《Animals》：Molecular Detection of Bacterial Abortion Agents and Assessment of Serum MDA and GSH Levels in Aborting Small Ruminants in Siirt Province
编辑推荐：
绵羊和山羊养殖中的流产会造成重大经济损失并导致生产力严重下降。本研究的目的是检测小型反刍动物流产病例中相关病原体的存在情况，包括流产衣原体（Chlamydia abortus, C. abortus）、贝氏柯克斯体（Coxiella burnetii, C.
绵羊和山羊养殖中的流产会造成重大经济损失并导致生产力严重下降。本研究的目的是检测小型反刍动物流产病例中相关病原体的存在情况，包括流产衣原体（Chlamydia abortus, C. abortus）、贝氏柯克斯体（Coxiella burnetii, C. burnetii）、李斯特菌属（Listeria spp.）、单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes, L. monocytogenes）和弯曲菌属（Campylobacter spp.），并评估某些血清氧化应激参数。研究采用聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）方法共检测了215份阴道拭子样本（绵羊 = 158；山羊 = 57）。为评估优势细菌性病原体的影响，研究在一个针对性亚组（n = 140）中分析了血清丙二醛（malondialdehyde, MDA）和谷胱甘肽（glutathione, GSH）水平，该亚组由弯曲菌属阳性动物（n = 70）和病原体阴性流产对照动物（n = 70）组成。PCR分析显示总阳性率为34.41%（n = 74），其中弯曲菌属的检出率为32.55%（70/215），流产衣原体为1.86%（4/215），而其他目标病原体（贝氏柯克斯体和李斯特菌属）均未检出。在弯曲菌属阳性组中，血清MDA水平（32.14 ± 0.89）显著高于对照组，GSH水平（32.92 ± 3.25）显著低于对照组（分别为9.30 ± 2.33和103.12 ± 1.63；p < 0.001；效应量r = 0.86），不同物种间存在显著差异（p < 0.05），但感染绵羊与感染山羊之间无物种间差异（p > 0.05）。总之，弯曲菌属可能在锡尔特省的小型反刍动物流产中发挥重要作用，并可能伴随细胞氧化应激。
**研究背景**
小型反刍动物养殖对土耳其国民经济贡献显著，锡尔特省（Siirt Province）凭借有利自然条件成为肉、奶、毛兼用的绵羊和山羊重要产区。然而，流产造成重大经济损失并严重降低畜群生产力。细菌性流产的主要病原体包括弯曲菌属（Campylobacter spp.）、单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）、贝氏柯克斯体（Coxiella burnetii）和流产衣原体（Chlamydia abortus），其中后两者具人兽共患（zoonotic）特性，对接触感染动物的饲养者和兽医构成公共卫生风险。氧化应激（oxidative stress，活性氧（reactive oxygen species, ROS）生成增多而机体无法中和的状态）相关参数可作为感染性疾病的辅助诊断与预后标志物：丙二醛（malondialdehyde, MDA，脂质过氧化天然终产物，反映细胞氧化损伤）与谷胱甘肽（glutathione, GSH，关键抗氧化标志物，作为抗氧化酶辅因子维持氧化还原稳态）是两类代表指标。但PCR筛查仅能提供诊断与流行病学数据，无法反映感染动物的病理生理状态。为此，M.Y.、S.A.、?.G.和M.K.等研究人员开展本研究，旨在确定锡尔特省绵羊和山羊细菌性流产病原体的分子流行率，并评估最常见病原体阳性动物的血清MDA和GSH水平以反映宿主细胞应激。
**研究方法**
研究人员于2026年1—4月从土耳其锡尔特省10个家庭农场的流产动物（158只绵羊、57只山羊）采集样本。关键技术方法包括：（1）PCR分子检测，特异性引物扩增目标细菌DNA后行琼脂糖凝胶电泳验证，并设阴性对照监测污染；（2）分光光度法检测血清MDA（MDA与硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid, TBA）反应产物于532 nm测定）与GSH（巯基还原5,5′-二硫代双(2-硝基苯甲酸)（5,5′-dithiobis(2-nitrobenzoic acid), DTNB）后于412 nm记录黄色强度）；（3）基于Python的统计分析，经Shapiro-Wilk检验判定非正态分布后采用Mann-Whitney U检验、Bonferroni校正（α
adjusted = 0.05/5 = 0.01）、Spearman秩相关及Bootstrap法（5000次重抽样），检测人员对PCR状态设盲。
**研究结果**
**3.1 PCR检测结果**
PCR分析显示，215份样本中74份（34.41%，95% CI: 28.39–40.99%）检出目标细菌：70份为弯曲菌属阳性（32.55%，95% CI: 26.65–39.08%），4份为流产衣原体阳性（1.86%，95% CI: 0.73–4.69%），未检出贝氏柯克斯体和李斯特菌属。弯曲菌属在57只山羊中检出4只（7.01%），在158只绵羊中检出66只（41.77%）；流产衣原体阳性样本来自3只绵羊和1只山羊，且均未发生混合感染。研究人员从目标病原体全部阴性的样本中经简单随机抽样选取70只动物（50只绵羊、20只山羊）作为对照组；4份流产衣原体阳性样本因样本量不足且为避免干扰氧化应激谱被排除于生化分析之外。
**3.2 血清氧化应激参数评估与两两比较**
在总体样本（n = 140）中，弯曲菌属阳性组血清MDA水平（均值32.14 ± 0.89）显著高于对照组（9.30 ± 2.33），GSH水平（32.92 ± 3.25）显著低于对照组（103.12 ± 1.63），差异均p < 0.001，效应量r = 0.86（large）。物种内比较显示，MDA和GSH在绵羊（r = 0.85）与山羊（r = 0.63）中的阳性与阴性差异均显著（p < 0.05）；物种间比较无论感染状态如何均无统计学显著差异（p > 0.05）。
**3.3 相关性与分布分析**
总体样本中血清MDA与GSH呈高度负相关（ρ = ?0.736，p < 0.001），绵羊中类似（ρ = ?0.738，p < 0.001），山羊中无统计学意义（ρ = ?0.334，p = 0.111）；两个感染状态亚组内部均未检测到显著相关。数据呈现两个不重叠集群——弯曲菌属阳性动物（高MDA/低GSH）与阴性对照（低MDA/高GSH），总体负相关反映的是两集群间的聚集效应而非组内的连续生物学相关。
**讨论**
研究人员将结果与国内外文献比较：锡尔特省弯曲菌属检出率（32.55%）显著高于土耳其凡城报道的2.8%及国际研究的3.7%和1.7%，这一高流行率被认为与以转场（transhumance，季节性移动放牧）系统为主的管理方式相关——畜群在运输应激下频繁共享水源与牧场，且阴道拭子样本可能提高了带菌DNA检出的敏感性；由于PCR为属水平检测、未做种特异性区分，所有观察反映的是总弯曲菌属感染情况。流产衣原体检出率（1.86%）低于多数研究，研究人员认为可能与样本类型有关：既往研究多检测胎盘、胎儿肝等靶组织，而流产衣原体具明显胎盘亲嗜性、流产后的阴道携带时间有限，仅使用阴道拭子可能降低检出率，且游牧饲养者的经验性抗生素应用也可能抑制阴道带菌。李斯特菌属全阴性与部分研究的0%结果一致，或与当地不饲喂青贮及发酵饲料有关；贝氏柯克斯体未检出可能源于其阴道带菌的周期性下降或区域蜱防控差异。氧化应激方面，阳性组MDA升高伴GSH降低与文献报道的细菌生殖感染期间细胞抗氧化平衡变化一致；横断面观察反映的是强关联而非已证实的直接因果机制。研究局限包括：阴道拭子对高胎盘亲嗜性病原体检测灵敏度有限；山羊阳性数少（n = 4）；未设完全健康对照组；未行传统细菌培养；PCR缺乏扩增子测序验证且为属水平检测。
**结论**
本研究表明，在锡尔特省游牧养殖条件下，弯曲菌属是流产小型反刍动物中频繁检出的细菌性病原体，共享牧场与水源及兽医预防方案的局限为其传播创造了条件；所评估病原体的人兽共患性质对接触感染动物或污染材料的饲养者和现场兽医构成公共卫生风险，因此加强生物安全措施、改善转场路线水源卫生并提升现场意识是必要措施。血清生物标志物评估显示，弯曲菌属阳性伴随脂质过氧化指标（MDA）升高和抗氧化防御（GSH）降低，提示在高风险妊娠期将抗氧化剂组合（如维生素E、硒和维生素C）与标准抗菌治疗结合是值得关注、需在前瞻性干预性试验中验证的临床假设。
