腺样体成釉细胞瘤和牙本质生成性“幽灵细胞”肿瘤均存在WNT信号通路的突变，这对现有的诊断区分方法提出了挑战

《Laboratory Investigation》：Adenoid Ameloblastoma and Dentinogenic Ghost Cell Tumor Share WNT Pathway Mutations, Challenging Current Diagnostic Distinctions

摘要

目的

本研究旨在探讨两种形态上重叠的罕见牙源性肿瘤——腺样成釉细胞瘤（AA）和牙本质形成性幽灵细胞瘤（DGCT）的分子特征。

材料与方法

研究了13例世界卫生组织确认的病例，其中包括7例AA和6例DGCT。所有标本均进行了中心组织学审查和β-连环蛋白免疫组化检测。通过配对肿瘤-正常全外显子测序来评估拷贝数变化和肿瘤突变负荷。通过生物信息学分析识别的所有关键遗传变异均使用Sanger测序进行独立验证，以确保数据准确性。

结果

AA和DGCT在解剖分布和临床进程上存在显著差异（AA：中位年龄36岁，主要发生于下颌骨，症状持续时间为69个月，局部复发率为71%；DGCT：中位年龄33岁，主要发生于上颌骨，症状持续时间为17个月，局部复发率为33%）。所有肿瘤中均观察到核β-连环蛋白标记。两种肿瘤中均存在经典的WNT信号通路驱动因子（如CTNNB1外显子3热点突变或APC基因缺失），并且整体潜在的WNT通路参与率在AA为4/7例（P > 0.9999），在DGCT为4/6例。在AA病例中，有1例同时存在CTNNB1和APC2突变，另一例同时存在APC和AXIN1突变。AA更常见染色体1和染色体5的缺失（包括APC基因位点），且平均肿瘤突变负荷高于DGCT。未发现经典的MAPK或SHH信号通路驱动因子突变。

结论

总体而言，这些发现支持AA和DGCT具有共同的WNT/β-连环蛋白驱动的分子机制，表明它们属于更广泛的牙源性肿瘤谱系中的重叠形态表现，而非完全不同的实体。全外显子测序进一步扩展了之前的观察结果，揭示了除了经典CTNNB1突变之外的其他WNT通路异常。需要更大规模的多中心研究和功能研究来完善肿瘤分类和预后评估。

引言

腺样成釉细胞瘤（AA）是一种上皮性牙源性肿瘤，最近被世界卫生组织（WHO）认定为独立实体。其诊断特征包括典型的成釉细胞瘤样上皮、导管样结构、蜂窝状形态以及细胞浓缩现象（如小叶或旋涡状结构）。其他特征，如牙本质样沉积、透明细胞和局灶性幽灵细胞角化，也被视为重要的诊断依据。¹最新研究指出，β-连环蛋白在细胞核中的积累及WNT信号通路成分（包括CTNNB1）的突变是AA的关键分子特征。^{2, 3}

牙本质形成性幽灵细胞瘤（DGCT）也是一种局部浸润性牙源性肿瘤，与AA具有许多临床和组织学相似性，包括成釉细胞瘤样上皮、幽灵细胞和牙本质样沉积。^{1, 2, 4}历史上，AA和DGCT的区分依据是是否存在蜂窝状或导管样结构（AA存在，DGCT不存在）。然而，最近的研究表明这两种结构在某些DGCT病例中也可能观察到，^{2, 5, 6}这挑战了传统的诊断标准。此外，两种肿瘤类型均观察到核β-连环蛋白的积累，这是WNT信号通路活化的标志，进一步模糊了它们之间的界限。^{5, 6}在分子水平上，AA和DGCT均存在CTNNB1热点突变或其他WNT信号通路组分的突变，并伴随核β-连环蛋白的积累。²然而，由于这些肿瘤的罕见性以及研究中病例数量的有限，相关证据仍然不足。迄今为止，仅有两项研究使用全外显子测序（WES）来分析这两种肿瘤，发现了超出CTNNB1突变的WNT通路异常。^{2, 8}尽管如此，本研究的样本量仍然有限，许多缺乏CTNNB1突变的病例尚未得到全面的分子学分析。

为填补这些空白，我们对一组特征明确的AA和DGCT病例进行了全面的突变谱分析。我们的目标是明确这些肿瘤的突变谱型，评估它们之间的分子特征重叠，并探讨其对肿瘤分类和诊断实践的潜在影响。

章节片段

患者和组织样本

2009年至2024年间，在北京大学口腔医院口腔病理科被诊断为AA或DGCT的病例首先接受了资格筛选。纳入标准如下：（1）拥有肿瘤及对应的正常组织（经福尔马林固定、石蜡包埋[FFPE]或冷冻保存）；（2）根据组织学评估，肿瘤上皮成分占比≥60%；（3）DNA质量和数量足以进行WES分析。存档的苏木精和伊红染色切片来自

结果

本研究分析的病例的临床、组织学和分子特征总结在表2中，并在图1和图2中进行了展示。

讨论

本研究提供了综合的临床病理学和基因组学证据，支持AA和DGCT具有共同的WNT/β-连环蛋白驱动的分子机制。在我们的研究中，两种肿瘤均存在经典的WNT通路异常，包括CTNNB1外显子3热点突变和APC基因丢失（LOF）事件，并伴有普遍的核β-连环蛋白表达（表2；图1和图4）。AA（4/7例，57%）和DGCT（4/6例，67%）中WNT通路参与的相似频率说明两者之间不存在本质差异。

Jiang Xue|Wenyi Zhang|Jiaying Bai|Lisha Sun|Tiejun Li