《PLOS One》：Epidemiological surveillance of bacterial pathogens in cultured European sea bass (Dicentrarchus labrax) along the Aegean coast of Türkiye
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本研究开展了一项为期多年（2020–2025年）的回顾性监测计划，对分布于土耳其爱琴海沿岸19个独立商业化海水养殖场的748次笼养级疾病暴发事件进行了跟踪。研究人员对5,235尾显示临床症状的鱼进行了诊断性尸检，通过API 20E系统的表型鉴定和器官触印细胞学
本研究开展了一项为期多年（2020–2025年）的回顾性监测计划，对分布于土耳其爱琴海沿岸19个独立商业化海水养殖场的748次笼养级疾病暴发事件进行了跟踪。研究人员对5,235尾显示临床症状的鱼进行了诊断性尸检，通过API 20E系统的表型鉴定和器官触印细胞学检查进行推定细菌鉴定。从阳性临床个体中共分离到六个不同菌种，获得2,490株分离物。在所有记录的暴发事件中，病原体作为主要驱动因素的排序如下：杀鱼巴斯德氏菌（Photobacterium damselae subsp. piscicida）（48.80%；N=365）、海生滑行菌（Tenacibaculum maritimum）（35.83%；N=268）、鳗弧菌（Vibrio (Listonella) anguillarum）（9.49%；N=71）、哈维弧菌（V. harveyi）（3.74%；N=28）、奥达利弧菌（V. ordalii）（1.20%；N=9）和溶藻弧菌（V. alginolyticus）（0.94%；N=7）。这一排序直接反映了总体的细菌分离频率，其中杀鱼巴斯德氏菌的相对分布率最高（46.18%；n=1,150），其次是海生滑行菌（34.10%；n=849）。鳗弧菌（11.41%；n=284）、哈维弧菌（5.26%；n=131）、奥达利弧菌（1.77%；n=44）和溶藻弧菌（1.29%；n=32）的分离率显著较低。对纯化实验室分离物的描述性追踪显示，三个区域的诊断回收频率存在局部差异，但在整个东爱琴海土耳其海水养殖网络中，建立了以杀鱼巴斯德氏菌和海生滑行菌为主导的高度稳定的基线特征。
研究背景与目的
水产养殖是全球增长最快的动物食品生产部门之一，在欧洲，海水鱼类占区域水产养殖产量的83%。土耳其是欧洲领先的水产养殖国家之一，2024年其欧洲鲈鱼（Dicentrarchus labrax）产量达到165,550吨。然而，产业的快速扩张带来了运营和管理挑战，如季节性水温波动、养殖密度和水质参数变化等环境应激源直接影响病原体动态和毒力，导致疾病暴发和生产成本增加。尽管已有关于土耳其地区孤立疾病病例的报告，但长期、多年度、涵盖多农场的区域性细菌病原体基线数据仍然缺乏。为此，研究人员开展了一项为期多年（2020–2025年）的监测项目，旨在调查土耳其爱琴海沿岸养殖欧洲鲈鱼的细菌病原体流行情况，建立区域病原体图谱及其相关的肉眼病变档案，并记录宏观区域的描述性频率分布。
研究内容与结论
研究人员对来自19个独立商业海水养殖场的748次笼养级疾病暴发事件中的5,235尾症状鱼进行了系统性监测。通过事件驱动的便利抽样方法，在每日死亡率超过预设阈值时触发现场采样。研究确认了六种主要细菌病原体，按暴发事件级别排序为：杀鱼巴斯德氏菌（Photobacterium damselae subsp. piscicida）（48.80%）、海生滑行菌（Tenacibaculum maritimum）（35.83%）、鳗弧菌（Vibrio (Listonella) anguillarum）（9.49%）、哈维弧菌（V. harveyi）（3.74%）、奥达利弧菌（V. ordalii）（1.20%）和溶藻弧菌（V. alginolyticus）（0.94%）。研究得出结论，杀鱼巴斯德氏菌和海生滑行菌是沿爱琴海海岸线的主导病原体，其优势地位远超其他四种弧菌科物种。尽管三个宏观区域间存在局部波动，但总体病原体分布模式高度相似，表明该海水养殖网络面临共同的基线细菌威胁。这项研究的重要意义在于提供了首个全面的、行业层面的多年度流行病学基线，为将鱼类健康管理从被动治疗转向预测性、宏观区域的生物安全策略提供了数据支撑。
主要关键技术方法
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事件驱动的便利采样策略：基于预设的每日死亡率阈值（特定网箱连续三日死亡率超过2%），触发现场诊断和样本采集。样本来源于土耳其爱琴海东部沿海的19个商业海水养殖场，为保护商业机密，数据按北、中、南三个宏观区域汇总分析。
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病理学与细胞学诊断：对所有采集鱼只进行完整的肉眼病理检查和系统尸检。制备外周血湿片、脾脏、肝脏和脑组织的器官触印片，采用改良革兰染色和抗酸染色进行显微镜下细胞学评估。
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细菌分离与表型鉴定：通过无菌操作从肾脏组织或尾静脉血液中进行细菌培养，使用多种培养基（如BHIA、TSA、TCBS、MSA-B及Marine agar 2216）。对纯化菌落进行基础生化特性测试（如革兰染色、氧化酶、过氧化氢酶、O129敏感性），并利用API 20E系统进行推定性菌种鉴定。
研究结果
流行病学分母与监测人口统计
在748次暴发事件中，共对5,235尾鱼进行了宏观和细胞学检查，其中5,025尾（95.99%）确诊为细菌性疾病阳性。临床混合感染（外部皮肤海生滑行菌合并内部系统性病原体）在142尾鱼（2.71%）中被识别。该诊断策略共获得2,490株纯化细菌分离物，整体研究分离成功率为95.11%。
细菌分离与表型鉴定
最常见的分离菌种（按降序排列）为杀鱼巴斯德氏菌、海生滑行菌、鳗弧菌、哈维弧菌、奥达利弧菌和溶藻弧菌。所有菌种的表型和生化特征在不同采样地点和年份间高度一致，仅在柠檬酸盐利用试验中观察到杀鱼巴斯德氏菌和鳗弧菌的变异性反应。
肉眼病理与临床观察
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杀鱼巴斯德氏菌：影响所有年龄段的鱼，表现为体色变暗、游动迟缓、脾脏肿大伴有白色结节，急性病例中细菌可在血液中循环，幼鱼死亡率可高达90%。
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海生滑行菌：影响所有体重范围，但较大鱼更常见于因操作造成机械损伤后。疾病进展缓慢，表现为苍白皮肤区伴黄色边缘、口部、鳍部和鳃部糜烂。
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鳗弧菌：仅从未经注射疫苗的小鱼（约<15 g）或已在海上网箱饲养超过1.5年的成鱼（>750 g）中分离。表现为体色暗沉、贫血、出血，以及典型的“S”形异常游动姿势。
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哈维弧菌：感染鱼只嗜睡拒食，出现鳍基部和口腔外出血，肠道壁出血，脑充血。
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奥达利弧菌：感染鱼只嗜睡拒食，但与鳗弧菌和哈维弧菌不同，未观察到异常游动、眼球突出或肠道壁出血。
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溶藻弧菌：感染鱼只嗜睡、体色变暗，体表出现溃疡，腹腔积液，其出现与强烈应激或不良养殖条件相关。
诊断频率分布
在暴发事件级别（N=748）和实验室分离物级别（n=2,490），杀鱼巴斯德氏菌和海生滑行菌始终是主导病原体。跨层级百分比差异矩阵显示，这两类病原体与其余四种弧菌之间存在显著的频率差异。区域分布分析表明，尽管次要病原体类别存在微小局部变化，但杀鱼巴斯德氏菌和海生滑行菌的压力基线在整个海水养殖网络中保持稳定。
讨论与结论
讨论部分指出，杀鱼巴斯德氏菌和海生滑行菌的持续主导地位凸显了关键的生物安全挑战。在常规接种疫苗的个体中仍持续分离到杀鱼巴斯德氏菌，这提出了关于开放海域暴露时长或当地野生菌株空间分布的描述性田间假说。对于海生滑行菌，其在现场诊断中可通过形态学可靠验证，但其定量回收率受到专用培养基可用性的影响。鳗弧菌表现出针对特定鱼体大小的双峰分布模式，可能与养殖周期管理有关。其余三种弧菌作为机会性病原体，其低回收频率表明在登记网箱危机期间宿主生理应激得到控制。研究还报告了142例双重感染病例，揭示了复杂的多因素病理动力学。值得注意的是，研究中未检测到近期文献报道的维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）。
研究结论翻译如下：总之，这项多年期监测活动表明，虽然巴斯德氏菌病（杀鱼巴斯德氏菌）和滑行菌病（海生滑行菌）仍是临床暴发的主要病因驱动因素，但土耳其爱琴海沿岸的海水养殖业面临着复杂的多菌种细菌病原体矩阵。多种次要和机会性物种的持续回收表明，宿主易感性在漫长的生产窗口期内持续存在，需要全面的诊断覆盖。最终，这些汇总的现场描述性发现提供了一个现实的、行业范围的基线，有助于将鱼类健康管理从被动治疗转向预测性的、宏观区域的生物安全筛查方案。
