《Current Issues in Molecular Biology》：Association Between Histopathological Stage and Clinicopathological Characteristics of Head and Neck Kaposi Sarcoma: HHV8-Mediated Oncogenesis Within an ART Era in a Resource-Limited Setting of Ga-Rankuwa
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头颈部Kaposi肉瘤（HNKS）是一种与人类疱疹病毒8型（HHV-8）感染及免疫抑制相关的血管性肿瘤，是HIV感染者（PLWHIV）中最常见的恶性肿瘤之一。全面刻画HNKS的病因发病机制及临床病理特征对于及时诊断和预后评估至关重要。本研究为一项回顾性、描述性
头颈部Kaposi肉瘤（HNKS）是一种与人类疱疹病毒8型（HHV-8）感染及免疫抑制相关的血管性肿瘤，是HIV感染者（PLWHIV）中最常见的恶性肿瘤之一。全面刻画HNKS的病因发病机制及临床病理特征对于及时诊断和预后评估至关重要。本研究为一项回顾性、描述性横断面研究，纳入2004年至2024年间经组织病理学确诊的41例HNKS病例。研究人员调取甲醛固定石蜡包埋（FFPE）切片并进行免疫组化（IHC）生物标志物染色。变量间关联采用Fisher精确检验评估。研究病例男女比例为1.05:1，平均年龄33.4 ± 11.6岁。85.4%的患者记录为HIV阳性。结节期占主导（63.4%）；经典型KS为最常见的组织病理学变异型（82.9%）。CD34内皮标志物在所有41例中均阳性（100%）。HHV-8、D2-40和p53的阳性率分别为51.2%、45%和47.5%；高Ki-67（≥15%）见于25%的病例。分期与临床病理特征之间未发现具有统计学意义的关联（均p > 0.05）。流行型KS最为常见，主要影响年轻成人。CD34、D2-40与HHV8联合应用可提高诊断准确性。p53和Ki-67的预后/诊断价值仍有待阐明。
**研究背景与意义**
Kaposi肉瘤（KS）是起源于血管和淋巴管内皮细胞的肿瘤，其病因发病机制主要与人类疱疹病毒8型（HHV-8，又称Kaposi肉瘤相关疱疹病毒KSHV）感染及免疫抑制相关。临床上 recognized 四种流行病学亚型：经典型、非洲型（地方性）、医源性及艾滋病相关型（流行型），此外第五种亚型在HIV阴性男男性行为者（MSM）中日益被认识。在高收入国家，随着抗逆转录病毒治疗（ART）的广泛可及，KS发病率显著下降，但在撒哈拉以南非洲（SSA），由于HIV与HHV-8共感染的交织流行，KS仍是最常见的癌症之一。GLOBOCAN 2024估计2022年全球KS新发病例为34,230例，非洲占全球负担的81.3%。南非2020年报告4,119例新发KS病例，男性发病率较女性高60%。头颈部KS（HNKS）是KS中具有重要临床意义的解剖学亚群，国际研究报告其占所有KS病例的2.9%至38%，在HIV流行地区比例更高。南非HNKS占HIV阳性患者头颈部癌症的35.7%。尽管南非KS负担沉重，但关于HNKS患病率、临床病理特征及免疫表型谱的全面本地数据仍然匮乏，已发表研究多为流行病学性质。头颈部区域临床表现多样，可导致诊断延迟及诊断困境。因此，研究人员开展了此项为期21年的HNKS临床病理及免疫组化特征研究，旨在提供Dr George Mukhari学术实验室（DGMAL）的机构数据，填补证据空白，为高流行资源有限环境下的诊断和临床管理策略提供依据。
**关键技术方法**
本研究为在DGMAL（NHLS，南非Ga-Rankuwa）开展的定量、回顾性、描述性横断面研究，纳入2004年1月1日至2024年12月31日期间诊断的41例HNKS病例。样本量基于南非36%的HNKS患病率估算。病例通过NHLS AARMS中央数据仓库以关键词和SNOMED编码检索识别。从NHLS CDW获取人口学及临床数据（年龄、性别、HIV状态、ART状态、CD4计数、HIV病毒载量、临床表现、解剖部位）。所有病例重新评估以确认KS形态学特征。FFPE模块和H&E染色切片经解剖病理学家复筛确认诊断。组织切片（4 μm）进行H&E染色及免疫组化染色，采用DAKO PT-Link进行抗原修复（高pH缓冲液，97°C，20 min），DAKO Autostainer Link 48自动化染色平台进行染色。检测的标志物包括HHV-8（LANA-1）、CD34、D2-40、p53及Ki-67。Ki-67以阳性核百分比<15%为低表达、≥15%为高表达进行分类。统计学分析采用StataNow version 18.5，连续变量以均值±标准差表示，分类变量以频数和百分比表示，采用Fisher精确检验评估组织病理分期与各变量间的关联，显著性预设为p < 0.05（双尾）。
**研究结果**
**临床呈现与解剖分布**：最常见临床表现为皮损（斑疹、丘疹、斑块及紫罗兰色结节），占34%，其次为肿瘤肿块（27%）、肿胀（19%）及溃疡（12%）。皮肤KS为最常见受累类型（23例，56.1%），面部皮肤（17.1%）和颈部皮肤（17.1%）为最常见皮肤部位，硬腭（12.2%）为最常见黏膜部位。多灶性受累见于8例（19.5%）。通过临床资料总结得出HNKS以皮肤表现为主，头颈部皮肤及口腔黏膜为常见受累部位。
**组织病理分期与变异型分布**：41例均完成组织病理分类与分期。结节期占主导（26例，63.4%），经典型KS为最常见变异型（34例，82.9%），其次为化脓性肉芽肿样KS（6例，15.0%）及淋巴管瘤样KS（1例，2.5%）。所有非经典型变异型均局限于结节期。组织学变异型与组织病理分期之间无统计学显著关联（p = 0.837）。通过组织病理学评估得出结节期和经典型为HNKS的主要组织学类型。
**免疫组化发现**：41例均纳入免疫组化分析，1例因组织不足被排除于其他标志物分析。CD34在所有41例中阳性（100.0%），确认整个队列的血管内皮谱系，不受组织病理分期、组织学变异型、HIV状态或ART状态影响。通过免疫组化染色得出CD34在HNKS中具有普遍阳性表达。
**诊断标志物**：HHV-8（LANA-1）表达见于21例（51.2%），其中多数为结节期（17例，65.4%）。D2-40（podoplanin）阳性18例（45.0%），符合淋巴管内皮分化。HHV-8与D2-40共表达见于10例（25.0%）；至少一种诊断标志物阳性见于28例（70.0%）。所有HHV-8阳性病例均为HIV阳性。通过免疫组化分析得出HHV-8和D2-40阳性率低于多数文献报道，联合应用可提高诊断检出率。
**预后标志物**：p53阳性19例（47.5%），其中63.2%为结节期（12例），26.3%为斑块期（5例），10.5%为斑疹期（2例）。Ki-67增殖指数在40例中30例（75.0%）为低表达（≤15%），平均增殖指数为12.6%。高Ki-67表达（>15%）见于10例（25%），主要为结节期病变（9例）。通过免疫组化分析得出p53和Ki-67在结节期病变中呈数值上更高的表达趋势，但未达统计学显著性。
**组织病理分期与临床病理特征的关联**：Fisher精确检验显示组织病理分期与大多数人口学、临床病理及免疫组化变量之间无统计学显著关联（均p > 0.05）。HHV-8与组织病理分期呈统计学显著关联（p = 0.040），以结节期最为常见。通过Fisher精确检验得出HHV-8表达与组织病理分期之间存在显著关联。
**讨论部分总结**
本研究在HIV高流行、资源有限环境下对HNKS进行了为期21年的全面临床病理及免疫组化特征刻画。HNKS主要影响第四十年段的年轻HIV阳性成人，性别分布接近均等，反映了撒哈拉以南非洲HIV流行的女性化趋势。结节期和经典型疾病占主导，与延迟就诊和诊断时已处晚期疾病一致，这一模式在多项非洲和亚洲队列研究中均有报道。本研究为南非首个整合临床病理与免疫组化特征刻画的机构研究，为HNKS肿瘤微环境研究贡献了 novel 数据。研究观察到轻度男性优势（男女比1.05:1），与欧洲和北美报告中高达10:1的男女比相比明显更窄，可能反映南非女性中HIV高流行率。HNKS与HIV感染的强关联（85.4%阳性，无 confirmed HIV阴性病例）与已发表文献一致。ART状态未知比例高（45%）凸显了资源有限环境下早期HIV诊断、记录和治疗依从性的持续挑战。结节期疾病占主导（63.4%）与尼日利亚（48.1%）、坦桑尼亚（60.5%）和巴基斯坦（74.5%）的病例系列研究一致，可能反映延迟就医。经典型KS变异型为最常见亚型（82.9%），与文献报道一致。所有非经典型组织学变异型均局限于结节期病变，与疾病进展时出现的更大结构复杂性一致。化脓性肉芽肿样KS（15.0%）是临床重要发现，因该变异型酷似分叶状毛细血管瘤，需免疫组化确认以避免误诊。HHV-8阳性率51.2%显著低于多数已发表病例系列报告的接近100%的阳性率，提示在ART及其他治疗模式下HHV-8免疫组化可能出现假阴性结果。平台相关的HHV-8检测变异性已有文献记载，长期存档FFPE存储（本队列长达20年）可能损害抗原保存，ART诱导的HHV-8病毒复制抑制也可能降低核内LANA-1的可利用性。CD34的普遍阳性（100%）确认了所有分期和变异型的血管内皮分化，支持其作为资源有限环境下的辅助确认标志物。p53和Ki-67结果虽未达统计学显著性，但在结节期病变中呈数值上更高的表达（p53阳性病例中63.2%及高Ki-67病例中90%为结节期），这一模式与HHV-8 LANA-1介导的早期疾病p53抑制及晚期病变中渐进性积累一致，也与肿瘤进展中增殖活性增加一致。所有HHV-8阳性病例均为HIV阳性，凸显了两种病毒在HNKS发生中的关键致癌协同作用。HHV-8的LANA-1通过抑制p53介导的凋亡和失调Rb/E2F细胞周期通路促进肿瘤发生。HIV通过渐进性CD4+ T淋巴细胞耗竭和慢性免疫激活破坏正常抑制HHV-8裂解复制和肿瘤细胞扩增的免疫监视机制。联合免疫组化面板（CD34、D2-40和HHV-8 LANA-1）提高了诊断准确性；CD34普遍阳性（100%）在HHV-8和D2-40阴性结果时确认内皮谱系尤为有价值，凸显其作为资源有限环境下关键一线诊断标志物的作用。p53和Ki-67在结节期疾病中展示了生物学相关趋势，值得在更大前瞻性队列中进一步研究。这些发现共同强调了资源有限环境下HNKS固有的诊断挑战，倡导采用可靠的、经确认的免疫组化面板以提高诊断准确性，并需要常规实施原位杂交和聚合酶链反应等分子技术对免疫组化阴性病例进行HHV-8确认。
**结论翻译**
头颈部KS在此HIV高流行、资源有限环境中主要影响年轻HIV阳性成人，以结节期和经典型疾病为主。CD34普遍阳性确认了所有病例的血管内皮谱系，支持其作为辅助诊断标志物的应用。存档FFPE材料中观察到的HHV-8和D2-40次优检出率强调了联合诊断免疫组化面板的重要性以及在免疫组化结果不明确时进行PCR/分子基HHV-8确认的必要性。p53和Ki-67在结节期疾病中观察到的趋势提示其作为晚期疾病潜在预后/预测生物标志物的生物学相关性；需要更大前瞻性研究确立其临床效用。加强HIV监测、早期ART启动和改善治疗依从性仍是减轻撒哈拉以南非洲HNKS负担的关键。
