《Phytomedicine》：Pharmacological potential of aqueous extract of
Ononis natrix in mitigating early-life lead toxicity: behavioral, biochemical, histological, and immunohistochemical evaluation
编辑推荐：
铅中毒对小鼠神经及肝肾损伤的影响及黄马唐水提物干预研究。研究通过行为学测试（Y迷宫、高架十字迷宫等）、生化指标（ALT、AST、MDA、CAT等）及组织病理学分析，发现慢性铅暴露导致小鼠认知障碍、焦虑抑郁样行为及肝肾氧化损伤，而黄马唐水提物（AEON）可剂量依赖性改善上述问题，其机制涉及降低MDA、提升CAT活性及抑制GFAP表达。
阿斯玛·哈吉-赫利法（Asmaa Haj-Khlifa）、伊曼·梅夫塔（Iman Meftah）、姆吉德·乌赫里布（Mjid Oukhrib）、法伊萨尔·阿齐兹（Faissal Aziz）、卢布娜·布赫扎尔（Loubna Boukhzar）、纳吉布·基萨尼（Najib Kissani）、哈利玛·甘拉尼（Halima Gamrani）、穆莱·穆斯塔法·布亚塔斯（Moulay Mustapha Bouyatas）
摩洛哥马拉喀什卡迪阿亚德大学（Cadi Ayyad University）科学学院塞姆拉利亚分校（Semlalia）神经科学、药理学与环境研究单元（Neuroscience, Pharmacology and Environment Unit, NPEU）。该单元隶属于医学院和药学院，拥有临床、实验与环境神经科学实验室。
摘要
背景
长期接触铅（Pb）是一个重大的公共卫生问题，因为它会对神经行为和生理系统造成长期影响。Ononis natrix的煎剂和浸剂在传统医学中被广泛用于治疗各种疾病。虽然一些研究强调了其丰富的生物活性成分和抗氧化特性，但目前仍缺乏对其药理作用的全面科学研究。我们之前已经证明了O. natrix对铅毒性的缓解作用。然而，其在小鼠幼年期（3至8周大）对多个系统铅损伤的保护作用尚未得到研究。
目的
本研究旨在从行为学、生化、组织学和免疫组化角度评估O. natrix水提取物（AEON）对幼年期慢性铅暴露的潜在疗效。
方法
共48只雄性小鼠被分为4组：对照组、通过饮用水暴露于铅的组（浓度为1g/l），以及两组分别接受AEON（剂量为100 mg/kg和500 mg/kg）联合治疗的组，从实验第21天开始直至实验结束。进行了行为测试（Y形迷宫、高架十字迷宫、尾部悬挂试验、 splash试验、开放场地测试和旋转棒测试）。对血液进行了生化分析，检测丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肌酐和尿素水平。此外，还测定了大脑、肝脏和肾脏中的丙二醛（MDA）水平和过氧化氢酶（CAT）活性。并对肝脏和肾脏进行了组织学分析，并对前额叶皮层和海马体亚区的胶质纤维酸性蛋白（GFAP）进行了免疫组化分析。
结果
结果显示，长期铅暴露会导致空间记忆能力下降、焦虑和抑郁样行为增加以及运动协调能力减弱，同时大脑中的MDA水平升高、CAT活性降低。这些大脑功能障碍与海马体和前额叶皮层中GFAP染色增强有关。在肝肾水平上，观察到生化标志物升高，尤其是肝脏标志物升高，同时肝脏和肾脏的氧化应激增加，并伴有肝肾组织病理损伤。然而，AEON的使用改善了记忆表现，具有抗焦虑作用，减轻了抑郁样行为，并增强了运动协调能力。此外，AEON还恢复了大脑的氧化应激状态，降低了星形胶质细胞的GFAP表达。AEON还恢复了铅引起的肝肾功能障碍，表现为生化标志物下降、MDA水平降低以及肝脏和肾脏中CAT活性升高，同时肝肾结构也得到恢复。这种效果在接受500 mg/kg剂量的组中更为明显，显示出剂量依赖性。
结论
我们的研究首次证明了AEON在敏感发育期对所有铅诱导的功能障碍具有显著的治疗效果，突显了其在缓解与铅中毒相关的神经和肝肾损伤方面的潜力。
引言
铅（Pb）是首次在国家健康与营养调查（Lanphear等人，2024年）中被检测到的有毒物质。环境中的铅暴露长期以来一直是一个令人担忧的问题，在所有重金属中毒中，铅的毒性最为普遍，这凸显了有效治疗干预的必要性。人类接触铅的主要途径与其广泛的应用有关，包括含铅汽油、陶器制造、船舶制造、油漆、铅管、电池回收、电网生产、武器工业、颜料制造和书籍印刷等。此外，食物（如蔬菜、谷物、肉类和牛奶）中的铅污染进一步加剧了这种暴露（Collin等人，2022年）。不幸的是，人体会吸收这些来源的铅，并逐渐在其体内积累。在年轻人中，这种积累更为严重，因为他们的组织处理和排除铅的能力较弱。即使是在小剂量下，长期铅暴露也会导致危险的积累，扰乱多个系统，包括消化系统、神经系统、排泄系统和生殖系统等（Lanphear等人，2024年；Gonzalez-Villalva等人，2025年）。
铅螯合治疗的效果往往不稳定且可能产生副作用，这突显了有效管理铅中毒的挑战。因此，需要探索替代治疗方法，例如使用药用植物，这些植物可能提供更自然的解决方案，副作用更少且具有显著的治疗潜力。在这方面，民族药理学为发现基于传统药用植物知识的新治疗方法提供了有希望的方向。
Ononis natrix L.通常被称为黄色荨麻，在摩洛哥被称为afezdad，属于豆科植物。它在传统医学中有多种用途，包括治疗肝脏和肾脏疾病以及心血管、消化和呼吸系统问题（El-Ghazouani等人，2024年；Bussmann等人，2025年）。选择O. natrix来评估其对铅中毒的有效性，是因为它在传统上被用于治疗肝脏、肾脏和泌尿系统疾病，同时科学数据也表明其含有高水平的多酚、抗氧化特性和螯合能力。铅是一种影响多个器官（包括肝脏和肾脏）的重金属，需要通过螯合和肾脏排泄来有效清除。我们假设这种植物可以有助于铅的解毒，据我们所知，我们是首次评估O. natrix水提取物（AEON）对铅中毒疗效的研究。
本研究是我们之前工作的延续，我们在之前的研究中评估了AEON对成年期以及产前和产后慢性铅暴露的影响（Haj-Khlifa等人，2025a；2025b）。在本研究中，我们重点关注AEON对幼年期慢性铅暴露的影响，这是一个关键的发展阶段，此时各种生理系统仍在成熟过程中。我们的目标是评估AEON在缓解多个目标器官（包括大脑、肝脏和肾脏）铅诱导的功能障碍方面的潜力。为此，我们采用了多维方法，包括行为测试、生化分析、氧化应激测量、组织学评估和免疫组化分析。这种综合方法有助于更深入地了解AEON在缓解不同器官系统铅毒性方面的潜力，从而为开发更有效的治疗方法做出贡献。
部分内容摘要
化学物质
醋酸铅三水合物由Panreac Quimica（西班牙巴塞罗那）提供（批次号0000450930，1000克）。
植物材料
O. natrix采集自摩洛哥的Souiria地区。植物鉴定由卡迪阿亚德大学（Cadi Ayyad University）塞姆拉利亚分校（Semlalia）的科学学院教授Ahmed Ouhammou完成。该植物的凭证标本（编号MARK13702）存放在同一机构的标本馆中。植物材料在室温下阴干，并在受控条件下储存。
植物提取物特性
根据OECD指南进行的急性口服毒性测试表明，AEON在剂量高达5 g/kg时未显示毒性迹象，表明其在体内应用具有较大的安全边际。该提取物显著的抗氧化特性通过2,2-二苯基-1-吡啶基肼自由基清除试验（IC?? = 10.22 mg/ml）得到证实，并通过铁还原抗氧化能力试验（IC?? = 13.49 ± 0.34 mg/ml）得到进一步验证（Haj-Khlifa等人，2025a）。AEON
讨论
本研究通过行为学、生化、氧化应激、组织学和免疫组化分析，评估了AEON对幼年期铅暴露的治疗潜力。这些综合方法使我们能够评估AEON在缓解大脑、肾脏和肝脏铅诱导变化方面的疗效。
暴露于铅的小鼠在Y形迷宫测试中的自发交替行为显著减少，表明其空间工作记忆受损。
结论
总之，本研究调查了AEON对早期发育期间铅诱导的毒性的治疗效果。主要结果表明，行为功能显著改善，大脑氧化应激减轻，海马体和前额叶皮层中的星形胶质细胞激活减少。此外，AEON对肝脏和肾脏的生化和组织病理学指标的积极影响进一步支持了其治疗潜力。
声明和披露
利益冲突
作者声明他们没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文所述的工作。
数据可用性
本研究中的数据可应要求提供。
作者署名声明
阿斯玛·哈吉-赫利法（Asmaa Haj-Khlifa）：概念构思、研究设计、数据管理、方法论、初稿撰写。伊曼·梅夫塔（Iman Meftah）：研究、数据分析。姆吉德·乌赫里布（Mjid Oukhrib）：研究。法伊萨尔·阿齐兹（Faissal Aziz）：研究、数据分析。卢布娜·布赫扎尔（Loubna Boukhzar）、纳吉布·基萨尼（Najib Kissani）和哈利玛·甘拉尼（Halima Gamrani）：监督。穆莱·穆斯塔法·布亚塔斯（Moulay Mustapha Bouyatas）：撰写、审稿与编辑、验证和监督。
作者贡献声明
阿斯玛·哈吉-赫利法（Asmaa Haj-Khlifa）：初稿撰写、方法论设计、研究、数据管理、概念构思。伊曼·梅夫塔（Iman Meftah）：研究、数据分析。姆吉德·乌赫里布（Mjid Oukhrib）：研究。法伊萨尔·阿齐兹（Faissal Aziz）：研究、数据分析。卢布娜·布赫扎尔（Loubna Boukhzar）：监督。纳吉布·基萨尼（Najib Kissani）：监督。哈利玛·甘拉尼（Halima Gamrani）：监督。穆莱·穆斯塔法·布亚塔斯（Moulay Mustapha Bouyatas）：撰写、审稿与编辑、验证和监督。
利益冲突声明
我们声明与这篇题为《Ononis natrix水提取物在缓解早期铅中毒中的药理潜力：行为学、生化、组织学和免疫组化评估》的手稿的发表无关任何利益冲突。
没有任何组织或个人关系可能不恰当地影响本研究的进行或结论。
