摘要
牛子宫内膜炎常常进展为子宫内膜纤维化，这是奶牛着床失败和不孕的主要原因之一。然而，在子宫发炎过程中破坏子宫内膜自噬的上游机制尚未得到充分阐明，而且槲皮素（Quercetin，简称Que）在牛子宫内膜中的抗纤维化靶点也尚不清楚。因此，我们将健康和纤维化牛子宫内膜（每组n = 4个样本）的独立数据获取（DIA）蛋白质组学研究、网络药理学分析、分子对接技术、细胞热稳定性测定（CETSA）以及TGF-β1刺激的牛原代子宫内膜上皮细胞（BEECs）的增益和丧失功能研究，与C57BL/6雌性小鼠中48小时LPS诱导的子宫内膜炎模型结合起来进行了研究。在纤维化子宫内膜中，LCN2的表达显著上调，并在五个候选靶点中被评为优先目标；分子对接预测LCN2可以与特定结构结合，CETSA结果显示LCN2的热稳定性增强，这与靶点结合一致。在BEECs中，LCN2过表达激活了MAPK/ERK–mTOR信号通路，抑制了自噬过程并促进了上皮-间充质转化（EMT），而LCN2的沉默则逆转了这些现象。槲皮素以剂量依赖的方式降低LCN2的丰度并抑制MAPK/ERK–mTOR的磷酸化，恢复了自噬过程并逆转了TGF-β1诱导的EMT，ERK的抑制也消除了LCN2介导的这些变化。在LPS刺激的小鼠中，口服槲皮素降低了子宫内膜中的LCN2水平，恢复了自噬相关指标，并减少了胶原沉积和子宫内膜损伤。这些临床前发现表明LCN2与受损的子宫内膜自噬和EMT有关，暗示槲皮素可能有助于缓解这种病理过程；不过，其结合亲和力、对牛体的作用机制及有效性尚未得到证实，需要在更大规模的样本组、纯化蛋白结合实验和慢性动物模型中进行验证。
