物（主要是IL-8）与AD严重度呈稳健相关，且主要在NL部位采样时观察到此相关性。IL-8是AD中具有生物学相关性的生物标志物，既往AD和其他过敏性疾病研究已证明。其检测可能因浅表采样方法（如胶带剥离或拭子）而增强，可能反映表皮局部浓度更高。因此，疾病相关生物标志物的可检测性可能因采样技术而异，正如AD中皮肤与血清样本比较所观察。未来研究应扩展皮肤拭子分析的AD相关生物标志物范围，并纳入纵向采样，以评估其在指导疾病管理和捕获治疗反应方面的潜力。总体而言，这些努力将为开发标准化、临床可部署的拭子检测奠定基础，以支持客观疾病监测和治疗。
