体内CAR-T双敲除筛选技术揭示了具有协同抗肿瘤作用的一对基因

《Nature》：In vivo CAR-T double knockout screen maps synergistic antitumour gene pairs

　　

摘要

嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法已经显著改善了血液系统恶性肿瘤的治疗效果，但其疗效仍受到T细胞内在多种负调控机制的限制^1,2,3,4。在本研究中，我们进行了高通量的体内CAR-T双基因敲除（DKO）CRISPR筛选，发现了多种既有效又具有协同效应的基因组合。其中最显著的组合是NR4A1–SOCS3 DKO，该组合具有多种有利的免疫学特性。全转录组分析和体内单细胞RNA测序结果显示，NR4A1–SOCS3 DKO能够显著上调CAR-T细胞中的代谢通路，从而提高了这些细胞的代谢能力和线粒体活性。NR4A1–SOCS3 DKO改造的CAR-T细胞和T细胞在不同肿瘤模型中表现出极强的抗肿瘤效果和长期的肿瘤控制能力，同时并未影响安全性。NR4A1–SOCS3 DKO组合的表现优于多种单一基因或双基因改造方案^{5,6,7,8,9.这些数据证明了高通量体内CAR-T DKO筛选在快速发现组合治疗靶点方面的有效性，并证实了NR4A1–SOCS3作为潜在的细胞内调控因子，有助于开发高效抗癌CAR-T疗法。}