槲寄生母酊剂通过调控Na+/K+ATPase与内皮依赖性通路发挥抗高血压作用的多靶点机制研究

《Frontiers in Physiology》：Viscum album L. mother tinctures modulate Na+/K+ ATPase activity and expression, and promote endothelium-dependent vasodilation via SK channel and nitric oxide signalling

本研究通过体外与离体实验系统揭示了欧洲槲寄生（Viscum albumL.）母酊剂（VAMT）的抗高血压潜力，发现其可通过抑制肾小管Na+/K+ATPase活性/表达（如夏季冷杉宿主样本）及激活一氧化氮（NO）/可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）/环磷酸鸟苷（cGMP）通路（如冬季松树宿主样本），经小电导钙激活钾通道（SKCa）介导血管舒张，为宿主树种与采收季节优化传统草药疗效提供了分子依据。

　　

引言

高血压作为全球高发的慢性心血管疾病，其治疗常因多药联用导致副作用频发，推动了对植物源药物的探索。欧洲槲寄生（Viscum albumL.）在传统医学中用于高血压治疗，但其作用机制尚不明确。本研究聚焦于不同宿主树种（如冷杉、松树、苹果树）和采收季节（夏/冬）制备的槲寄生母酊剂（VAMT），系统评估其细胞安全性、氧化应激水平、Na⁺/K⁺ATPase调控作用及血管舒张机制。

材料与方法

实验选取夏季与冬季采收自5种宿主树（包括Abies alba、Pinus sylvestris、Malus domestica等）的VAMT样本。通过高效薄层色谱（HPTLC）和紫外分光光度法分析总黄酮及酚酸含量；以猪肾近端小管细胞（LLC-PK1）评估细胞毒性（MTT法）、活性氧（ROS）生成及Na⁺/K⁺ATPase活性与表达（Western blot）；利用自发性高血压大鼠（SHR）的肠系膜血管床（MVB）模型研究血管舒张效应及分子通路（如NO合成酶抑制剂L-NAME、钾通道阻滞剂等）。

结果

1. 1.
   安全性特征：除夏季栎树宿主VAMT具细胞毒性外，其余样本均无显著细胞损伤或ROS诱导作用（图1、3）。
2. 2.
   化学组分差异：夏季样本总黄酮含量普遍高于冬季，其中冷杉与松树宿主VAMT的黄酮水平最高（表1）。HPTLC证实绿原酸为主要酚酸成分（图2）。
3. 3.
   Na⁺/K⁺ATPase调控：夏季冷杉VAMT可显著抑制酶活性（42%，图4D），而所有冬季样本均下调该酶表达（32%–48%，图5），提示季节与宿主树种共同影响肾钠重吸收调控。
4. 4.
   血管舒张机制：仅冬季松树VAMT（PW）在SHR模型中介导剂量依赖性血管舒张（0.03–0.1 mg），该效应被L-NAME、高钾溶液及SK_Ca阻滞剂阿帕明完全抑制（图6），表明其依赖NO/sGC/cGMP通路与SK_Ca通道激活。

讨论

本研究首次揭示VAMT通过多靶点作用协调抗高血压效应：一方面，特定样本（如夏季冷杉）通过抑制肾Na⁺/K⁺ATPase促进钠排泄；另一方面，冬季松树VAMT通过内皮NO信号通路与SK_Ca通道开放拮抗血管收缩。黄酮与酚酸类成分可能协同调控氧化应激与离子通道活性，但具体活性分子需进一步分离验证。非单调量效关系提示复杂基质中多成分拮抗/协同作用的存在。

结论

槲寄生母酊剂的抗高血压活性高度依赖宿主树种与采收季节。冬季松树来源VAMT通过NO/SK_Ca通路介导的血管舒张作用尤为突出，为其在心血管疾病领域的应用提供了理论依据。未来需开展in vivo研究验证其系统性降压效应。