GLP标准下人骨髓来源间充质干细胞致瘤性与致癌性安全性研究

《Stem Cell Research & Therapy》：Exploratory study on the tumorigenicity and oncogenicity of human bone marrow mesenchymal stem cells

　　

摘要

背景

间充质干细胞（MSCs）作为再生医学和细胞治疗领域中流行的产品，由于其多向分化潜能、免疫调节特性和低免疫原性等特性，在治疗多种疾病方面展现出了巨大的潜力。然而，关于其临床应用的安全性问题，特别是致癌风险，已成为阻碍其快速及广泛应用的关键因素。

方法

在这项研究中，我们根据NMPA的《人体干细胞产品临床前研究技术指南》的要求，在严重免疫缺陷的NOG小鼠中进行了符合GLP标准的致瘤性（n=20）和致癌性（n=30）研究：试验用的为人骨髓来源的间充质干细胞（hBMMSC），来自一名健康的捐赠者。制造商Jiuzhitang Maker在GLP测试前完成了多供体可比性研究，确认该供体批次在其异体hBMMSC平台中表现出了中等水平的代表性质量，但研究结果不能推广到无关供体或其它组织来源的MSCs。在评估致癌性时，我们首先建立了NOG小鼠自发肿瘤谱和发生率的背景数据库，以排除自发病变的干扰，然后准确评估hBMMSC的致癌性。本文采用的参考人体临床基础剂量为0.5×10?细胞/千克，广泛的临床安全窗口支持在多种疾病适应症下的常规全身输注剂量，范围从0.5×10?到2×10?细胞/千克。我们设置了低（6倍临床剂量）和高（50倍临床剂量）的超临床剂量，并在不同总给药频率下观察了病变结果。

结果

致瘤性研究显示，hBMMSC没有表现出肿瘤形成的证据，这与先前的研究结果一致。组织学和qPCR分析表明，在NOG小鼠中，无论是低剂量（3×10?细胞/小鼠，相当于临床剂量的6倍）给药10次还是高剂量（2.5×10?细胞/小鼠，相当于临床剂量的50倍）给药6次后，均未发现与治疗相关的肿瘤病变。然而，至少给予7次高剂量后，出现了一些在NOG小鼠背景数据中不存在的肿瘤类型，同时肝细胞腺瘤的发生率也增加了。免疫组化和qPCR分析显示这些肿瘤起源于小鼠，尽管在肿瘤中检测到了人类细胞成分。

结论

这些结果表明，在极端高剂量和高频率给药的情况下，MSCs可能会促进受试者的肿瘤形成。这些相关发现并不表明在标准的人类临床剂量范围（0.5×10?–2×10?细胞/千克）内存在致癌风险，但对于包含极端重复高剂量输注的临床方案仍需谨慎对待，建议所有MSC临床试验受试者进行长期肿瘤监测。