整合型短读长单细胞测序技术揭示了宝山猪卵巢发育过程中的细胞异质性和isoform(转录本变体)多样性

《The FASEB Journal》:Integrated Short-and Long-Read Single-Cell Sequencing Reveals Cellular Heterogeneity and Isoform Diversity During Ovarian Development in Baoshan Pigs

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年11月14日 来源:The FASEB Journal? 4.2

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   摘要 卵巢发育是女性生殖功能的重要过程,需要多种卵巢细胞群之间的协调相互作用。在这项研究中,我们结合了Illumina短读长和Oxford Nanopore长读单细胞RNA测序技术,对1个月、3个月、

摘要

卵巢发育是女性生殖功能的重要过程,需要多种卵巢细胞群之间的协调相互作用。在这项研究中,我们结合了Illumina短读长和Oxford Nanopore长读单细胞RNA测序技术,对1个月、3个月、5个月和8个月大的宝山猪卵巢组织进行了分析。我们对细胞聚类和注释、细胞间通讯、全长转录本鉴定以及可变剪接进行了综合分析,以表征卵巢发育过程中的细胞和转录组动态。共获得了24,646个高质量的单细胞样本,鉴定了10种主要的卵巢细胞类型,其空间分布模式通过免疫荧光染色得到了进一步验证。卵巢细胞组成在发育阶段发生了动态变化,不同细胞类型具有不同的功能状态和转录调控网络。细胞间通讯分析显示,主导信号传递的细胞类型从卵泡细胞(SC)转变为斯莱克细胞(SMC),而包括COLLAGEN和NOTCH在内的关键通路在整个卵巢发育过程中都表现出持续的活性。长读单细胞测序共鉴定出11,942个基因的71,352个非冗余转录本异构体,其中卵泡支持细胞(FSM)的异构体占主导地位,并且在各个发育阶段表现出较高的表达水平。M3阶段显示出了最高的阶段特异性异构体和可变剪接事件多样性,外显子跳跃是最主要的剪接方式。我们的研究建立了宝山猪卵巢发育的全面转录组图谱,为了解细胞动态、细胞间通讯以及转录本异构体多样性提供了重要信息。

图形摘要

本研究结合了短读长读单细胞RNA测序技术,分析了宝山猪四个发育阶段的卵巢发育情况,鉴定了10种主要的卵巢细胞类型及其细胞间通讯的阶段性变化,揭示了广泛的转录本异构体多样性和可变剪接现象,其中M3阶段在阶段特异性异构体和可变剪接事件方面表现出最大的多样性。这些发现为卵巢发育提供了细胞和转录组层面的见解。

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

数据可用性声明

本研究生成的所有单细胞RNA测序数据已存入NCBI Sequence Read Archive(SRA),BioProject访问号为PRJNA1393272。

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