miR-205-5p 通过直接抑制 PTEN 信号通路减轻凝血酶对脑微血管内皮细胞的损伤

《Neurochemical Research》：miR-205-5p Alleviates Thrombin-Induced Injury in Brain Microvascular Endothelial Cells by Directly Targeting PTEN

　　

摘要

高血压性脑内出血（HICH）是一种严重的脑血管疾病，具有较高的发病率和死亡率，且诊断时常存在显著困难。其背后的分子机制尚未完全明了。本研究探讨了miR-205-5p与PTEN在HICH中的调控相互作用。通过qRT-PCR检测miR-205-5p和PTEN的表达水平，并采用ROC分析来评估miR-205-5p的预后价值，同时利用逻辑回归进行分析。细胞活力和凋亡情况通过MTT实验和流式细胞术进行检测。MDA水平和SOD活性则通过相应的商业试剂盒测量。利用miRDB、miRWalk和TargetScan进行生物信息学预测，随后通过双萤光素酶报告基因实验验证目标基因。HICH患者的miR-205-5p表达水平降低，该分子能有效预示不良预后。其表达与收缩压、舒张压和血肿体积呈负相关，而与GCS评分呈正相关。回归分析表明，miR-205-5p是独立的保护因素，可对抗不良预后，而出血位置和血肿体积则是不良预后的独立风险因素。升高的miR-205-5p可以减轻凝血酶引发的细胞损伤和氧化应激。PTEN被证实是miR-205-5p的直接靶基因。HICH患者的PTEN表达水平显著上调，且PTEN表达与miR-205-5p表达呈负相关。进一步的功能实验表明，在HCMEC-D3细胞中，PTEN的过表达可以逆转miR-205-5p升高的保护作用，表现为跨上皮电阻（TEER）降低、FITC-右旋糖酐通透性增加以及紧密连接蛋白表达减少。这些发现得到了HUVECs数据的支持，尽管仍需在原代脑微血管内皮细胞或其他独立的血脑屏障模型中进行验证。miR-205-5p至少部分通过靶向PTEN来减轻HICH条件下的细胞损伤。然而，这些发现基于体外实验，仍需进一步的体内研究来验证miR-205-5p的治疗潜力。