桑美之咳颗粒通过TLR4/PI3Kγ/NF-κB轴缓解过敏性哮喘中的2型炎症：基于UPLC-Q-Orbitrap MS、网络药理学及实验验证的发现

《Journal of Chromatography B》：Sangmei Zhike Granules alleviate type 2 inflammation in allergic asthma via the TLR4/PI3Kγ/NF-κB axis: insights from UPLC-Q-orbitrap MS, network pharmacology, and experimental validation

　　

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  在桑梅止咳颗粒（SMZK）中鉴定出812种化学成分。
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  在大鼠肺组织中检测到41种源自SMZK的原型化合物。
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  发现TLR4/PI3Kγ/NF-κB轴是关键的抗哮喘机制。
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  SMZK可减轻过敏性哮喘中的2型气道炎症。
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  为该中药方剂提供了药理学证据。

引言

过敏性哮喘是最常见的支气管哮喘类型，超过50%的成人哮喘病例具有过敏成分[1]。近年来，随着生态环境的持续变化，其发病率持续上升[2]。过敏性哮喘的经典发病机制是IgE介导的适应性免疫反应。此外，过敏原引起的上皮屏障功能障碍、先天淋巴细胞的激活、肥大细胞的活化以及其他免疫反应均促进了过敏性哮喘中的慢性气道炎症[3]。目前的治疗主要依赖吸入性皮质类固醇，同时严格避免或减少过敏原暴露。然而，由于患者使用吸入器不当、治疗依从性差以及部分患者的治疗反应不足等因素，疾病控制仍然不理想，导致过敏性哮喘的控病率一直较低[4]。传统中医（TCM）作为过敏性哮喘的辅助治疗方法具有独特优势[5]。它不仅可以增强吸入性皮质类固醇的抗炎作用，还能减少皮质类固醇的需求并提高患者的依从性。根据中医经典理论，体内潜伏的风邪与过敏性哮喘中观察到的免疫反应失调相对应[6]。外来的风（过敏原）可能与体内的潜伏风相互作用，导致免疫反应异常激活。此外，风邪的长期滞留可能转化为热，损害阴液，这一病理过程与过敏性哮喘中的慢性气道炎症高度一致。桑梅止咳颗粒（SMZK）是由两种经典方剂——泻白三和清燥九味汤优化而成的。泻白三传统上用于清肺热、止咳平喘；清燥九味汤用于润燥止咳。在这个改良的方剂中，添加了枸杞子、五味子、白芍等草药，通过酸甜配伍产生滋阴的效果。麻黄等草药也有助于祛风。这些治疗原则与调节慢性气道炎症相一致。除了缓解症状外，该方剂还能对抗皮质类固醇使用相关的“热”证候[7]。药理学研究表明，这些草药的活性成分具有抗炎和抗痉挛作用[8]、[9]、[10]。越来越多的证据表明，SMZK通过对多种哮喘类型（包括过敏性哮喘和咳嗽变异性哮喘CVA）的缓解作用、改善肺功能以及抑制气道炎症，发挥有益效果。最近的UPLC-MS/MS和网络药理学分析发现了SMZK中的几种潜在活性成分，如五味子醇A、马尼芬、菲考啉E和阿格拉宾。新兴证据还表明，SMZK的药理作用可能涉及cAMP/PKA/CREB信号通路和IκBα/NF-κB轴的调节[11]、[12]、[13]。在分子水平上，过敏性哮喘与2型气道炎症密切相关。Toll样受体4（TLR4）是一种模式识别受体，是先天免疫系统的重要组成部分，参与维持气道上皮的完整性[14]。外源性刺激（包括过敏原）可激活TLR4，并促进PI3Kγ进入信号复合体。随后的下游信号通路激活会调节NF-κB的转录活性，从而促进2型炎症因子的产生，最终导致2型气道炎症[15]。越来越多的证据表明，SMZK通过减轻2型气道炎症来改善过敏性哮喘的临床症状，并可能增强皮质类固醇的治疗效果同时减少其不良反应[11]。尽管先前的研究已证明了SMZK在实验性过敏性哮喘中的疗效，但由于中药方剂的多成分和多靶点特性，其潜在的分子机制尚未完全阐明[13]。因此，我们假设SMZK通过调节TLR4/PI3Kγ/NF-κB轴来缓解2型气道炎症。为了验证这一假设，本研究在大鼠过敏性哮喘模型中系统评估了SMZK的治疗效果和作用机制。

部分摘要

化学物质和试剂

SMZK由北京中医药大学第三附属医院药房提供，专为医院呼吸科定制。甲酸、甲醇和乙腈购自Thermo Fisher Scientific公司，超纯水由A.S. Watson & Company提供。

SMZK的制备

SMZK包含十种草药：麻黄叶、麻黄皮、枸杞子、桔梗根、乌头苦种子、白芍、五味子、甘草

体外化合物鉴定和体内外源性物质检测

采用已建立的化合物鉴定方法，利用UPLC-Q-Orbitrap-MS技术生成了SMZK以及大鼠空白组和治疗组肺组织的基峰色谱图（BPCs）和总离子色谱图（TICs）。结果显示，SMZK中共鉴定出812种化合物，主要包括189种黄酮类、166种苯丙素类、128种萜类和101种碳水化合物[2]。

讨论与结论

哮喘是全球第二常见的慢性呼吸道疾病，而过敏性哮喘是其主要类型[20]。免疫失调是过敏性哮喘发病机制的主要因素之一。2型细胞因子（如IL-4、IL-5和IL-13）的分泌增加，是由于Th辅助细胞失衡所致，这是外源性过敏原诱导的过敏反应的关键病理机制。然而，近年来研究发现，过敏原还可能破坏...

作者贡献声明

罗景旭：撰写——初稿、验证、数据分析。 李凯：撰写——审稿与编辑、方法学设计。 黄贵瑞：撰写——初稿、验证。 龚学峰：撰写——审稿与编辑、资金争取。 崔洪胜：撰写——审稿与编辑、项目管理。 任培忠：撰写——审稿与编辑、资源整理、项目管理。

资助

本研究得到了国家自然科学基金（项目编号：82405246）和北京市自然科学基金（项目编号：L2510127）的支持。

利益冲突声明

作者声明没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。