《Current Oncology》：Utilization of Circulating Tumor DNA Testing in Biliary Tract Cancers
编辑推荐：
背景：循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA，ctDNA）是一种有前景的生物标志物，可用于胆道癌（biliary tract cancers，BTCs）的分子残留病灶（molecular residual disease，MRD）检测和复发
背景：循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA，ctDNA）是一种有前景的生物标志物，可用于胆道癌（biliary tract cancers，BTCs）的分子残留病灶（molecular residual disease，MRD）检测和复发监测。本研究评估了术后肿瘤知情ctDNA与无复发生存期（recurrence-free survival，RFS）之间的关联，并评价了初次检测与纵向ctDNA监测的性能。方法：研究人员开展了一项单机构回顾性队列研究，纳入51例接受切除的非转移性胆道癌患者，这些患者在术后接受了ctDNA检测。采用Kaplan–Meier法、log-rank检验、单变量Cox回归以及有限的多变量Cox回归分析来评估ctDNA状态与RFS之间的关联。为处理时间相关偏倚，进行了3个月界标敏感性分析。结果：25例患者（49.0%）出现复发。在20例术后ctDNA阳性的患者中，18例（90.0%）发生复发，而31例ctDNA阴性的患者中仅有7例（22.6%）复发。中位RFS分别为10.8个月与47.4个月。术后ctDNA阳性与较短的RFS相关（HR，7.85；95% CI，3.03–20.29；p < 0.001）。在预先设定的多变量Cox模型中，校正III/IV期疾病和CA 19-9 > 37 U/mL后，术后ctDNA阳性仍与较短的RFS相关（校正HR，5.09；95% CI，1.82–14.26；p = 0.002）。纵向ctDNA监测对复发的灵敏度为72.0%，特异度为92.3%，阳性预测值（PPV）为90.0%，阴性预测值（NPV）为77.4%。中位提前时间为69.5天。在37例可评估患者的3个月界标队列中，经探索性校正分期和CA 19-9后，术后ctDNA阳性与后续更短的RFS相关（校正HR，6.45；95% CI，1.47–28.34；p = 0.014）。结论：术后ctDNA阳性与复发及更短的RFS相关。纵向ctDNA监测提高了复发检出率，且常早于临床记录的复发。
研究背景与问题
胆道癌（biliary tract cancers，BTCs）是一组起源于肝内、肝外胆管、胆囊及壶腹部的异质性恶性肿瘤，具有侵袭性强、晚期诊断率高、远期预后差的特点。手术切除是目前唯一可能根治的治疗手段，但仅少数患者在确诊时可接受根治性切除。即便术后辅以卡培他滨标准治疗，仍有相当比例的患者出现复发，五年总生存率仅为10%~40%。当前的术后监测策略包括影像学检查、临床评估及血清糖类抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA 19-9）检测，但影像学对低体积残留病灶不敏感，且术后炎性改变易与复发混淆；CA 19-9则受胆道梗阻、炎症及非分泌者表型等因素影响，灵敏度和特异度均有限。因此，亟需更精准的分子监测工具来早期识别高危复发患者。
循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA，ctDNA）是肿瘤细胞释放入血的碎片化DNA，可通过液体活检实现无创、连续的分子评估。基于肿瘤知情分析的ctDNA检测（如Signatera）能够从手术组织中鉴定患者特异的体细胞变异，并在血浆中追踪这些变异，从而在影像学或临床表现之前发现分子残留病灶（molecular residual disease，MRD）。然而，ctDNA在胆道癌术后监测中的临床应用数据仍十分有限，尤其是首次术后ctDNA评估与长期纵向监测性能的比较尚缺乏系统报道。为此，研究人员开展了本项单中心回顾性队列研究，旨在评估术后ctDNA状态与无复发生存期（recurrence-free survival，RFS）的关联，并比较首次术后ctDNA检测与连续纵向监测在预测复发方面的表现。
关键技术方法
本研究为单机构回顾性队列研究，纳入2021年3月至2026年5月期间在一家三级医疗中心及其卫星机构接受根治性切除术的51例非转移性胆道癌患者。ctDNA检测采用商业化的肿瘤知情Signatera assay，通过对肿瘤组织及匹配正常血样进行全外显子测序，筛选出16个患者特异性克隆性体细胞变异，进而构建个性化多重PCR文库进行超深度测序（覆盖深度超过100,000×）。血浆样本中若检测到至少两个被追踪的变异超过预设置信阈值，则判定为ctDNA阳性，并以MTM/mL为单位报告定量水平。主要临床结局为RFS，采用Kaplan–Meier法、log-rank检验及Cox比例风险回归进行分析。为控制时间相关偏倚，还进行了3个月界标敏感性分析。
研究结果
3.1 患者特征：共纳入51例患者，中位年龄70岁，女性占51.0%。最常见的肿瘤类型为肝外胆管癌（41.2%），其次为肝内胆管癌（35.3%）和胆囊癌（23.5%）。多数患者（84.3%）接受了辅助治疗，其中以卡培他滨单药为主（72.1%）。中位随访期间，20例患者术后ctDNA阳性，31例持续阴性。每例患者的中位术后ctDNA检测次数为2次，检测间隔中位数为89天。
3.2 主要结局：随访期间共25例（49.0%）患者出现复发。在20例术后ctDNA阳性患者中，18例（90.0%）复发；而在31例ctDNA阴性患者中，仅7例（22.6%）复发。术后ctDNA阳性组的RFS显著短于阴性组（中位RFS 10.8个月 vs. 47.4个月；1年RFS率42.5% vs. 92.0%；2年RFS率12.8% vs. 75.2%）。单变量Cox回归显示，术后ctDNA阳性与复发风险增加显著相关（HR，7.85；95% CI，3.03–20.29；p < 0.001）。在预先设定的多变量模型中，校正III/IV期疾病和CA 19-9升高后，ctDNA阳性仍与较短的RFS独立相关（校正HR，5.09；95% CI，1.82–14.26；p = 0.002）。此外，ctDNA阳性率随分期升高而增加：I期0%、II期25.0%、III期65.0%、IV期100.0%。3个月界标分析进一步证实了这一关联（校正HR，6.45；95% CI，1.47–28.34；p = 0.014）。
3.3 次要结局：首次术后ctDNA阳性对复发的灵敏度仅为36.0%，但特异度高达96.2%，阳性预测值（PPV）为90.0%，阴性预测值（NPV）为61.0%。相比之下，采用任意一次术后ctDNA阳性的纵向监测方案将灵敏度提升至72.0%，特异度92.3%，PPV 90.0%，NPV 77.4%。在25例复发患者中，18例在临床确诊前即出现ctDNA阳性，中位提前时间为69.5天（约2.3个月），其中48.0%的患者在复发前3个月内ctDNA转为阳性，68.0%在复发前6个月内转为阳性。探索性分析显示，CA 19-9升高（>37 U/mL）对复发的灵敏度为52.0%，特异度73.1%，PPV 65.0%，NPV 61.3%，且与复发的关联未达到统计学显著性（p = 0.089）。总生存分析显示，ctDNA阳性组中位总生存期为22.9个月，阴性组未达到，两组差异有统计学意义（p = 0.004）。
讨论与结论
本研究表明，术后肿瘤知情ctDNA阳性与胆道癌患者复发风险显著升高及RFS缩短密切相关。纵向ctDNA监测相比单次术后检测可显著提高复发检出率，且ctDNA阳性常比影像学复发提早约2.3个月出现。然而，研究也指出，单次术后ctDNA阴性并不能排除未来复发风险（NPV仅61.0%），且仍有部分复发发生在ctDNA持续阴性的患者中，因此ctDNA应作为影像学监测的补充而非替代手段。研究局限性包括：回顾性设计、样本量较小、ctDNA检测时机和频率未标准化、可能存在不朽时间偏倚和检测偏倚等。研究人员强调，本研究展示的是预后关联和分子层面的早期检出，而非临床获益的直接证据，ctDNA指导下的监测或治疗能否改善患者结局仍需前瞻性干预试验验证。最终结论：术后肿瘤知情ctDNA阳性与切除后非转移性胆道癌患者的复发风险增加和RFS缩短相关，纵向ctDNA监测可提高复发检出率，但该技术目前应作为标准影像学监测的补充，其临床效用有待进一步验证。
