《Cancer Medicine》：Analysis of CacyBP/SIP, ERK1/2, and p38 Expression in Low- and High-Grade Papillary Urothelial Carcinoma
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本研究发现，在高级别乳头状尿路上皮癌(HG-UC)中，CacyBP/SIP与p38的表达显著升高，而ERK1/2表达降低。该研究首次揭示了CacyBP/SIP可能通过调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路关键分子ERK1/2及p38，在膀胱癌进展中发挥关键作用，为探索化疗耐药膀胱癌的新型治疗靶点提供了分子依据。
研究背景
膀胱癌约占所有恶性肿瘤的3%，是泌尿系统第二常见的恶性肿瘤，也是全球癌症相关死亡的第十三大原因。其中，尿路上皮癌占90%的病例，可分为肌层浸润性和非肌层浸润性。在后者中，乳头状尿路上皮癌(PUC)进一步分为低级别(LG-UC)和高级别(HG-UC)。肿瘤的侵袭性取决于疾病的分期和分级，高级别肿瘤具有更大的进展和转移潜力。CacyBP/SIP蛋白和MAPK激酶在决定细胞存亡的各种细胞过程和信号通路中扮演关键角色。本研究旨在利用免疫组织化学和分子分析评估CacyBP/SIP、ERK1/2及p38在低、高级别乳头状尿路上皮癌中的表达。
材料与方法
研究材料取自比亚韦斯托克医科大学泌尿外科膀胱肿瘤切除术后患者的组织，研究获得了该大学生物伦理委员会的批准。研究组包括20名高级别和20名低级别乳头状尿路上皮癌患者，以同一患者的邻近无癌组织作为对照。
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免疫组织化学鉴定：组织样本经固定、脱水、包埋、切片后，使用针对CacyBP/SIP、ERK1/2及p38的一抗进行免疫染色，并通过光学显微镜和图像分析软件评估免疫反应强度。
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实时荧光定量PCR：使用试剂盒从冰冻组织样本中提取总RNA并反转录为cDNA，使用SYBR Green染料和特异性引物进行qRT-PCR反应，通过ΔΔCt方法相对定量CACYBP、MAPK1、MAPK3和MAPK14基因的表达水平，并以GAPDH为内参基因。
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统计分析：使用Statistica软件包，采用单因素方差分析(ANOVA)比较组间差异，事后分析使用费希尔最小显著差异法(LSD)或图基法(HSD)，统计显著性设定为p < 0.05。
结果
在所有患者样本中，针对CacyBP/SIP、ERK1/2及p38的免疫组化反应均为阳性，但反应强度在不同组织间存在差异。与邻近正常组织相比，CacyBP/SIP和p38在肿瘤组织中的表达显著增强，且在高分级肿瘤中尤为明显；而ERK1/2在肿瘤组织中的表达则降低，尤其在低分级癌中减弱最显著。密度测定结果进一步量化了这些差异。
RT-PCR分析显示，与邻近正常组织相比，肿瘤组织（尤其是高级别癌）中CACYBP和MAPK14（编码p38）的基因表达显著增加。相反，编码ERK1/2的MAPK1和MAPK3基因表达在肿瘤组织中降低，在低级别肿瘤中尤为明显。
讨论
研究结果表明，CacyBP/SIP在膀胱癌组织中的表达随恶性程度增加而升高。这与先前在胃癌、结肠癌等肿瘤中的发现趋势一致，提示CacyBP/SIP在多种癌症中扮演重要角色。ERK1/2表达的降低，尤其是在低级别癌中，可能源于癌细胞生物合成过程紊乱或CacyBP/SIP对其的去磷酸化作用。p38表达的增加与肿瘤分级正相关，其在高级别癌核内的强表达提示其可能参与了与转录相关的进程。这些发现共同指向CacyBP/SIP可能通过调控ERK1/2和p38激酶的活性，影响MAPK信号通路，从而在膀胱癌的进展中发挥关键作用。这为理解膀胱癌，特别是化疗耐药病例的分子机制提供了新视角。
结论
本研究发现CacyBP/SIP在乳头状尿路上皮癌中表达升高，并与肿瘤分级相关，同时伴随ERK1/2表达降低和p38表达升高。这提示CacyBP/SIP可能通过调节MAPK通路中的ERK1/2和p38激酶，在膀胱癌的发生发展中发挥调控作用。这些结果为膀胱癌，尤其是化疗耐药型膀胱癌，揭示了潜在的新型分子靶点，为未来开发治疗策略提供了依据。然而，本研究样本量有限，CacyBP/SIP在MAPK通路中发挥促癌或抑癌作用的具体分子机制尚未完全阐明，需要在更大规模的研究中利用更多分子技术进行深入验证和探索。
