《HLA》：Association of HLA-B Leader With BK Polyomavirus and Cytomegalovirus Infections in Kidney Allograft Recipients
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自然杀伤（NK）细胞的驯化与功能依赖于HLA-E的表达，而HLA-E的表达受二态性HLA-B先导肽（?21M vs. ?21T）的影响。NK细胞有助于控制肾移植术后BK多瘤病毒（BKPyV）和巨细胞病毒（CMV）感染，但HLA-B先导序列的作用尚不明确。研究人
自然杀伤（NK）细胞的驯化与功能依赖于HLA-E的表达，而HLA-E的表达受二态性HLA-B先导肽（?21M vs. ?21T）的影响。NK细胞有助于控制肾移植术后BK多瘤病毒（BKPyV）和巨细胞病毒（CMV）感染，但HLA-B先导序列的作用尚不明确。研究人员回顾性研究了700例具有高分辨率受者/供者HLA分型的肾移植病例，确定了受者的HLA-B先导基因型（MM 6%，MT 39%，TT 55%）以及受者/供者配型格局（345/700 [49%]匹配，355/700 [51%]不匹配）。采用单因素分析及多因素Cox回归和逻辑回归评估其与BKPyV（诱饵细胞脱落、BKPyV-DNA血症、疑似BKPyV相关性肾病[BKPyVAN]）和CMV（DNA血症、疾病）1年发生率和严重程度的关联。诱饵细胞脱落1年累积发生率在各基因型间相似（MM 28.3%，MT 29.0%，TT 33.5%；p = 0.37），匹配与不匹配受者间亦无差异（31.0% vs. 31.8%；p = 0.79）；BKPyV-DNA血症发生率同样不因基因型（MM 19.6%，MT 16.5%，TT 18.9%；p = 0.73）或配型格局（15.9% vs. 20.0%；p = 0.16）而异。在多因素模型中，基因型和配型格局均与诱饵细胞脱落、BKPyV-DNA血症或疑似BKPyVAN的发生无关。CMV-DNA血症发生率亦不因基因型（MM 19.6%，MT 30.9%，TT 28.8%；p = 0.35）或配型格局（27.0% vs. 31.0%；p = 0.25）而异。在多因素模型中，基因型和配型格局均与CMV-DNA血症或CMV疾病的发生无关。总之，HLA-B先导序列与肾移植受者移植后第一年内BKPyV和CMV感染的发生及严重程度均无关。这一结果不支持利用HLA-B先导序列信息指导BKPyV或CMV筛查策略。
**研究背景与意义**
肾移植术后巨细胞病毒（CMV）和BK多瘤病毒（BKPyV）感染是常见并发症，可导致移植物丢失甚至患者死亡。目前CMV方面已有明确的移植前供者（D）/受者（R）血清学状态风险分层体系（低风险R?/D?、中风险R+/D?或R+/D+、高风险R?/D+）用于指导筛查和抗病毒预防，但BKPyV尚缺乏足够显著的移植前风险因素来指导临床管理。除CD8+细胞毒性T细胞外，自然杀伤（NK）细胞在病毒感染控制中发挥重要作用。NK细胞的驯化和功能部分由抑制性受体NKG2A与HLA-E的结合所塑造，而HLA-E在细胞表面的表达依赖于HLA先导序列衍生肽的稳定结合。HLA-B先导序列具有二态性，在第?21位为甲硫氨酸（M）或苏氨酸（T）。研究表明，?21M先导肽比?21T先导肽更有效地上调HLA-E表达，从而促进NK细胞驯化和功能。受者的HLA-B先导序列可能对控制任何病毒感染都重要，但BKPyV的情况可能更为复杂，因为BKPyV主要在移植肾中复制，受者/供者之间的HLA-B先导序列配型格局也可能影响病毒控制。2025年Aubry等首次探索了HLA-B先导序列配型格局与肾移植术后CMV和BKPyV感染的关联，在306例受者中发现受者/供者HLA-B先导序列不匹配与移植后第一年内BKPyV-DNA血症或BKPyV-DNA尿>7 log10拷贝/mL风险降低52%相关，但未发现与CMV-DNA血症的关联。该研究样本量较小、缺乏供者高分辨率HLA分型、且对CMV和BKPyV感染表型缺乏细化描述，作者承认需要在更大独立队列中验证。本研究旨在通过700例特征明确的肾移植受者，独立验证并扩展上述发现，探究高分辨率HLA分型确定的HLA-B先导序列与BKPyV和CMV感染发生及严重程度的关联。
**关键技术方法**
本研究为单中心回顾性队列分析，纳入2014年1月至2024年12月在巴塞尔大学医院接受肾移植的848例患者，排除移植后第一年内移植物丢失或死亡、撤回机构一般同意、未接受诱导治疗、维持免疫抑制方案非标准他克莫司（Tac）-霉酚酸（MPA）-泼尼松（P）方案及数据缺失者，最终纳入700例。所有供受者均采用下一代测序（NGS）进行包含11个位点的高分辨率HLA分型，通过IMGT数据库（版本3.62）序列信息确定HLA-B先导肽第?21位氨基酸。BKPyV筛查采用定期尿诱饵细胞检测及血浆定量核酸检测（QNAT），CMV筛查依据移植前血清学风险分层进行定期血浆QNAT监测。统计分析使用JMP 19.1.1和R 4.6.0，采用Kaplan–Meier曲线和log-rank检验进行时间-事件分析，构建多因素Cox比例风险回归模型和二元逻辑回归模型评估独立性关联。
**研究结果**
**受者HLA-B先导基因型与基线特征**：最频见的HLA-B先导基因型为TT（n = 382；55%），其次为MT（n = 272；39%）和MM（n = 46；6%）。318例受者（45%）至少携带一个?21M肽，382例（55%）不携带?21M肽。携带?21M肽的受者接受Valganciclovir CMV预防的比例略高（39% vs. 31%；p = 0.04），HLA错配数较少（中位7 vs. 8；p = 0.02），且更常携带HLA-B7、?B8或?B51等位基因（78% vs. 23%；p < 0.001）。
**受者/供者HLA-B先导配型格局与基线特征**：345/700例（49%）HLA-B先导序列匹配，355/700例（51%）不匹配。匹配组中MM/MM 7例（2%）、MT/MT 119例（34%）、TT/TT 219例（64%）；不匹配组中MM/MT 26例（7%）、MM/TT 13例（4%）、MT/MM 32例（9%）、MT/TT 121例（34%）、TT/MM 16例（5%）、TT/MT 147例（41%）。组间在受者年龄（p < 0.001）、HLA错配数（p < 0.001）及携带HLA-B7、?B8或?B51等位基因比例（p < 0.001）方面存在显著差异。
**受者HLA-B先导序列与BKPyV感染**：移植后1年诱饵细胞脱落发生率在三组间无差异（MM 28.3%，MT 29.0%，TT 33.5%；log-rank p = 0.37）；BKPyV-DNA血症发生率亦无差异（MM 19.6%，MT 16.5%，TT 18.9%；log-rank p = 0.73）；BKPyV感染表型分布无显著差异（p = 0.53）。多因素Cox模型中HLA-B先导基因型与诱饵细胞脱落及BKPyV-DNA血症无关；多因素逻辑回归中与高BKPyV-DNA血症>10′000 GEq/mL（即疑似BKPyVAN）亦无关（p = 0.34）。按?21M肽存在/缺失分组（MM或MT vs. TT）分析，结果一致：诱饵细胞脱落（28.9% vs. 33.5%；p = 0.16）、BKPyV-DNA血症（17.0% vs. 18.9%；p = 0.56）及感染表型（p = 0.54）均无差异；多因素模型中亦无关联（诱饵细胞脱落HR 0.96 [95% CI 0.69–1.32]，p = 0.80；BKPyV-DNA血症HR 1.19 [95% CI 0.79–1.81]，p = 0.41；疑似BKPyVAN OR 1.42 [95% CI 0.84–2.14]，p = 0.19）。
**受者/供者HLA-B先导配型格局与BKPyV感染**：匹配与不匹配组间诱饵细胞脱落发生率无差异（31.0% vs. 31.8%；log-rank p = 0.79）；BKPyV-DNA血症发生率无差异（15.9% vs. 20.0%；log-rank p = 0.16）；BKPyV感染表型无显著差异（p = 0.25）。多因素Cox模型中HLA-B先导配型格局与诱饵细胞脱落（HR 0.93 [95% CI 0.70–1.21]，p = 0.57）及BKPyV-DNA血症（HR 0.75 [95% CI 0.52–1.08]，p = 0.12）无关；多因素逻辑回归中与疑似BKPyVAN亦无关（OR 0.88 [95% CI 0.56–1.38]，p = 0.58）。值得注意的是，携带HLA-B7、HLA-B8或HLA-B51等位基因的患者诱饵细胞脱落风险较低（HR 0.74 [95% CI 0.56–0.97]；p = 0.03）、BKPyV-DNA血症风险较低（HR 0.63 [95% CI 0.44–0.91]；p = 0.01）及疑似BKPyVAN风险较低（OR 0.58 [95% CI 0.36–0.91]；p = 0.02）。对四种最常见个体配型格局（MT/MT、MT/TT、TT/MT、TT/TT）的分析未观察到诱饵细胞脱落（p = 0.43）、BKPyV-DNA血症（p = 0.37）及感染表型（p = 0.32）的差异。
**受者HLA-B先导序列与CMV感染**：移植后1年CMV-DNA血症发生率在三组间无差异（MM 19.6%，MT 30.9%，TT 28.8%；log-rank p = 0.35）；CMV感染表型无显著差异（p = 0.57）。多因素Cox模型中HLA-B先导基因型与CMV-DNA血症无关；多因素逻辑回归中与CMV疾病亦无关（p = 0.93）。按?21M肽存在/缺失分组，CMV-DNA血症发生率无差异（29.3% vs. 28.8%；p = 0.97），感染表型无差异（p = 0.59）；多因素模型中亦无关联（CMV-DNA血症HR 1.15 [95% CI 0.82–1.61]，p = 0.42；CMV疾病OR 0.88 [95% CI 0.45–1.73]，p = 0.71）。
**受者/供者HLA-B先导配型格局与CMV感染**：匹配与不匹配组间CMV-DNA血症发生率无差异（27.0% vs. 31.0%；log-rank p = 0.25）；CMV感染表型无显著差异（p = 0.29）。多因素Cox模型中受者年龄（HR 1.16 [95% CI 1.04–1.29]，p = 0.007）和CMV血清学状态（p < 0.001）与CMV-DNA血症显著相关，但HLA-B先导配型格局无关（HR 0.88 [95% CI 0.66–1.17]，p = 0.37）。HLA-B先导序列与CMV疾病亦无关（OR 1.10 [95% CI 0.62–1.93]，p = 0.75）。CMV血清学状态仍与CMV疾病显著相关（以低风险为参照；中风险OR 8.23 [95% CI 1.92–35.19]；高风险OR 33.69 [95% CI 6.11–185.79]，p < 0.001）。四种最常见个体配型格局间CMV-DNA血症（p = 0.56）及CMV感染表型（p = 0.48）均无差异。
**讨论与结论**
本研究的主要发现是肾移植后第一年内CMV和BKPyV感染的发生及严重程度均与受者HLA-B先导基因型及受者/供者HLA-B先导配型格局无关。这些发现证实了Aubry等关于CMV-DNA血症的观察，但与其报道的HLA-B先导序列不匹配对BKPyV-DNA血症具有强保护作用的数据相矛盾。两个队列在样本量（n = 306 vs. n = 700）和活体供肾移植比例（8% vs. 41%）方面存在差异，但在受者和供者HLA-B先导基因型频率及所用免疫抑制方案方面非常相似。BKPyV-DNA血症阳性阈值不同（Aubry定义为>200 c/mL或BKPyV-DNA尿>10? c/mL，本研究为>1000 GEq/mL），但定义的BKPyV事件总发生率相似（23% vs. 18%），而CMV-DNA血症发生率在Aubry研究中更高（40% vs. 29%）。作者推测BKPyV-DNA血症与HLA-B先导序列不匹配的关联在本研究中未被证实可能部分与更大的样本量有关。这种差异的主要原因可能在于影响肾移植受者病毒感染易感性的多种因素之间的复杂相互作用，包括免疫抑制水平、病毒致病因子、CD8+细胞毒性T细胞和NK细胞功能、受者和供者HLA表型、NK细胞受体及其配体以及HLA-E多态性和表达水平等。值得注意的是，有研究提出?21M先导肽比?21T先导肽更有效地促进抗病毒反应，因为其结合HLA-E更高效并导致更高的HLA-E细胞表面表达，可能有助于更好的NK细胞驯化；然而Lin等证明?21M先导肽尽管导致更高的HLA-E细胞表面表达，但作为CD94/NKG2A的配体较差，并可能通过与其他受体识别更好的配体竞争而降低CD94/NKG2A对靶细胞的识别，这说明了HLA-B先导肽与抗病毒保护之间的复杂关系。与既往报道一致，受者HLA-B7和/或HLA-B8和/或HLA-B51抗原似乎与肾移植后BKPyV感染风险较低相关，这一效应在诱饵细胞脱落、新发BKPyV-DNA血症及疑似BKPyVAN中均观察到，但计算的BKPyV-DNA血症风险降低仅为37%，将1年BKPyV-DNA血症发生率从18%降至11%，虽然具有概念意义但不足以选择性地调整BKPyV筛查或管理流程。有趣的是，受者HLA-B7和/或HLA-B8和/或HLA-B51抗原对CMV感染无保护作用，提示该效应为BKPyV特异性。本研究的优势包括队列规模（n = 700）、通过受者和供者高分辨率HLA分型准确确定HLA-B先导二态性、对BKPyV和CMV感染的细化评估以及统一的基于Tac-MPA-P的维持免疫抑制方案。局限性包括：单中心回顾性分析，人群几乎全部为白种人，结果可能不完全适用于其他种族患者；仅适用于接受Tac-MPA-P维持免疫抑制联合巴利昔单抗或ATG诱导的患者；研究人群可能仍不足以检测HLA-B先导序列对BKPyV或CMV感染的微小效应；缺乏HLA-E分型数据。研究结论部分翻译如下：受者HLA-B先导基因型和受者/供者HLA-B先导配型格局与肾移植受者移植后第一年内BKPyV和CMV感染的发生及严重程度均无关。这一结果不支持利用HLA-B先导序列信息指导当前BKPyV和CMV的筛查与管理策略。
