摘要
肺动脉高压（PAH）仍是一种进展性疾病，可用的治疗方法有限。作为我们持续研究的一部分，旨在从天然草药中寻找有效治疗PAH的药物，我们使用UHPLC-Q-Exactive MS方法分析了经过验证的草药配方Guilou Tongluo（GLTL）的化学成分，从数据库中检索了其可能被血液吸收的成分，并将这些成分与肺RNA测序数据结合起来，以发现对PAH具有潜在活性的成分。我们构建了一个化合物-疾病网络；对药物-疾病交叉基因进行了功能富集分析，并通过蛋白质-蛋白质相互作用分析确定了关键靶点。免疫浸润和单细胞RNA测序用于分析血管微环境，而诺模图和决策曲线分析则用于探索性评估候选靶点与组织水平疾病的关联。通过分子对接和分子动力学模拟预测了靶点的结合情况，并通过细胞热位移和药物亲和力靶点稳定性实验进行了验证；随后研究了这些成分的作用机制。结果表明，GLTL能够抑制PDGF-BB刺激的肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）的增殖并促进其凋亡，这种效应与平滑肌细胞中的IGF1R/PI3K/AKT信号通路有关，其中IGF1R被确定为关键靶点。分子对接和动力学模拟显示，柚皮苷和川芹素可以结合IGF1R，CETSA和DARTS实验结果也支持了IGF1R的结合。这两种化合物均能够结合IGF1R并抑制IGF-1/IGF1R信号通路，从而减少PI3K/AKT的磷酸化以及Cyclin D1、BCL2、PCNA和Ki67的表达。总之，川芹素和柚皮苷是GLTL中的潜在活性成分，在体外实验中能够抑制PDGF-BB刺激的PASMCs的增殖并促进其凋亡，这种效应与IGF1R/PI3K/AKT信号通路的抑制有关。
