综述：基于微流控芯片的细胞外囊泡分离策略综述：连接传统方法与临床应用

《BioChip Journal》：A Review of Microfluidic Chip-Based Strategies for Extracellular Vesicle Isolation: Bridging Traditional Methods and Clinical Translation

外泌体作为生物标志物和药物载体在生物流体中具有分子特性，但其临床分离面临高纯度、低体积和快速处理挑战。本文系统评述传统分离技术（超速离心、免疫亲和、尺寸排阻色谱）与微流控技术（基于表面标记的亲和分离和无标记物理分离），分析后者在保持结构完整性和避免选择偏倚方面的优势，并通过性能、样本需求和可扩展性比较揭示微流控技术突破传统局限，讨论融合亲和与无标记机制的混合系统，展望自动化、并行化及床边整合的未来方向，强调标准化临床适用平台的重要性。

　　

摘要

细胞外囊泡（EVs），包括外泌体，由于其分子成分以及在生物流体中的可获取性，已成为强大的生物标志物和治疗载体。然而，可靠的EV分离仍然是一个重大挑战，尤其是在临床环境中，高纯度、小体积和快速处理是必不可少的。本文系统地回顾了当前的EV分离技术，重点介绍了传统方法（如超速离心、免疫亲和捕获和尺寸排阻色谱法）以及快速发展的微流控技术。特别关注了两种主要的微流控分离技术：基于亲和力的系统和无标记系统。基于亲和力的微流控技术利用表面标记物和配体相互作用来选择性分离EV亚群，具有高特异性，但在通量和标记物依赖性方面存在权衡。相比之下，无标记微流控平台利用尺寸、电荷和声学响应等物理特性实现温和、高通量的分离，无需生物化学标记，从而保持囊泡的完整性并避免选择偏差。通过对比评估分离性能、样本要求和可扩展性，本文强调了微流控技术如何克服传统方法的核心局限性。此外，还讨论了结合亲和力和无标记机制的混合系统，以提高效率和灵活性。最后，本文探讨了自动化、并行化和即时检测整合的未来发展方向，强调了微流控EV分离在推动精准诊断和转化研究中的作用。这些见解共同强调了继续创新、开发标准化且临床适用性强的EV分离平台的必要性。