从人HSC-3口腔癌球体中释放的肝细胞生长因子激活剂（HGFA）可增强THP-1分化巨噬细胞的M2极化及自噬作用

《Human Cell》：Hepatocyte growth factor activator (HGFA) released from human HSC-3 oral cancer spheroids potentiates M2 polarization and autophagy of THP-1 differentiated macrophages

　　

摘要

自噬在调节肿瘤微环境中巨噬细胞的功能中起着关键作用。肝细胞生长因子激活剂（HGFA）可以调节与自噬相关的通路，从而可能影响巨噬细胞的功能。本研究旨在检测口腔癌球状细胞培养中HGFA的表达情况及其对共培养系统中巨噬细胞自噬的影响。将THP-1来源的巨噬细胞与口腔癌细胞（HSC-3球状细胞）进行共培养。HSC-3球状细胞是通过悬滴法生成的。使用qPCR方法检测HSC-3中的HGFA表达情况。共培养72小时后，通过流式细胞术评估巨噬细胞的极化状态和自噬活性。为了确定HGFA的作用，将针对HGFA的siRNA或重组HGFA蛋白（rHGFA）加入共培养培养基中，并分别通过流式细胞术、ELISA和qPCR分析自噬、巨噬细胞极化、高迁移率族-box 1（HMGB1）和细胞因子表达的变化。与单独培养的巨噬细胞相比，与HSC-3球状细胞共培养时M2型巨噬细胞的极化程度显著增加（p < 0.05）。HSC-3球状细胞中的HGFA表达水平是单独培养的巨噬细胞的2倍。通过siRNA敲低HGFA后，M0+HSC-3中的巨噬细胞自噬活性显著下降。添加rHGFA后，M0+HSC-3中的巨噬细胞自噬活性显著增加（p < 0.05），与对照组相比。然而，用针对HGFA的siRNA处理的球状细胞共培养后，M2型巨噬细胞的极化程度降低。相反，补充rHGFA可以恢复M2型巨噬细胞的极化。HMGB1和IL-8的表达受到HGFA活性的调控。HSC-3球状细胞通过HGFA诱导巨噬细胞的自噬。针对肿瘤相关巨噬细胞中的HGFA-自噬轴可能是恢复口腔癌抗肿瘤免疫的潜在治疗策略。