利用CRISPR/Cas9技术对39个与小鼠男性生育能力相关的睾丸富集基因进行系统评估

《Biology of Reproduction》：Systematic evaluation of 39 testis-enriched genes for male fertility in mice using CRISPR/Cas9

　　

摘要

睾丸表达约18,700个基因，这一数量超过了任何其他组织。其中，有1,262个基因在睾丸中表现出高表达且富集现象，但只有其中一部分基因对男性生育能力至关重要。敲除小鼠的表型为评估基因功能提供了重要信息；然而，当敲除小鼠存活且没有明显的生殖异常时，通常不会报告其生育能力表型。报告这些负面的生育能力表型有助于避免重复研究，并有助于优先考虑在男性生殖过程中起关键作用的基因。在这项研究中，我们使用CRISPR/Cas9系统生成了38个敲除小鼠品系，以评估39个在睾丸中富集的基因在男性生殖中的作用（1700025B11Rik, 4930444P10Rik, 4930550C14Rik, 4930558K02Rik, 4930590J08Rik, 4933412E24Rik, Acsbg2, Ankmy1, Ankrd61, Apobec4, Arl14epl, Atf7ip2, Ccdc110, Csnka2ip, D11Wsu47e, Ddi1, Efcab8, Fam243, Fam50b, Gm36245, Gtf2a1l, Iqca1l, Litafd, Lrp2bp, Mroh5, Nlrp14, Pebp4, Prss38, Pudp, Slc6a16, Spata1, Spata32, Styxl1, Tcp11, Tcp11x2, Tmem225, Tmem232, Trim52, Trp53tg5）。所有38个敲除小鼠品系均存活，且没有明显的发育或行为异常。我们发现30个可育的敲除品系（涉及31个基因），在所测试的条件下它们对男性生育能力不是必需的。其中9个品系的生殖表型之前已有报道；6个品系的表型与之前的报道一致，而3个品系的表型有所不同。这些系统的表型数据为优先考虑与男性生育能力相关的候选基因以及向研究界传播与生育能力相关或不相关的表型提供了有用的资源。

图形摘要

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