《Microvascular Research》：Ciprofol protects against hypoxia/reoxygenation-induced injury in cardiac microvascular endothelial cells via the DYRK1A/PI3K/AKT signaling pathway
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西普罗福（Ciprofol）能够保护人脐静脉内皮细胞（HUVECs）免受缺氧/再氧合引起的损伤。
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西普罗福（Ciprofol）能够保护人脐静脉内皮细胞（HUVECs）免受缺氧/再氧合引起的损伤。
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西普罗福（CIP）可恢复在缺氧/再氧合（H/R）损伤后HUVECs的增殖、迁移能力和生存能力。
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西普罗福（CIP）能够减少细胞凋亡和DNA损伤，并抑制caspase-3的活化。
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西普罗福（CIP）可以下调DYRK1A的表达并激活PI3K/AKT信号通路。
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西普罗福（CIP）通过DYRK1A/PI3K/AKT轴介导其对细胞的保护作用。
引言
缺血-再灌注损伤（I/R）是心肌梗死、中风、器官移植和大型血管手术中的关键病理生理事件（Cai等人，2022年）。虽然迅速恢复血流对组织存活至关重要，但它却会通过活性氧（ROS）的爆发、钙超载和炎症通路的失调反而加剧内皮功能障碍（Bejarano等人，2018年）。I/R损伤的主要靶点是血管内皮，即覆盖整个血管系统的单层内皮细胞。在I/R压力下，内皮细胞会转变为促炎表型，表现为屏障完整性降低、血管活性物质释放减少以及促凝物质的产生增加（Haybar等人，2019年；Rajendran等人，2013年）。因此，精确调控内皮对I/R的反应对于维持细胞稳态至关重要；过度的炎症会导致不良的组织重塑，而恢复不足则会延长缺血性损伤。因此，阐明内皮适应I/R的分子机制对于开发针对性的治疗策略至关重要。
双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A（DYRK1A）最近被发现是一种多效细胞命运调节因子，在细胞增殖、凋亡和细胞骨架动态中发挥作用（Shukla等人，2022年）。最初发现DYRK1A与神经元发育和唐氏综合征有关，它能够磷酸化多种底物以调节细胞过程（Wegiel等人，2008年）。尽管DYRK1A被认为与内皮细胞的剪切应力感知和血管生成有关，但其在缺血应力下的作用仍大部分未被探索（Breslin和Kurtz，2009年）。越来越多的证据表明，DYRK1A通过PI3K/AKT通路发挥作用，该通路在I/R期间会被缺氧诱导因子（HIFs）和ROS激活（Murillo等人，2025年；C. Zhang等人，2022年）。然而，DYRK1A在缺氧内皮中是具有保护作用还是有害作用，以及其活性如何与PI3K/AKT信号通路相互作用，目前尚不明确。
西普罗福（CIP）是一种新型静脉麻醉剂，源自苯酚环己醇骨架，具有强大的抗氧化和抗炎特性，这些特性与其镇静作用无关（Yang等人，2022b；Yu等人，2023年）。最近的临床和临床前研究表明，CIP可以通过清除自由基和调节线粒体通透性转变来减轻肝脏和肾脏的I/R损伤（Liu等人，2023年）。此外，CIP还能减轻异丙肾上腺素引起的氧化损伤、炎症反应和心肌细胞凋亡（Yang等人，2022b）。然而，CIP的血管保护作用机制，特别是在I/R引起的内皮损伤背景下，尚未完全明确。
我们假设CIP通过激活PI3K/AKT信号通路来减轻内皮细胞在I/R后的凋亡。利用人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的体外培养，我们研究了CIP对I/R引起的细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡变化的影响。我们的研究结果表明，CIP能够抑制DYRK1A的表达并激活PI3K/AKT信号通路，从而促进细胞存活和血管生成，同时抑制氧化应激引起的凋亡。这些数据表明CIP可能是调节内皮炎症相互作用的有效药物，并为针对缺血性血管疾病中的DYRK1A依赖性信号通路提供了机制上的见解。
章节摘录
细胞培养
HUVECs购自Takara Bio（日本京都），并在内皮生长培养基（R&D Systems，CCM027）中培养。细胞在37°C、5% CO?的湿润培养箱中维持。1-2天后，所有实验中的细胞密度达到60-70%。用于HUVECs的传代次数为7-20代。
体内和体外的I/R损伤模型
小鼠I/R的诱导方法已在先前的研究中描述过（Matsui等人，2007年）。共购买了48只20-25克的雄性C57BL/6小鼠，来自西安交通大学动物中心。
CIP在体外抑制HUVECs的I/R损伤
为了评估CIP对心肌I/R损伤的保护作用，我们首先建立了小鼠的体内心肌I/R模型。结果表明，I/R组的梗死面积与风险区域的比率（IS/AAR）高于对照组，而CIP处理显著降低了心肌梗死面积（图1A）。I/R挑战显著提高了心肌损伤标志物cTnT和CK-MB的水平，而CIP给药（1-10 mg/kg）剂量依赖性地减少了cTnT的释放。
讨论
尽管治疗技术有所进步，缺血性心脏病仍然是全球主要的死亡原因之一（Cui等人，2017年）。在这里，我们首次提供了综合证据，证明CIP通过提高细胞存活能力、促进迁移、抑制凋亡和重新调节酪氨酸代谢来恢复I/R后的内皮稳态。这些多效作用都集中在DYRK1A/PI3K/AKT信号通路上，表明CIP是治疗I/R引起的内皮功能障碍的有希望的候选药物。
CRediT作者贡献声明
段磊：验证、软件、资源管理。 周涛：监督、软件、资源管理。 孙梦良：软件、资源管理、项目协调。
利益冲突声明
作者声明他们没有已知的可能会影响本研究工作的 finanzielle Interessen oder pers?nliche Beziehungen.
致谢
本研究得到了国家自然科学基金（编号：82002849）的支持。作者感谢审稿人和编辑的敏锐和有益的意见。
段磊 | 何欣 | 何国军 | 周涛 | 孙梦良
