Jujuboside A有助于改善2型糖尿病（T2DM）相关的代谢异常综合征（MASH）：抑制YY1/FAS轴介导的肝脏新生脂肪酸合成

《The Journal of Nutritional Biochemistry》：Jujuboside A ameliorates T2DM-associated MASH: Suppression of YY1/FAS axis-mediated hepatic de novo fatty acid biosynthesis

　　• 枸杞糖苷A（Ju A）缓解了db/db小鼠以及高葡萄糖（HG）和游离脂肪酸（FFA）共培养的HepG2细胞中的代谢功能障碍相关性脂肪肝（MASH）
• Ju A恢复了db/db小鼠肝脏中的脂肪酸（FAs）代谢谱（主要是长链脂肪酸（LCFAs）），并重新建立了肝脏的脂质稳态
• Ju A通过抑制Yin Yang 1（YY1）的核定位和阻止其与FAS启动子的直接结合，从而抑制了脂肪酸合成酶（FAS）的活性
• Ju A对2型糖尿病（T2DM）相关脂肪肝的保护作用依赖于通过YY1/FAS信号通路抑制从头脂肪酸生物合成

**引言**
枸杞糖苷A（Ju A）是一种从枣（Ziziphus jujuba Mill.）籽中提取的天然三萜皂苷，具有多种药理活性，包括抗炎和代谢调节作用[1]。我们之前的研究表明，Ju A可以减轻糖尿病小鼠的肝脏脂质积累，提示其在代谢性肝病中可能具有治疗潜力[2]。然而，Ju A是否能够预防2型糖尿病（T2DM）相关的代谢功能障碍相关性脂肪肝（MASH），以及它如何在糖尿病条件下影响肝脏脂肪酸（FA）代谢，目前仍不清楚。

代谢功能障碍相关性脂肪肝病（MASLD）及其进展形式MASH已成为全球主要的健康问题。全球MASLD的患病率迅速上升，成人中患病率为25%至30%，对全球公共卫生构成了巨大挑战[3]。值得注意的是，MASLD是T2DM的主要慢性并发症，两者之间存在复杂的双向关系，60%-70%的T2DM患者同时患有MASLD[4,5]。高达60-70%的T2DM患者被诊断出同时患有MASLD。此外，与非糖尿病个体相比，患有MASLD的T2DM患者进展为更严重形式（如代谢功能障碍相关性脂肪肝（MASH）、晚期肝纤维化、肝硬化甚至肝细胞癌（HCC）的风险显著增加，严重影响了患者的生存和生活质量[6,7]。因此，识别有效的干预措施并阐明其机制具有重要的临床意义。目前可用于治疗T2DM的药物中，二甲双胍是广泛使用的第一线药物，已知可以改善葡萄糖代谢和胰岛素敏感性[8]。尽管二甲双胍对全身脂质代谢有轻微的益处，但其治疗T2DM相关MASH（尤其是减轻肝脏脂毒性、炎症和纤维化）的效果仍然有限且不足，因此在T2DM相关代谢疾病的实验研究中常作为参考或阳性对照[9]。此外，基于肠促胰岛素的疗法，特别是胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RAs）和双葡萄糖依赖性胰岛素促泌多肽（GIP）/GLP-1受体激动剂，已成为有希望的治疗策略，能够通过改善血糖控制和减少T2DM和MAS/LAD患者的肝脏脂质沉积带来显著的双重益处[10,11]。然而，这些疗法仍面临胃肠道不良反应、长期治疗依从性和药物可及性等方面的挑战。此外，专门针对T2DM相关MASH的有效治疗策略仍然有限，这凸显了研究包括Ju A在内的新型生物活性化合物的必要性。

在T2DM中MASLD的发展过程中，肝脏脂质代谢的严重失调是一个核心驱动因素。T2DM的标志性特征，即肝脏胰岛素抵抗（HIR）、代偿性高胰岛素血症和持续性高血糖，对肝脏脂质代谢产生了多方面的有害影响[12]。这种由T2DM引起的代谢失调导致的肝脏脂质过载促进了细胞内脂滴的形成，并引发了一系列有害的细胞应激反应，包括线粒体功能障碍、内质网应激、氧化应激和炎症反应，从而加速了MASLD向更严重肝脏疾病的进展[13]。在众多脂质种类中，脂肪酸（FAs）作为甘油三酯（TG）、磷脂和胆固醇酯等复杂脂质的基本结构成分，在肝脏脂质代谢和T2DM相关MASH的发病机制中起着关键作用[14]。不同类别的脂肪酸在能量代谢、细胞信号传导和膜结构完整性方面各自发挥着不同的功能[15]。当肝脏FA的稳态受到干扰，尤其是饱和长链脂肪酸（LCFAs）如棕榈酸（FA 16:0）和硬脂酸（FA 18:0）在细胞内过度积累时，会导致严重的脂质毒性[16]。相反，某些多不饱和脂肪酸（PUFAs），特别是二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA），被认为具有改善脂质代谢、减轻炎症和抗纤维化的作用[17]。因此，精确调节肝脏FA的组成和比例，特别是减少有害的饱和LCFAs水平的同时确保足够的有益FA，是预防和治疗T2DM相关MASH的关键策略。

在控制肝脏FA稳态的众多转录调节因子中，Yin Yang 1（YY1）是一种高度保守的锌指转录因子，已被证明是控制脂肪酸合成酶（FAS）表达和脂质生成的关键转录因子[2]。在糖尿病或脂质毒性条件下，YY1的核转运增强使其能够直接结合到核心脂质生成基因的启动子上，从而转录激活这些基因的表达并加速异常的从头脂质生成（DNL）[18]。这种由YY1驱动的脂质生成激活会加剧脂质紊乱，促进FA相关的脂质毒性，并加速T2DM相关MASH的进展。因此，针对YY1通路以恢复肝脏FA的稳态是一个非常有前途的治疗途径。基于这些机制背景，本研究系统地研究了Ju A对T2DM相关MASH的保护作用，并进一步通过靶向肝脏FA的代谢组学分析探讨了其潜在机制。我们的发现为Ju A的脂质调节功能提供了新的见解，并为其未来的临床应用提供了坚实的理论基础。

**动物和实验设计**
雄性C57BLKS/J背景的Lepdb/Lepdb（db/db）小鼠和非糖尿病对照Lepdb/m（db/m）小鼠（8周龄）购自南京大学动物模型研究中心（中国南京）。所有动物均饲养在屏障环境中（24 ± 1°C；12:12明暗周期），实验前后均提供充足的食物和水。动物实验按照美国国立卫生研究院指南的原则进行。

**Ju A抑制糖尿病小鼠和与HG及FFA共培养的HepG2细胞中的MASH进展**
为了评估Ju A对T2DM中MASH进展的影响，在db/db小鼠和与HG及FFA共培养的HepG2细胞中进行了研究。整个动物实验流程如图1A所示。Ju A的应用显著减轻了db/db小鼠的病理性肝肿大并改善了肝脏的整体形态（图1B）。与视觉检查观察到的改善的肝脏形态一致，db/db小鼠的肝脏重量显著增加。

**讨论**
近年来，越来越多的关于T2DM合并MASH的研究集中在通过靶向HIR驱动的肝脏脂肪变性这一核心病理轴来减轻肝脏炎症和纤维化[28]。尽管越来越多的证据表明，改善HIR和减少过度的肝脏脂质积累可以协同减轻MASH相关的肝脏损伤并优化T2DM的血糖控制，但仍然缺乏针对这一目标的治疗药物。

**结论**
总体而言，我们的结果突显了Ju A作为主要治疗或辅助治疗手段对抗T2DM相关MASH的潜在药理作用，通过靶向YY1/FAS信号通路恢复肝脏FA的稳态，从而减轻随后的肝脏炎症和纤维化（图8）。通过表征Ju A直接抑制YY1核转运并进而抑制FAS驱动的脂质毒性的作用，这些发现验证了YY1/FAS通路作为有希望的治疗途径的潜力。

**作者贡献**
Tingting Yang：概念化、研究设计、资金获取、监督、初稿撰写、审阅与编辑。Libang Chen：数据分析、数据管理、研究实施、项目管理、初稿撰写、审阅与编辑。Haonan Luo：数据分析、研究实施、项目管理、初稿撰写。Li Wang：软件开发、研究实施、项目管理、验证。Xiyan Jiang：研究实施、项目管理、验证。