倪万柏珍的针灸技术通过激活CLEC3B介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路来抑制自噬反应，并对缺血性中风具有神经保护作用

《Neurochemical Research》：Niwan Bazhen acupuncture activates CLEC3B-Mediated PI3K/AKT/mTOR signaling pathway to suppress autophagy and exerts neuroprotection against ischemic stroke

　　

摘要

缺血性中风（IS）是全球导致残疾和死亡的主要原因之一。由脑缺血引发的过度自噬会加剧神经细胞的凋亡和坏死。在“倪湾巴珍”（Niwan Bazhen）穴位进行针灸治疗在中风康复中具有独特优势，我们之前的研究已经证明了其对减轻中风后神经细胞凋亡的作用。然而，其治疗机制仍未完全明了。转录组微阵列分析显示，在中脑动脉阻塞/再灌注（MCAO/R）模型大鼠的大脑中，C型凝集素结构域家族3成员B（CLEC3B）的表达显著下调，而针灸治疗可以逆转这一下调现象。利用慢病毒介导的CLEC3B过表达能够改善大鼠的神经功能、减少脑梗范围并缓解脑水肿，并降低梗死周围皮层的神经细胞凋亡程度。Western blot分析表明，CLEC3B过表达能够激活PI3K/AKT/mTOR信号通路，降低LC3-II/LC3-I比值，并减少自噬体的数量。相反，敲低CLEC3B几乎会完全消除针灸在中风模型大鼠中的保护作用。在体外实验中，CLEC3B表达不足会抑制PI3K/AKT/mTOR通路，并在缺氧-葡萄糖剥夺/恢复（OGD/R）条件下损害大鼠皮质神经细胞的自噬过程。用重组CLEC3B蛋白或过表达CLEC3B的慢病毒感染OGD/R处理的大鼠皮质神经元可以激活PI3K/AKT/mTOR通路并抑制自噬，这一效果可被PI3K抑制剂LY294002所阻断。综上所述，CLEC3B作为针灸作用的核心靶点，通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路来抑制过度神经自噬，从而发挥神经保护作用。

图形摘要

缺血性中风（IS）是全球导致残疾和死亡的主要原因之一。由脑缺血引发的过度自噬会加剧神经细胞的凋亡和坏死。在“倪湾巴珍”穴位进行针灸治疗在中风康复中具有独特优势，我们之前的研究已经证明了其对减轻中风后神经细胞凋亡的作用。然而，其治疗机制仍未完全明了。转录组微阵列分析显示，在中脑动脉阻塞/再灌注（MCAO/R）模型大鼠的大脑中，C型凝集素结构域家族3成员B（CLEC3B）的表达显著下调，而针灸治疗可以逆转这一下调现象。利用慢病毒介导的CLEC3B过表达能够改善大鼠的神经功能、减少脑梗范围并缓解脑水肿，并降低梗死周围皮层的神经细胞凋亡程度。Western blot分析表明，CLEC3B过表达能够激活PI3K/AKT/mTOR信号通路，降低LC3-II/LC3-I比值，并减少自噬体的数量。相反，敲低CLEC3B几乎会完全消除针灸在中风模型大鼠中的保护作用。在体外实验中，CLEC3B表达不足会抑制PI3K/AKT/mTOR通路，并在缺氧-葡萄糖剥夺/恢复（OGD/R）条件下损害大鼠皮质神经细胞的自噬过程。用重组CLEC3B蛋白或过表达CLEC3B的慢病毒感染OGD/R处理的大鼠皮质神经元可以激活PI3K/AKT/mTOR通路并抑制自噬，这一效果可被PI3K抑制剂LY294002所阻断。综上所述，CLEC3B作为针灸作用的核心靶点，通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路来抑制过度神经自噬，从而发挥神经保护作用。

图形摘要