《Diagnostics》：Diagnostic Accuracy and Colonoscopy-Sparing Potential of RAID-CRC Screen After a Positive Faecal Immunochemical Test
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背景/目的： 基于粪便免疫化学检测（FIT）的结直肠癌（CRC）筛查会产生大量无进展期肿瘤的结肠镜转诊。本研究在加利西亚（Galicia）人群筛查项目中，评估RAID-CRC Screen——一种基于qPCR的粪便细菌特征——作为FIT阳性后二线分诊的价值。方
背景/目的： 基于粪便免疫化学检测（FIT）的结直肠癌（CRC）筛查会产生大量无进展期肿瘤的结肠镜转诊。本研究在加利西亚（Galicia）人群筛查项目中，评估RAID-CRC Screen——一种基于qPCR的粪便细菌特征——作为FIT阳性后二线分诊的价值。方法： 本横断面诊断准确性研究纳入FIT ≥ 100 ng血红蛋白/mL且以结肠镜为参考标准的参与者。RAID-CRC Screen从残余FIT缓冲液材料中分析。主要分析纳入可评估检测及完整结肠镜者。另开展意向诊断分析，将不可评估结果归入结肠镜转诊。与数据衍生替代FIT阈值的比较为探索性。结果： 主要分析1291名参与者中，34名（2.6%）患CRC，441名（34.2%）患进展期肿瘤。RAID-CRC Screen阳性1087名（84.2%）。对CRC的敏感度为94.1%（95% CI，80.3–99.3%），对进展期肿瘤为87.5%（84.1–90.5%）；特异度分别为16.1%（95% CI，14.1–18.2%）和17.5%（95% CI，15.0–20.3%）。FIT100后行RAID-CRC Screen可避免204例结肠镜（15.8%；95% CI，13.9–17.9%），但漏诊2例CRC和55例进展期肿瘤。单用FIT118可避免149例结肠镜（11.5%），CRC敏感度100.0%（95% CI，89.7–100.0%），进展期肿瘤敏感度92.3%（95% CI，89.4–94.6%）。在意向诊断分析（1312例）中，纳入21例不可评估结果，结肠镜减少15.5%（95% CI，13.6–17.6%），同样有2例CRC未被转诊。结论： RAID-CRC Screen分诊降低了模型估计的结肠镜转诊，代价是漏诊CRC和进展期肿瘤。单用FIT118避免的结肠镜较少，但保留了全部观察到的CRC。这些探索性比较未确立优越性或暂缓结肠镜的安全性。
一、研究背景与问题
结直肠癌（CRC）是全球最常见的恶性肿瘤之一，也是癌症相关死亡的主要原因。人群筛查可降低CRC死亡率，并通过检出和切除进展期癌前病变降低发病率。欧洲多数有组织的筛查项目采用两步路径：无症状个体完成定量粪便免疫化学检测（FIT），超过预设粪便血红蛋白阈值者转诊结肠镜。FIT无创、可接受、可扩展，但其对CRC的敏感性高于对进展期癌前病变的敏感性，阳性预测值有限。因此相当比例的FIT阳性参与者接受结肠镜后并无CRC或进展期肿瘤证据，这既对內镜资源形成压力，也使参与者承受侵入性操作的负担和少见并发症。由于FIT为定量结果，项目可通过调整阳性阈值匹配结肠镜资源，但提高阈值在减少转诊的同时必然降低敏感性，且最佳平衡随人群风险、性别、年龄、筛查轮次和项目特征而变化，属于相对非选择性的优先排序手段。肠道微生物特征被提出可作为补充生物标志物，在FIT阳性人群中进一步细化风险。RAID-CRC Screen（GoodGut, S.L.U.，西班牙Girona）是一种基于定量聚合酶链反应（qPCR）测定特定粪便细菌标志物的定性检测；其初始微生物特征在有症状患者中开发，随后衍生并验证了筛查专用版本。但生物标志物迁移至新人群和实验室流程后诊断性能可能变化，因此在纳入有组织筛查项目前需独立的、特定环境的验证。本研究主要目的即在加利西亚人群CRC筛查项目FIT阳性参与者中外部评估RAID-CRC Screen对CRC和进展期肿瘤的诊断准确性；次要目的为量化假阳性FIT转诊和结肠镜需求的减少、比较微生物分诊与替代FIT阈值、并按性别和年龄探索性能。
二、研究设计与结论
研究人员在西班牙加利西亚有组织人群CRC筛查项目内开展横断面、上市后诊断准确性研究（研究代码GG-RAIDCRC-1008），经当地伦理委员会批准（2023年6月27日，编号2023/243），在Complexo Hospitalario Universitario de Ourense实施。参与者于2022年12月至2024年10月接受结肠镜者中招募，研究于2026年7月13日完成样本处理和数据库质控后正式结束，按STARD 2015报告。加利西亚项目邀请50–69岁无症状个体每两年完成一次FIT，粪便血红蛋白≥100 ng Hb/mL缓冲液（OC-Sensor系统相当于20 μg Hb/g粪便）为阳性并转诊筛查结肠镜。连续FIT阳性且已接受或计划接受结肠镜者接受资格评估；排除标准包括研究程序完成前退出或死亡、既往CRC/进展期腺瘤/炎症性肠病、近1个月抗生素治疗、严重共病、可能改变肠道完整性的胃肠道疾病或手术、年龄超出项目范围、近6个月化疗或放疗。纳入者于2023年6月27日至2024年12月13日签署书面知情同意，同意使用残余FIT缓冲液材料和临床数据。研究得出结论：RAID-CRC Screen诊断性能与既往在FIT阳性筛查人群中的验证大体一致；微生物分诊与提高FIT阈值在减少结肠镜与病变检出之间呈现不同权衡，轻度阈值调整保留更多病变，而微生物分诊避免更多结肠镜；这些探索性发现未确立任一策略的优越性或临床安全性，其潜在实施需前瞻性安全性评估和经济评价。
三、主要关键技术方法
研究为嵌入有组织人群筛查项目的横断面诊断准确性研究，样本队列来自加利西亚筛查项目中2022年12月至2024年10月接受结肠镜的连续FIT阳性参与者（FIT ≥ 100 ng Hb/mL），最终1312名完整结肠镜者纳入意向诊断分析、1291名可评估者纳入主要分析。关键技术包括：以结肠镜联合组织病理学评估为参考标准，诊断类别按参与者水平定义CRC、进展期腺瘤、进展期肿瘤和任何结直肠肿瘤；索引检测RAID-CRC Screen利用FIT采集管残余材料（?20 °C保存，中位储存273天，IQR 191–556），经DNA提取后用RAID-CRC Screen qPCR试剂盒定量商业特征中的细菌靶标，原始结果输入GoodGut-Test网络平台按预设算法生成定性阳性/阴性结果，索引检测阈值未用加利西亚数据修改，实验室人员对结肠镜和组织病理结果设盲；采用精确二项95%置信区间估计敏感性、特异度、阳性/阴性预测值，以对数法计算似然比，并建模FIT阈值100、118、141、155、171、266 ng Hb/mL下单用FIT与FIT联合RAID-CRC Screen两种转诊策略的结肠镜避免数量与病变漏诊。
四、研究结果
3.1 参与者流程与基线特征
1840名FIT阳性并接受筛查结肠镜者中，162名不符合资格、358名拒绝参与；1320名入组者中8名因结肠镜不完整被排除；余1312名中21名RAID-CRC Screen结果不可评估，1291名进入主要诊断准确性分析，1312名全部保留于意向诊断转诊策略分析。中位年龄62岁（IQR 56–66），562名（43.5%）为女性，中位FIT浓度226 ng Hb/mL（IQR 145–527.5）。34名（2.6%）检出CRC，426名（33.0%）进展期腺瘤，441名（34.2%）进展期肿瘤，19名同时有CRC和进展期腺瘤。RAID-CRC Screen阳性1087名（84.2%）、阴性204名（15.8%）。
3.2 项目FIT阈值下的诊断准确性
RAID-CRC Screen在34例CRC中检出32例，敏感度94.1%（95% CI 80.3–99.3%）；在1257名无CRC者中阴性202例，特异度16.1%（95% CI 14.1–18.2%），阳性预测值2.9%（95% CI 2.0–4.1%），阴性预测值99.0%（95% CI 96.5–99.9%）；阳性似然比1.121（95% CI 1.027–1.224），阴性似然比0.366（95% CI 0.095–1.413）。对进展期肿瘤，441例中386例阳性、55例阴性，敏感度87.5%（95% CI 84.1–90.5%），特异度17.5%（95% CI 15.0–20.3%），阳性预测值35.5%（95% CI 32.7–38.4%），阴性预测值73.0%（95% CI 66.4–79.0%）；850名无进展期肿瘤者中149名被正确重分类为阴性，该终点假阳性FIT转诊减少17.5%。意向诊断分析纳入1312名完整结肠镜者，不可评估结果21例（1.6%；95% CI 1.0–2.4%），其中8例有进展期肿瘤、无CRC；该策略下1108名将被转诊，避免204例结肠镜（15.5%；95% CI 13.6–17.6%），CRC敏感度和特异度分别为94.1%和15.8%，进展期肿瘤为87.8%和17.3%。未被转诊的204名中包括2例CRC和55例进展期肿瘤（含该2例CRC）。
3.3 与替代FIT阈值的比较
提高FIT阈值（单用或联合RAID-CRC Screen）逐步减少模型估计的结肠镜转诊，代价是CRC和进展期肿瘤检出下降。单用FIT118可避免149例结肠镜（11.5%），保留全部34例观察到的CRC，但34例进展期肿瘤（7.7%）未转诊；相比之下FIT100联合RAID-CRC Screen避免204例结肠镜（15.8%），2例CRC（5.9%）和55例进展期肿瘤（12.5%）未转诊。所评估最高阈值FIT266联合RAID-CRC Screen可避免827例结肠镜（64.1%），同时13例CRC（38.2%）和239例进展期肿瘤（54.2%）未转诊。
3.4 探索性亚组分析
按性别和年龄比较单用FIT118与FIT100联合RAID-CRC Screen：FIT118在各亚组均保留全部观察到的CRC；FIT100联合RAID-CRC Screen可避免更多结肠镜，但2例CRC未转诊，均见于60岁以下男性。女性和≥60岁者两种策略均保留全部观察到的CRC，但置信区间较宽。这些描述性发现不能确立安全的亚组特异性转诊阈值。
五、讨论与结论
讨论指出，RAID-CRC Screen旨在使已FIT阳性人群的敏感性最大化，即使转诊适度减少也可释放内镜资源；但该潜在获益须与假阴性结果的临床后果权衡：未被转诊的204名中1.0%有CRC、27.0%有进展期肿瘤，阴性结果并不能可靠排除临床相关病变，暂缓结肠镜可能延迟CRC诊断并使进展期癌前病变未获切除；所有参与者均接受结肠镜，故暂缓该操作的安全性和长期后果未被评估。本研究的CRC敏感度与开发和既往筛查评估报告的高值一致，Malagón等报告筛查验证中CRC敏感度94.7%、后续临床性能研究约95%，假阳性FIT减少约16–20%，与加利西亚的17.5%相近，差异可能反映参与者特征、病变患病率、样本处理、抗生素或其他环境暴露及微生物组特征跨人群可移植性的变化；由于索引检测为定性且未行本地重新校准，本研究提供了预期真实路径下的相关性能估计。与FIT阈值调整的比较提供了评估微生物分诊附加价值的临床相关基准，观察到的权衡表明减少结肠镜转诊须与CRC和进展期肿瘤检出损失一并考虑；这些探索性、描述性比较未确立任一策略的优越性，尤其鉴于CRC事件数有限且替代FIT阈值系在同一数据集中选择和评估，因此无法确定最佳或临床安全的转诊阈值；项目层面决策需独立验证并评估当地结肠镜资源、成本和长期临床结局。研究优势包括在有组织筛查项目内开展大型外部评估、使用常规FIT路径残余材料、以结肠镜和组织病理为参考标准、与临床可操作的FIT阈值比较，连续邀请和盲法判读减少了选择偏倚和回顾偏倚。局限性包括：仅FIT阳性者接受结肠镜，估计的是选定人群中的条件性能，不能确立对全部受邀人群的敏感度或特异度；虽达到方案规定样本量，但主要分析仅34例CRC，限制敏感度估计的精确性，预设的敏感度>95%目标未达成，尽管达到了模型结肠镜转诊减少的目标，这些发现不能确立分诊的临床安全性，亚组估计应谨慎解读；研究评估的是诊断分类而非实际前瞻性暂缓结肠镜，RAID-CRC Screen阴性参与者的临床结局仍为模型估计；成本效果、参与者可接受性、实验室能力、周转时间和无效qPCR结果管理未评估；需长期随访量化三步策略下未转诊参与者的间隔期CRC风险。结果支持进一步前瞻性评估而非立即全项目推广；务实的影响研究可随机化或分阶段引入微生物分诊，监测结肠镜等待时间，评估安全网和重复检测路径，并测量进展期肿瘤检出、间隔期癌症、成本和参与者报告结局；若定量FIT分布或实验室流程变化，持续校准至关重要。
研究结论：RAID-CRC Screen的诊断性能与既往在FIT阳性筛查参与者中的验证大体一致。微生物分诊与提高FIT阈值在减少结肠镜与病变检出之间呈现不同权衡：轻度阈值调整保留更多病变，而微生物分诊避免更多结肠镜。这些探索性发现未确立任一策略的优越性或临床安全性，其潜在实施需前瞻性安全性评估和经济评价。
