摘要
trimENU> triple-negative乳腺癌（TNBC）仍然是一种具有侵袭性的恶性肿瘤，这主要是由于其对传统凋亡诱导疗法的抵抗性以及其能够诱导细胞自噬从而存活。因此，寻找新的细胞死亡机制至关重要。薯蓣素（PL）是一种从Piper longum中提取的生物碱，已显示出良好的抗癌活性，但其诱导TNBC细胞发生副凋亡（paraptosis）和抑制自噬的能力尚未被研究。在本研究中，通过形态学分析、细胞存活率检测、Annexin-V/PI染色、内质网（ER）应激标志物评估、利用串联荧光构建物检测自噬流，以及使用NAC、氯喹、环己亚胺和MAPK抑制剂进行药理学抑制，同时结合ALIX基因的敲低和过表达实验，来探讨PL诱导的细胞死亡机制。此外，还利用三个独立的公共转录组数据集进行了基于ALIX表达的生存分析。研究表明，PL在TNBC细胞中的细胞毒性高于MCF-10A细胞，这种毒性通过胞质囊泡化介导的副凋亡实现，囊泡来源于内质网，伴有内质网应激、多聚泛素化蛋白积累、Bip/CHOP上调、线粒体功能障碍、活性氧（ROS）增加和ATP减少。NAC能够抑制PL诱导的细胞死亡，这提示其作用机制可能与硫化物键的破坏有关。PL还会损害晚期的自噬过程，表现为LC3-II/p62的积累，并下调ALIX的表达；而ALIX的过表达则能恢复细胞存活并减少副凋亡现象。在三个研究队列中的两个队列中，较高的ALIX表达水平预示着较差的TNBC预后，说明ALIX在治疗中可能具有潜在意义。
